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La nueva prueba puede perfeccionar la capacidad de diagnosticar las formas más aventuradas de la infección de HPV

El noventa y nueve por ciento de cánceres de cuello del útero es causado por el papillomavirus humano (HPV). Más de 200 HPVs, algunos de los cuales se asocian a diversos grados de riesgo de cáncer, complican diagnosis y el tratamiento. Un parte en el gorrón de diagnósticos moleculares, publicado por Elsevier, describe un nuevo “dos-para-uno” la aproximación diagnóstica que no sólo descubre el tipo de infección de HPV, pero también indica marcadores precancerosos. Esta prueba puede perfeccionar la capacidad de diagnosticar las formas más aventuradas de la infección de HPV, de ofrecer resultados rápidos a bajo costo, y de ayudar a evitar procedimientos diagnósticos innecesarios.

Hemos desarrollado HPV ARN-Seq, un procedimiento de diagnósticos molecular in vitro nuevo para la detección de la infección de alto riesgo de HPV y la identificación de pacientes con las lesiones intraepiteliales squamous de alto grado (HSIL), que es un escenario precanceroso de la cerviz. HPV ARN-Seq es una prueba única que combina las ventajas de los análisis moleculares (HPV que pulsa) y de la citología cervical (la célula phenotyping).”

Principal investigador Marc Eloit, DVM, doctorado, laboratorio del descubrimiento el patógeno, biología de la unidad de la infección, Institut Pasteur, París, y escuela veterinaria nacional de Alfort, París-Est universidad, Maisons-Alfort, Francia

La investigación de cáncer de cuello del útero permite la detección y el tratamiento de lesiones precancerosas antes de que el cáncer se convierta. Actualmente, el blindaje se centra en la prueba para HPV o determinar las células cervicales anormales con citología. Sin embargo, las pruebas diagnósticas moleculares que descubren la DNA o el ARN de virus son pobres en determinar el cáncer o lesiones precancerosas. El análisis de células cervicales con el examen de frotis, incluso cuando está combinado con la detección molecular de HPV de alto riesgo, da lugar a un número importante de colposcopies innecesarios, una prueba invasor por la cual el médico verifique visualmente para saber si hay lesiones cervicales.

En este estudio del prueba-de-concepto, HPV ARN-Seq fue utilizado para analizar muestras a partir de 55 pacientes, 28 con las lesiones intraepiteliales squamous de calidad inferior (LSIL) y 27 pacientes con HSIL precanceroso.

HPV ARN-Seq podía descubrir y determinar el tipo de infección de HPV entre un panel de 16 HPVs de alto riesgo con los resultados comparables a un estuche diagnóstico molecular ampliamente utilizado y oficialmente aprobado de la DNA de HPV. De hecho, ARN-Seq de HPV descubierta dos pacientes HPV-más positivos que la prueba de la DNA y también determinada más pacientes con infecciones múltiples de HPV.

La prueba fue encontrada para tener una sensibilidad (capacidad de descubrir la presencia de un HPV) del 97,3 por ciento y del valor profético negativo (NPV, probabilidad del no tener HPV) del 93,8 por ciento. La “investigación de cáncer de cuello del útero efectiva requiere alta sensibilidad y NPV para la infección de alto riesgo de HPV, puesto que prueban a las mujeres con una prueba negativa de HPV generalmente otra vez sólo después de varios años,” profesor conocido Eloit.

La citología se utiliza como método rápido a los pacientes de la clasificación con HPV mientras que la histología se considera el patrón oro para la diagnosis del cáncer de cuello del útero. El análisis histológico, sin embargo, es más invasor y requiere más hora de rendir resultados. Para determinar si la nueva prueba tiene un lugar en clasificación del cáncer de cuello del útero, los investigadores también compararon la citología a HPV ARN-Seq y encontraron marcadores de la citología de alto grado, con animar funcionamientos diagnósticos de HPV-ARN-Seq como prueba de la clasificación. También encontraron que el valor profético positivo (PPV, probabilidad del tener infección de HPV) de HPV ARN-Seq comparado con la histología era siempre mayor que el PPV de la citología comparado con la histología. “Esta observación constituye un argumento sólido a favor de un potencial agregó el valor médico de ARN-Seq de HPV comparada con citología,” profesor comentado Eloit.

Profesor Eloit sugiere que el uso de HPV ARN-Seq en ciertos pacientes pueda ayudar a eliminar colposcopies innecesarios. Él también preve una época cuando la tecnología permitirá que muchas muestras sean funcionadas con simultáneamente, bajando el costo quizás a $10 a $20 por prueba. La prueba puede también ser aplicable para otros cánceres HPV-asociados tales como cáncer y cáncer de cabeza y cuello anales.

HPV ARN-Seq se basa en la combinación doble de la polimerización en cadena reversa multiplexada de la transcripción (RT-PCR) y de la secuencia de la siguiente-generación (NGS). RT-PCR es una manera sensible de medir pequeñas cantidades de ARN, el material genético que refleja la actividad de los genes de HPV, y NGS permite caracterizar fino la diversidad de las series virales amplificadas. Esto habilita la detección de hasta 16 de alto riesgo o de HPV de alto riesgo supuesto en una muestra así como de la presencia de marcadores precancerosos.

“Nuestra aproximación sigue la tendencia actual de desarrollar los paneles del amplicon de NGS para los diagnósticos moleculares, mientras que el seguir siendo adaptable a los análisis moleculares tradicionales formata. Esta adaptabilidad puede hacer HPV ARN-Seq una solución conveniente, robusta, y asequible para muchos laboratorios,” autor importante adicional Felipe Pérot, doctorado, laboratorio del descubrimiento el patógeno, biología de la unidad de la infección, Institut Pasteur, París, Francia.

Source:
Journal reference:

Pérot, P. et al. (2019) Broad-Range Papillomavirus Transcriptome as a Biomarker of Papillomavirus-Associated Cervical High-Grade Cytology. Journal of Molecular Diagnostics. doi.org/10.1016/j.jmoldx.2019.04.010.