Contagem de células sem corrediças para reduzir o desperdício e o custo

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Uma entrevista com Daniel Schieffer, director da tecnologia, DeNovix

Por que as pilhas são contadas actualmente com corrediças? Quantas vezes são as corrediças usadas tipicamente e o que acontece-lhes depois que são usadas?

Até recentemente, as pilhas foram contadas tipicamente em um hemocytometer reusável de quartzo. Com o advento de contadores de pilha automatizados 12-15 anos há, as corrediças descartáveis tornaram-se difundidas. Esta era primeiramente uma maneira para que estes contadores de pilha carreguem e contem corrediças. Quando forem convenientes para sistemas automatizados, introduzem um custo em curso adicional para laboratórios, e o plástico do único-uso igualmente tem uma pegada ambiental significativa.

Shutterstock | Watiporn Yenchum

Cada corrediça é projectada ser usada somente uma vez. Pôde haver duas contagens pela corrediça, mas são todo o único-uso e são rotineiramente depois de uso dispor. Nós ouvimos histórias dos povos que tentam reúso corrediças do único-uso; contudo, para a precisão isto não é recomendado por fabricantes da corrediça. Igualmente adiciona significativamente ao tempo a trabalhar exigido para contar pilhas.

Como o CellDrop elimina corrediças descartáveis? Onde as pilhas são mantidas e como a limpeza completa é conseguida entre corridas?

Para melhorar este sistema DeNovix combinou o melhor do velho e novo, substituindo corrediças plásticas com os dois permanentes, superfícies ópticas da safira da categoria. As superfícies estão paralelas posicionado a uma outra por um parafuso da elevada precisão para formar uma câmara análoga a um hemocytometer tradicional. A tecnologia de núcleo é adaptada de nossa série DS-11 de espectrofotômetros do microvolume e os usuários são imediatamente familiares com a carga, medida e limpam trabalhos limpos.

Os pesquisadores dispensam as pilhas na câmara, contagem da imprensa e a análise é executada automaticamente. Mais tarde, a amostra é limpada simplesmente afastado com uma limpeza seca do laboratório e o CellDrop está pronto para a amostra seguinte. Uma das grandes características do CellDrop é uma grande, tela alta da definição com uma estréia viva da câmara da medida. Isto permite que o usuário confirme imediatamente que as superfícies estão limpas.

Como o desempenho compara aos contadores de pilha corrediça-baseados?

As corrediças corrediça-baseadas do plástico do uso dos contadores que introduzem inconsistências entre contagens. Por exemplo, se um pesquisador tem 10 corrediças plásticas, haverá 10 diferenças ligeiras entre cada um das corrediças. O sistema de CellDrop usa uma superfície contínua da safira que seja consistente ele seja usada cada vez, e as alturas da câmara sejam calibradas automaticamente cada vez que o instrumento é girado sobre.

É corrida muito reprodutível a ser executado. Além, as contagens de pilha em CellDrop são muito rápidas comparadas a outros contadores automatizados, tão lá são uma elevação real do desempenho na experiência do usuário.

Que aplicações o CellDrop trabalha com?

Nossas aplicações principais estão actualmente na viabilidade da pilha, isto é contagens vivas/inoperantes para a cultura celular mamífera, do fermento e do insecto. Há dois modelos da fluorescência e do brightfield disponível-duplos de CellDrop, ou brightfield somente.

Para medidas da viabilidade do brightfield, os cientistas usam uma tintura tal como o azul Trypan para manchar pilhas. O azul Trypan tem suas limitações, assim que para os laboratórios que exigem a maior especificidade e precisão assim como uma escala de aplicações maior, nós recomendamos o uso da fluorescência. O CellDrop pode usar fluorophores comuns tais como a laranja da acridina e o iodeto de Propidium (AO/PI), onde as manchas fluorescentes do AO vivem verde das pilhas e de manchas do PI as pilhas inoperantes vermelhas.

Usar isto toma completamente a adivinhação fora da contagem viva/absolutamente pilhas ou de contar pilhas preliminares nas amostras que são contaminadas potencial. Por exemplo, evita contar os glóbulos vermelhos ou os outros bits e restos que uma contagem Trypan típica do algoritmo ou do manual pôde confundir para uma pilha, que conduzisse a uma contagem impreciso.

Você pode igualmente analisar pilhas tranfected GFP com CellDrop, fornecendo a eficiência da viabilidade e do transfection dos por cento. A plataforma é projectada estar aberta a uma vasta gama de aplicações através da biologia celular mas também das indústrias ambientais, do alimento e de fabricação de cerveja.

Pode o CellDrop ser usado com as amostras perigosas e infecciosas?

