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I ricercatori brasiliani identificano le nuove specie di parassita nel caso interno della leishmaniosi viscerale

I ricercatori brasiliani ritengono che abbiano identificato in pazienti curati all'ospedale universitario (HU) in Aracaju, stato di Sergipe, nuove specie di parassita che possono causare una malattia simile alla leishmaniosi viscerale ma siano resistenti ai trattamenti attualmente disponibili. Almeno una persona è morto dalle complicazioni connesse con l'infezione dal parassita.

Risultati della ricerca, di supporto dalle fondamenta di ricerca di São Paulo - FAPESP, sono stati pubblicati il 30 settembreth nelle malattie infettive emergenti del giornale. L'analisi di Phylogenomic ha indicato che il parassita recentemente scoperto non appartiene al genere Leishmania, che comprende oltre 20 specie che causano i tipi differenti di leishmaniosi: viscerale, cutaneo e diffuso - l'ultimo comprende l'interfaccia e le lesioni mucose.

“Dal punto di vista filogenetico, le specie analizzate in questo studio proviene più vicino al fasciculata di Crithidia, un parassita della zanzara che non può infettare gli esseri umani o altri mammiferi. Siamo riuscito ad infettare i mouse con e per questo motivo crediamo che sia un nuovo protozoo, che proponiamo di chiamare sergipensis di Cridia,„ abbia detto il Silva di João Santana da, un professore all'università di facoltà di medicina del Ribeirão Preto di São Paulo (FMRP-USP) e di membro del centro per la ricerca sulle malattie infiammatorie (CRID), uno dei centri della ricerca, dell'innovazione e di diffusione (RIDCs) costituiti un fondo per da FAPESP.

Il primo argomento è stato confermato in un uomo di 64 anni, in primo luogo curato nel 2011 per i sintomi classici della leishmaniosi viscerale: febbre, milza e fegato ingrandetto e produzione in diminuzione di tutti i tipi di globuli (pancitopenia).

È stato dato il trattamento standard ed è stato migliorato, ma è stato sofferto una ricaduta soltanto quattro mesi più successivamente. Poi è stato curato con la migliore droga disponibile per questi casi - anfotericina liposomica B - ed è stato risposto, ma è stato sofferto un altro ricaduta otto mesi più successivamente. Questa volta ha sviluppato l'eruzione papular da ogni parte del suo organismo, che non è usuale nella leishmaniosi viscerale.„

Roque Pacheco Almeida, professore all'università federale di Sergipe (UFS), testa del laboratorio di biologia molecolare dell'ospedale universitario e ricercatore affiliato con CRID

“Purtroppo il paziente è morto dopo le ricadute, la diffusione della malattia alla sua interfaccia e un'operazione eliminare la sua milza, come consigliato nei casi severi che non reagiscono al trattamento.„

Una biopsia delle lesioni cutanee ha trovato le celle della difesa piene dei parassiti, che sono stati isolati e cryopreserved per l'analisi. I ricercatori egualmente hanno isolato i campioni del midollo osseo durante le ricadute ed i campioni della milza dopo la sua rimozione chirurgica.

Inizialmente il gruppo ha pensato che il paziente fosse stato infettato in maniera atipica dal infantum di Leishmania. Tuttavia, le prove molecolari disponibili per la diagnosi di questo agente patogeno erano tutta inconcludenti nelle analisi eseguite sui parassiti isolati dal midollo osseo e dalle lesioni cutanee.

I mouse infettati con il campione isolato dall'interfaccia del paziente hanno sviluppato le lesioni cutanee ed il danno di fegato delicato. Sorprendente, l'infezione sperimentale con il nuovo parassita era più aggressiva nell'interfaccia che negli animali usati come comandi positivi (infettati con maggiore di Leishmania, le specie che causa la leishmaniosi cutanea). Gli animali infettati con il parassita del midollo osseo non non video i sintomi tipici della leishmaniosi viscerale, quali fegato e la milza infettati, ma alterazioni dell'interfaccia.

