Comptage de cellules sans guides pour réduire des rebuts et le coût

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Une entrevue avec Daniel Schieffer, directeur de technologie, DeNovix

Pourquoi est-ce que des cellules sont actuel comptées avec des guides ? Combien temps sont les guides type utilisés et ce qui arrive à eux après qu'ils soient employés ?

Jusque récemment, des cellules ont été type comptées sur un hémocytomètre réutilisable de quartz. Avec l'arrivée des ripostes robotisées de cellules il y a 12-15 ans, les guides remplaçables sont devenus répandus. C'était principalement une voie pour que ces ripostes de cellules chargent et de comptent des guides. Tandis qu'ils sont pratiques pour les systèmes robotisés, ils introduisent un coût actuel complémentaire pour des laboratoires, et le plastique à utiliser une seule fois a également une empreinte de pas environnementale significative.

Shutterstock | Watiporn Yenchum

Chaque guide est conçu pour être employé seulement une fois. Il pourrait y avoir deux comptes selon le guide, mais ils sont tout l'à utiliser une seule fois et sont par habitude après utilisation rejeté. Nous avons entendu des histoires des gens essayant de réutiliser les guides à utiliser une seule fois ; cependant, dans l'intérêt de l'exactitude ceci n'est pas recommandé par des constructeurs de guide. Il ajoute également de manière significative au temps à commande manuelle requis pour compter des cellules.

Comment le CellDrop élimine-t-il les guides remplaçables ? Où les cellules sont maintenues et comment le nettoyage complet est-il réalisé entre les passages ?

Pour améliorer ce système DeNovix a combiné le meilleur de et neuf, remplaçant les guides en plastique par deux permanents, les surfaces optiques de saphir de pente. Les surfaces sont parallèles positionné à une un un autre par une vis de haute précision pour former une chambre analogue à un hémocytomètre traditionnel. La technologie de base est adaptée de notre suite DS-11 de spectrophotomètres de microvolume et les usagers sont immédiatement au courant de la charge, mesure et essuient le flux de travail propre.

Les chercheurs dispensent les cellules dans la chambre, compte de pression et l'analyse est exécutée automatiquement. Après, l'échantillon est simplement essuyé loin avec un chiffon sec de laboratoire et le CellDrop est prêt pour le prochain échantillon. Une des caractéristiques grandes du CellDrop est un grand, élevé écran de définition avec une prévision sous tension de la chambre de mesure. Ceci permet à l'usager de confirmer immédiatement que les surfaces sont propres.

Comment le rendement compare-t-il aux ripostes guide guide de cellules ?

Les guides guide guide de plastique d'utilisation de ripostes qui introduisent des incohérences entre les comptes. Par exemple, si un chercheur a 10 guides en plastique, il y aura 10 légères différences entre chacun des guides. Le système de CellDrop emploie une surface solide de saphir qui est cohérente chaque fois il est employée, et les hauteurs de chambre sont automatiquement étalonnées chaque fois que l'instrument est mis en marche.

C'est passage très reproductible à faire fonctionner. De plus, les comptages cellulaires sur CellDrop sont comparés très rapide à d'autres ripostes robotisées, tellement il y a une mise à jour réelle de rendement dans l'expérience utilisateur.

Avec quelles applications le CellDrop fonctionne-t-il ?

Nos applications principales sont actuel dans la viabilité de cellules, c.-à-d. comptes sous tension/morts pour la culture cellulaire mammifère, de levure et d'insecte. Il y a deux modèles de la procurable-doubles fluorescence et brightfield de CellDrop, ou brightfield seulement.

Pour des mesures de viabilité de brightfield, les scientifiques emploient une teinture telle que le bleu trypan pour souiller des cellules. Le bleu trypan a ses limitations, ainsi pour des laboratoires exigeant une spécificité et une exactitude plus grande ainsi qu'une gamme d'applications plus grande, nous recommandons l'utilisation de la fluorescence. Le CellDrop peut employer les fluorophores courants tels que l'orange d'acridine et l'iodure de Propidium (AO/PI), où les souillures fluorescentes d'ao vivent vert de cellules et les cellules mortes de souillures de pi rouges.

Utilisant ceci prend complet la conjecture hors du compte sous tension/complètement des cellules ou de compter les cellules primaires dans les échantillons qui sont potentiellement contaminés. Par exemple, elle évite de compter les hématies ou d'autres morceaux et saletés qu'un compte trypan typique d'algorithme ou de manuel pourrait confondre pour une cellule, qui mène à un FAUX compte.

Vous pouvez également analyser les cellules tranfected par GFP avec CellDrop, fournissant le rendement de viabilité et de transfection de %. La plate-forme est conçue pour être ouverte d'un large éventail d'applications en travers de biologie cellulaire mais également ambiant, de nourriture et de secteurs de la brasserie.

Le CellDrop peut-il être employé avec les échantillons risqués et infectieux ?