Há duas maneiras de segurar amostras perigosas ou infecciosas com o CellDrop. Primeiramente, nós projetamo-lo sentar-se em um gabinete da seguridade biológica. Os pesquisadores com nível 2 da seguridade biológica ou laboratório do nível 3 da seguridade biológica podem pôr seu CellDrop directamente na capa onde estão tratando as pilhas perigosas.

A pesquisa continua como o normal, usando um protocolo típico da limpeza no CellDrop depois que as amostras da pilha foram contadas. Por exemplo, se o descorante de 10% é usado para esterilizar o equipamento e a área usados, isto pode ser pulverizado em uma toalha de papel para limpar abaixo do depois de uso de CellDrop.

Nós igualmente permitimos o uso de corrediças descartáveis dentro do CellDrop com a finalidade do material infeccioso ou perigoso. Se há uma amostra que seja qual for a razão um laboratório realmente não quer tocar directamente no CellDrop, uma escala das corrediças dos fabricantes diferentes pode ser usada.

Neste caso, o pesquisador poria a corrediça sobre a superfície reusável e centrar-se-ia então sobre as pilhas na corrediça, conta-a, e joga-a então nos resíduos perigosos sem a amostra nunca que toca no CellDrop.

Que software e algorithms/AI vêm com o contador de pilha de CellDrop? Como fazem estes cientistas da ajuda?

O software de DeNovix é projectado por cientistas de vida para cientistas de vida. Nós trabalhamos duramente para fazer o software não somente intuitivo para usar-se, mas também muito poderoso. Os pesquisadores podem rapidamente contar e analisar resultados imediatamente a bordo do instrumento. As aplicações de contagem e todos os algoritmos encaixados não são instalados em contadores de CellDrop, tão lá são nenhuma necessidade para tabuletas adicionais, computadores ou o software nuvem-baseado.

Dentro de cada aplicação de contagem, nós incluímos um protocolo da opção que trabalhasse bem para a maioria de linha celular comuns. Os clientes podem facilmente aperfeiçoar ajustes para tipos diferentes da pilha e então salvar aqueles nos protocolos para contagens adicionais. Os resultados são a bordo salvar para a recuperação fácil para finalidades da re-análise ou do exame oficial dos livros contábeis.

Que limitações há para o sistema de CellDrop?

O sistema foi projectado como um contador de pilha. Assim como todo o instrumento óptica projetado, há umas limitações da definição devido à física do sistema. Nós podemos confiantemente contar pilhas abaixo de 4 mícrons e não há realmente nenhuma limitação comparada ao que você pode fazer com uma contagem manual ou um contador de pilha automatizado diferente.

Nós projetamo-la fornecer o melhor da velocidade dos mundos- da automatização mas sem o custo adicional e da inconveniência de corrediças descartáveis. Se você precisa corrediças descartáveis do único-uso por qualquer razão o CellDrop pode acomodar aquele, mas igualmente dá a pesquisadores a flexibilidade usar um sistema reusável para a maioria da pesquisa que executam.

Que o futuro guardara para contadores de pilha de DeNovix?

Nós continuaremos a expandir as aplicações e a funcionalidade do CellDrop com nossas actualizações de software livre. Nós trabalhamos pròxima com nossos clientes e já temos algumas grandes ideias que nós estamos planeando executar.

Mais amplamente, DeNovix está indo continuar a procurar os lugares onde nós podemos inovar para salvar clientes' tempo e dinheiro e para reduzir pontos da dor no laboratório. Nós gostamos de simplificar a instrumentação e para fornecer cientistas das ferramentas gostaria de ter mas aquele não é eficaz na redução de custos dado a tecnologia actual nem não precisa de comprar em um córrego consumível novo.

Onde podem os leitores encontrar mais informação?

https://www.denovix.com/celldrop/

Sobre Daniel Schieffer

Dan juntou-se a NanoDrop Technologies Inc. em 2006 ao terminar suas BS na biotecnologia na universidade de Delaware. Após a contribuição à revelação do NanoDrop 8000 e de NanoDrop Dan 2000 aceitou um assistantship do ensino e da pesquisa na universidade de Villanova.

Em Villanova ajudou a desenvolver um fluxo novo cytometry-baseado sistema da FRICÇÃO para explicar o papel da organização da membrana de pilha na activação do t Cell de CD4+.

Dan moveu-se então em um papel do assistantship da pesquisa na Universidade da Pensilvânia onde executou telas genéticas da produção alta para descobrir os caminhos novos do sistema imunitário que regulam a patogénese em vírus carregados insecto antes de se juntar DeNovix em 2013. Tem um MS na imunologia da universidade de Villanova.

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    DeNovix Inc.. (2020, February 01). Contagem de células sem corrediças para reduzir o desperdício e o custo. News-Medical. Retrieved on February 25, 2020 from https://www.news-medical.net/news/20190725/Cell-Counting-Without-Slides-to-Reduce-Waste-and-Cost.aspx.

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