Numeración celular sin las diapositivas para reducir el desecho y el costo

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Una entrevista con Daniel Schieffer, director de la tecnología, DeNovix

¿Por qué las células se cuentan actualmente con las diapositivas? ¿Cuántas veces son las diapositivas usadas típicamente y qué les suceso después de que se utilicen?

Hasta hace poco tiempo, las células fueron contadas típicamente en un hemocitómetro reutilizable del cuarzo. Con la llegada de contratirantes de célula automatizados hace 12-15 años, las diapositivas disponibles llegaron a ser dispersas. Esto era sobre todo una manera para que estos contratirantes de célula carguen y cuenten diapositivas. Mientras que son convenientes para los sistemas automatizados, introducen un costo en curso adicional para los laboratorios, y el plástico no reutilizable también tiene una huella ambiental importante.

Shutterstock | Watiporn Yenchum

Cada diapositiva se diseña para ser utilizada solamente una vez. Pudo haber dos cuentas por diapositiva, pero son todos no reutilizables y son rutinario uso posterior dispuesto. Hemos oído historias de la gente que intentaba reutilizar diapositivas no reutilizables; sin embargo, por exactitud esto no es recomendada por los fabricantes de la diapositiva. También agrega importante al tiempo con manos requerido para contar las células.

¿Cómo el CellDrop elimina diapositivas disponibles? ¿Dónde se guardan las células y cómo la limpieza completa se logra entre las corridas?

Para perfeccionar este sistema DeNovix combinó el mejor el del viejo y nuevo, reemplazando diapositivas plásticas por dos permanentes, las superficies ópticas del zafiro de la pendiente. Las superficies son paralelas colocado a otra al lado de un tornillo de la alta precisión para formar una cámara análoga a un hemocitómetro tradicional. La tecnología de base se adapta de nuestra serie DS-11 de espectrofotómetros del microvolume y los utilizadores son inmediatamente familiares con la carga, dimensión y limpian flujo de trabajo limpio.

Los investigadores dispensan las células en la cámara, cuenta de la prensa y el análisis se realiza automáticamente. Luego, la muestra se limpia simple de distancia con un trapo seco del laboratorio y el CellDrop está listo para la muestra siguiente. Una de las granes características del CellDrop es una pantalla grande, alta de la definición con un avance vivo de la cámara de la medición. Esto permite que el utilizador confirme inmediatamente que las superficies sean limpias.

¿Cómo el funcionamiento compara a los contratirantes de célula diapositiva-basados?

Las diapositivas diapositiva-basadas del plástico del uso de los contratirantes que introducen inconsistencias entre las cuentas. Por ejemplo, si un investigador tiene 10 diapositivas plásticas, habrá 10 diferencias ligeras entre cada uno de las diapositivas. El sistema de CellDrop utiliza una superficie sólida del zafiro que sea constante él se utilice cada vez, y las alturas de la cámara se calibran automáticamente cada vez que se gira el instrumento.

Es corrida muy reproductiva a ejecutarse. Además, los recuentos celulares en CellDrop son muy rápidos comparados a otros contratirantes automatizados, tan allí son una mejora real del funcionamiento en la experiencia del utilizador.

¿Con qué usos el CellDrop trabaja?

Nuestros usos principales están actualmente en la viabilidad de la célula, es decir cuentas vivas/muertas para el cultivo celular mamífero, de la levadura y del insecto. Hay dos modelos de la fluorescencia y del brightfield disponible-dobles de CellDrop, o brightfield solamente.

Para las mediciones de la viabilidad del brightfield, los científicos utilizan un tinte tal como azul Trypan para manchar las células. El azul Trypan tiene sus limitaciones, así que para los laboratorios que requieren mayor especificidad y exactitud así como un mayor alcance de usos, recomendamos el uso de la fluorescencia. El CellDrop puede utilizar fluorophores comunes tales como naranja y yoduro de Propidium (AO/PI) de la acridina, donde viven las manchas de óxido fluorescentes del AO verde de las células y las células muertas de las manchas de óxido del pi rojas.

Usando esto saca totalmente la conjetura de contar vivo/absolutamente las células o de contar las células primarias en las muestras que potencialmente se contaminan. Por ejemplo, evita contar a los glóbulos rojos u otras brocas y escombros que el contar Trypan típico del algoritmo o del manual pudo confundir para una célula, que lleva a una cuenta inexacta.

Usted puede también analizar las células tranfected GFP con CellDrop, ofreciendo la eficiencia de la viabilidad y de la transfección del por ciento. La plataforma se diseña para estar abierta a una amplia gama de usos a través de la biología celular pero también ambiental, de la comida y de los sectores cerveceros.

¿Se puede el CellDrop utilizar con las muestras peligrosas e infecciosas?