Il y a deux voies de traiter les échantillons risqués ou infectieux avec le CellDrop. D'abord, nous l'avons conçu pour nous asseoir dans un module de sécurité biologique. Les chercheurs avec le niveau 2 de sécurité biologique ou le laboratoire du niveau 3 de sécurité biologique peuvent mettre leur CellDrop directement dans le capot où ils ont affaire avec les cellules risquées.

La recherche continue en tant que normale, utilisant un protocole typique de nettoyage sur le CellDrop après que les échantillons de cellules aient été comptés. Par exemple, si le décolorant de 10% est employé pour stériliser le matériel et l'endroit utilisés, ceci peut être pulvérisé sur un essuie-main de papier pour essuyer en bas de l'après utilisation de CellDrop.

Nous tenons compte également de l'usage des guides remplaçables dans le CellDrop afin du matériau infectieux ou risqué. S'il y a un échantillon que pour quelque raison que ce soit un laboratoire réellement ne veut pas toucher le CellDrop directement, une gamme des guides de différents constructeurs peut être employée.

Dans ce cas, le chercheur mettrait le guide sur la surface réutilisable et puis se concentrerait sur les cellules sur le guide, le comptent, et puis le projettent dans les déchets dangereux sans échantillon ayant jamais touché le CellDrop.

Quels logiciel et algorithms/AI viennent avec la riposte de cellules de CellDrop ? Comment vont-ils ces scientifiques d'aide ?

Le logiciel de DeNovix est conçu par des scientifiques de durée pour des scientifiques de durée. Nous travaillons dur pour rendre le logiciel non seulement intuitif pour employer, mais également très puissant. Les chercheurs peuvent rapidement compter et analyser des résultats immédiatement à bord de l'instrument. Les applications de compte et tous les algorithmes inclus sont prémontés sur des ripostes de CellDrop, tellement là ne sont aucun besoin de tablettes complémentaires, d'ordinateurs ou de logiciel basé sur nuage.

Dans chaque application de compte, nous avons inclus un protocole de défaut qui fonctionne bien pour la plupart des lignées cellulaires courantes. Les propriétaires peuvent facilement optimiser des réglages pour différents types de cellules et alors sauvegarder ceux dans les protocoles pour des comptes complémentaires. Des résultats sont enrégistrés à bord pour la recherche facile pour l'analyse ou auditent des buts.

Quelles limitations y a-t-il pour le système de CellDrop ?

Le système a été conçu comme riposte de cellules. Ainsi comme l'instrument optiquement conçu, là en sont des contraintes de définition dues à la physique du système. Nous pouvons sûrement compter des cellules en bas de 4 microns et il n'y a réellement aucune limitation comparée à ce que vous pouvez faire avec un compte manuel ou une riposte robotisée différente de cellules.

Nous l'avons conçu pour fournir le meilleur de la vitesse de mondes-le de l'automatisation mais sans frais supplémentaires et des désagréments des guides remplaçables. Si vous avez besoin de guides remplaçables à utiliser une seule fois pour une raison quelconque, le CellDrop peut faciliter cela, mais il donne également à des chercheurs la souplesse d'employer un système réutilisable pour la majorité de recherche qu'ils font fonctionner.

Que le contrat à terme retient-il pour des ripostes de cellules de DeNovix ?

Nous continuerons à augmenter les applications et la fonctionnalité du CellDrop avec nos mises à jour de logiciel gratuit. Nous travaillons attentivement avec nos propriétaires et avons déjà quelques idées grandes que nous planification pour mettre en application.

Plus grand, DeNovix va continuer à rechercher des places où nous pouvons innover pour sauvegarder des propriétaires' temps et argent et pour réduire des remarques de douleur dans le laboratoire. Nous aimons simplifier l'instrumentation et fournir des scientifiques d'outils voudrait avoir mais ce ne sont pas donné rentable la technologie actuelle ou n'ont pas besoin d'acheter dans un flot consommable neuf.

Où peuvent les lecteurs trouver plus d'informations ?

https://www.denovix.com/celldrop/

Au sujet de Daniel Schieffer

Dan a joint NanoDrop Technologies Inc. en 2006 tout en complétant son SB en biotechnologie à l'Université du Delaware. Après la contribution au développement du NanoDrop 8000 et de NanoDrop Dan 2000 a reçu un assistanat d'enseignement et de recherches à l'université de Villanova.

Chez Villanova il a aidé à développer un système basé sur cytométrie de FRETTE de flux nouveau pour élucider le rôle de l'organisme de membrane cellulaire dans l'activation de cellule T de CD4+.

Dan est alors entré dans un rôle d'assistanat de recherches à l'Université de Pennsylvanie où il a exécuté les écrans génétiques de débit élevé pour découvrir les voies nouvelles de système immunitaire qui règlent la pathogénie dans les virus portés par insecte avant de joindre DeNovix en 2013. Il a une milliseconde en immunologie d'université de Villanova.

Citations

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