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El microscopio del HT de Tomocube habilita la cuantificación escritura de la etiqueta-libre del contenido celular del lípido

En una ruptura para la investigación coloca tan diverso como la diabetes, la ateroesclerosis y los combustibles biológicos, la masa, la concentración, el volumen, y la superficie de las gotitas individuales del lípido se han medido en células vivas, sin manchas por primera vez usando un microscopio de Tomocube (HT) Holotomography. La eliminación de cualquier paso preparatorio o de coloración, y la resolución lateral de 110 nanómetro del microscopio del HT de Tomocube, significa que los investigadores pueden ahora rastrear fácilmente cambios en la distribución del lípido en un cierto plazo en la alta resolución, habilitando estudios metabólicos del contenido celular del lípido.

El microscopio del HT de Tomocube habilita la cuantificación escritura de la etiqueta-libre del contenido celular del lípido
Holotomography de un hepatocito humano, Huh-7. imagen de la fluorescencia de las imágenes del tomograma 3D (dejadas) (correcta). Las Altas-RI gotitas correlacionan a las gotitas del lípido manchadas por el rojo del Nilo. 95,5% de los organelos cuyo RI valora es más alto que n = 1,375 se recubren a las gotitas del lípido manchadas por el rojo del Nilo. Reproducido de 6:36815 científico de los partes de Kim y otros.

Las imágenes cuantitativas inmediatas de la fase de la morfología intacta de células vivas son una ventaja dominante de la microscopia del HT comparada a otras tecnologías de la imagen. Holotomography descubre el índice de refracción absoluto (RI) de cada voxel midiendo el retraso de la fase. Puesto que el RI de las gotitas del lípido es distintamente más alto que el citoplasma u otros componentes celulares, el contraste es fácilmente suficiente a la imagen en la alta resolución. Si se utiliza el microscopio de Tomocube HT-2H, que soporta holotomography y proyección de imagen de la fluorescencia 3D, los experimentos de la co-localización son posibles con la etiqueta apenas de la proteína del objetivo o del tipo específico de ácido graso bastante que teniendo que manchar la gotita del lípido y la molécula del objetivo.

Compare esto al brillante-campo o a la microscopia del contraste de la fase, que visualizan convenientemente morfología celular pero ofrezca solamente la información cualitativa. La microscopia de fluorescencia confocal captura las imágenes estructurales de alta resolución 3D pero implica los procedimientos de etiqueta invasores que inducen inevitable fototoxicidad o photobleaching.”

Aubrey Lamberto, director de marketing, Tomocube

El lípido tiene un papel crucial en la modulación de muchas funciones celulares y una avería en su regla se asocia a diabetes, a ateroesclerosis y a otras enfermedades metabólicas. La ingeniería genética de las algas bacterianas y fotosintéticas lípido-ricas para aumentar el rendimiento de ácidos grasos es también un área de investigación importante en el revelado de combustibles biológicos. En ambos casos, la cantidad de lípido necesita ser cuantificada para estudiar la dinámica metabólica in vitro.

Hasta ahora, la visualización de la situación del lípido requirió las células ser preparada usando antenas de coloración lípido-específicas, tales como rojo del Nilo o el aceite hace de nuevo, interfiriendo con los procesos celulares nativos. Mientras tanto, la cromatografía ha sido ampliamente utilizada cuantificar el contenido del lípido aunque ésta mida solamente el promedio de centenares de algas después de procedimientos experimentales que toma tiempo.

Según Lamberto, “Holotomography muy se adapta a la detección de las altas moléculas de RI, que es una característica de las gotitas del lípido. Sin embargo, es igualmente aplicable al estudio de otras altas-RI moléculas, tales como polímeros, nanoparticles, o liposomas, y los investigadores pueden aplicar aproximaciones idénticas a la de la proyección de imagen del lípido usando microscopia del HT.

La “cuantificación rápida del contenido celular del lípido es una característica única de la proyección de imagen del HT y tiene potencial enorme para la adopción en biología celular así como en los campos de la bioingeniería o de la industria de los combustibles biológicos.”

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