Hay dos maneras de manejar muestras peligrosas o infecciosas con el CellDrop. Primero, lo diseñamos para sentarnos en una cabina de la seguridad biológica. Los investigadores con el nivel 2 de la seguridad biológica o el laboratorio del nivel 3 de la seguridad biológica pueden poner su CellDrop directamente en el capo motor donde se están ocupando de las células peligrosas.

La investigación continúa como normal, usando un protocolo típico de la limpieza en el CellDrop después de que se hayan contado las muestras de la célula. Por ejemplo, si el blanqueo del 10% se utiliza para esterilizar el equipo y el área usados, esto se puede pintar (con vaporizador) en una toalla de papel para limpiar abajo del uso posterior de CellDrop.

También tenemos en cuenta el uso de diapositivas disponibles dentro del CellDrop con el fin del material infeccioso o peligroso. Si hay una muestra que por la razón que sea un laboratorio no quiere realmente tocar el CellDrop directamente, un alcance de diapositivas de diversos fabricantes puede ser utilizado.

En este caso, el investigador pondría la diapositiva encima de la superficie reutilizable y después se centraría en las células en la diapositiva, la cuenta, y después la lanza en los desechos peligrosos sin la muestra que toca nunca el CellDrop.

¿Qué software y algorithms/AI vienen con el contratirante de célula de CellDrop? ¿Cómo hacen estos científicos de la ayuda?

El software de DeNovix es diseñado por los científicos de vida para los científicos de vida. Trabajamos difícilmente para hacer el software no sólo intuitivo para utilizar, pero también muy potente. Los investigadores pueden contar y analizar rápidamente resultados inmediatamente a bordo el instrumento. Los usos que cuentan y todos los algoritmos embutidos se instalan previamente en los contratirantes de CellDrop, tan allí no son ninguna necesidad de tablillas adicionales, de computadores o del software nube-basado.

Dentro de cada uso que contaba, hemos incluido un protocolo de la omisión que trabaja bien para la mayoría de las variedades de células comunes. Los clientes pueden optimizar fácilmente las fijaciones para diversos tipos de la célula y después salvar ésos en los protocolos para las cuentas adicionales. Los resultados están a bordo salvado para la extracción fácil para los propósitos del nuevo análisis o de la intervención.

¿Qué limitaciones hay para el sistema de CellDrop?

El sistema fue dirigido como contratirante de célula. Tan como cualquier instrumento ópticamente diseñado, hay apremios de la resolución debido a la física del sistema. Podemos contar seguro las células abajo de 4 micrones y no hay realmente limitaciones comparadas a lo que usted puede hacer con una cuenta manual o un diverso contratirante de célula automatizado.

La hemos diseñado para ofrecer el mejor de la velocidad de los mundos- de la automatización pero sin el costo adicional y de la inconveniencia de diapositivas disponibles. Si usted necesita diapositivas disponibles no reutilizables por cualquier motivo el CellDrop puede acomodar eso, pero también da a investigadores la adaptabilidad de utilizar un sistema reutilizable para la mayoría de investigación que se ejecutan.

¿Qué el futuro espera para los contratirantes de célula de DeNovix?

Continuaremos desplegar los usos y las funciones del CellDrop con nuestras actualizaciones de software libres. Trabajamos de cerca con nuestros clientes y tenemos ya algunas grandes ideas que estamos proyectando ejecutar.

Más ampliamente, DeNovix va a continuar buscar los lugares en donde podemos innovar para salvar a los clientes' tiempo y dinero y para reducir puntos del dolor en el laboratorio. Tenemos gusto de simplificar la instrumentación y ofrecer a científicos de las herramientas quisiera tener pero ése no es de poco costo dado la tecnología actual ni necesita comprar en una nueva corriente fungible.

¿Dónde pueden los programas de lectura encontrar más información?

https://www.denovix.com/celldrop/

Sobre Daniel Schieffer

Dan ensambló NanoDrop Technologies Inc. en 2006 mientras que terminaba a sus BS en biotecnología en la universidad de Delaware. Después de contribuir al revelado del NanoDrop 8000 y de NanoDrop Dan 2000 validó una ayudantía de la enseñanza y de la investigación en la universidad de Villanova.

En Villanova él ayudó a desarrollar un flujo nuevo cytometry-basado sistema del TRASTE para aclarar el papel de la organización de la membrana celular en la activación del linfocito T de CD4+.

Dan entonces se trasladó a un papel de la ayudantía de la investigación en la Universidad de Pensilvania en donde él realizó las pantallas genéticas de la alta producción para descubrir los caminos nuevos del sistema inmune que regulan la patogenesia en virus soportados insecto antes de ensamblar DeNovix en 2013. Él tiene un ms en inmunología de la universidad de Villanova.

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