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Utilisant la chromatographie d'échange anionique et le dépistage électrochimique pour la détermination des hydrates de carbone

Les hydrates de carbone sont parmi les composés organiques les plus répandus dans la nature vivante. Comme monosaccharides et disaccharides, ils servent principalement l'alimentation en énergie directe dans l'organisme. Sous forme d'oligomères ou de polymères, ils sont employés plus pour le stockage de l'énergie ou de l'information, ou assurez les tâches comme élément structurel dans des parois cellulaires, principalement des centrales. À cause de leur importance grande dans le domaine d'écologique, la recherche biologique, clinique et nutritionnelle, la détermination des sucres et d'autres hydrates de carbone est d'intérêt grand. Il y a un certain nombre de différentes méthodes de détermination qui sont souvent coûteuses en termes de matériel, tel que HPLC-MS ou compliqué pour effectuer comme la CHROMATOGRAPHIE GAZEUSE avec la dérivatisation.

Utilisant la chromatographie d

Pourquoi n'est-elle pas la CLHP normale suffisamment pour l'analyse sensible de sucre ?

La séparation des sucres n'est pas le défi important. Elle travaille très bien sur un système de CLHP utilisant la chromatographie performante d'échange anionique (HPAEC), parce que les légères différences en valeurs de pKa des groupes d'hydroxyle d'hydrate de carbone des saccharides entraînent des différences dans l'assemblage sur une résine d'échange anionique avec les éluants fortement alcaline.

Le défi est dépistage. L'UV ou le dépistage de fluorescence, qui est très utilisé en chromatographie liquide, généralement ne peut pas être employé pour des sucres à cause d'un manque de chromophores. Le dépistage d'indice de réfraction est très facile à utiliser, mais pas très sensible et ne peut pas être employé ainsi pour la détermination des concentrations à faible teneur en sucre. Avec une opération de dérivatisation qui forme un chromophore, les méthodes spectroscopiques peuvent en effet être employées pour l'analyse de sucre, mais ceci exige l'équipement supplémentaire, les produits chimiques et les opérations de travail.

Une approche alternative se sert du fait que les hydrates de carbone peuvent réagir électrochimique. Comme résultat, ils peuvent être trouvés très avec sensibilité et sélecteur par ampérométrie.

L'ampérométrie est l'une des méthodes de dépistage les plus sensibles dans l'analyse quantitative. Dans ce cas, un courant d'électrolyse est mesuré à une électrode fonctionnante sous un potentiel électrochimique continuel. Le courant d'électrolyse est proportionnel à la concentration d'analyte oxydée/réduite. L'ampérométrie classique est un procédé discontinu : mesure/titration, vidant le réacteur, le nettoyage, mesure régénératrice et prochaine… et pour cette raison non applicable avec la CLHP.

Le dépistage ampèremétrique pulsé (PAD) est employé dans le système de chromatographie d'analyse de sucre de KNAUER, une variante qui active la mesure rapide dans une petite cellule, y compris la régénération de l'électrode, qui est exigée dans le dépistage de sucre. Un cycle de la mesure, de la désorption et de la régénération de l'électrode prend seulement la moitié par seconde et est continuellement répété pendant l'analyse. Ainsi, comme avec d'autres détecteurs de flux, un chromatogramme peut être enregistré. Le procédé n'exige pas les produits chimiques complémentaires excepté l'éluant fondamental aqueux nouvellement préparé.

Exemple d'application : L'analyse sensible des monosaccharides et des acides uroniques a dérivé du bois.

Dans la recherche pour les matières premières et les essences renouvelables, qui ne devraient pas concurrencer la production alimentaire, les sucres du bois et le jeu de rebut de centrale un rôle majeur. Afin de surveiller les procédés ou déterminer la qualité des produits, une analyse sensible et fiable est nécessaire.

Dans l'exemple actuel, un mélange de sept monosaccharides et deux acides uroniques ligne zéro-est séparé utilisant la chromatographie performante d'échange anionique (HPAEC) avec le dépistage ampèremétrique pulsé (PAD) et déterminé avec un rapport signal/bruit très élevé (S/N).

La méthode facile à utiliser avec différentes concentrations en NaOH convient pour l'analyse simple et reproductible même aux concentrations inférieures en analyte. En plus de la recherche sur des combustibles organiques, les sucres étudiés sont également une partie de nombreux procédés dans des applications naturelles et de nourriture. Ainsi, cette application convient pour différents endroits dans lesquels des hydrates de carbone doivent être particulièrement séparés et s'analysés.

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