“Abbiamo realizzato che il paziente potrebbe essere infettato con due parassiti differenti - quindi la severità del suo stato,„ Almeida ha detto.

Intero genoma

I ricercatori hanno deciso di eseguire un'analisi del intero-genoma dei parassiti isolati dal paziente per scoprire esattamente di che cosa stavano occupando.

“Egualmente abbiamo avuti campioni di altre specie di Leishmania abbiamo ordinato. Hanno compreso i amazonenses del L., braziliensis del L. e il infantum del L., che abbiamo avuti nel nostro laboratorio,„ Silva ha detto. Lo scopo era di vedere se ci fossero delle similarità.

L'analisi di bioinformatica che ha rivelato la similarità filogenetica fra le nuove specie e il fasciculata del C. è stata condotta negli Stati Uniti da José Marcos Ribeiro all'istituto nazionale dell'allergia & delle malattie infettive (NIAID) e della Costa Maruyama, un ricercatore di Sandra Regina nel dipartimento della genetica e nell'evoluzione all'università federale di São Carlos (UFSCar) con supporto dal giovane programma di concessioni del ricercatore (YIG) di FAPESP.

“Abbiamo confrontato i genoma dei parassiti isolati dal midollo osseo dell'interfaccia e del paziente ed abbiamo concluso che erano le stesse specie e che questo le specie possono infettare entrambi gli organi interni e interfaccia,„ Maruyama abbiamo detto. “Egualmente abbiamo eseguito un'analisi del intero-genoma dei parassiti isolati altri da due pazienti in Aracaju che non stavano reagendo al trattamento, confermante che anche hanno appartenuto alle nuove specie. Altri 150 isolati stanno attendendo l'ordinamento e l'analisi del intero-genoma.„

Secondo Maruyama, i risultati preliminari - ottenuti da un'analisi dei frammenti del genoma identificato come tasto alla caratterizzazione delle specie - indicano che la maggior parte dei protozoi presenti nei 150 isolati abbinano il profilo del sergipensis di Cridia.

“Abbiamo utilizzato gli strumenti di bioinformatica per identificare le regioni del genoma che sono specifiche al questo specie e per convalidarli sperimentalmente. Sulla base di questi risultati potevamo sviluppare una prova molecolare per diagnosticare il nuovo parassita. Parallelamente anche abbiamo dovuto sviluppare una prova molecolare specifica per il infantum di Leishmania. Ora possiamo identificare il parassita che ha infettato i pazienti ed anche individuare tutte le co-infezioni,„ Maruyama abbiamo detto Agência FAPESP.

Il punto seguente, ha aggiunto, deve rendere la metodologia ancor più sensibile in moda da potere eseguire la prova molecolare direttamente con i campioni di sangue dai pazienti con la leishmaniosi sospettata.

Domande senza risposta

Le priorità della ricerca celebri dagli autori dell'articolo comprendono una ricerca delle droghe che possono uccidere efficientemente il nuovo parassita. Secondo Almeida, le prove dei composti vari sono già in corso.

Un'altra sfida sta scoprendo come l'agente patogeno è emerso e come è trasmessa agli esseri umani. “Potrebbe essere il risultato dell'incrocio fra Leishmania e un altro genere, o di una mutazione genetica che ha dato a Crithidia la capacità di infettare i mammiferi. O può esistere sempre nel selvaggio e venire più vicino agli esseri umani mentre hanno occupato il suo spazio,„ Almeida ha detto.

Per Maruyama, una massima priorità sta scoprendo se il sergipensis di Cridia da solo è capace della malattia severa e potenzialmente interna causare o se i casi osservati sono derivato dalla doppia infezione. “Potrebbe essere che il nuovo parassita sta contribuendo ad esacerbare i casi tipici della leishmaniosi viscerale,„ lei ha detto.

Secondo Almeida, questo spiegherebbe perché la tariffa viscerale di mortalità della leishmaniosi nello stato di Sergipe era nel 2016 15%, rispetto ad una tariffa preveduta di soltanto 6%. I casi sospettati sono stati trattati dai gruppi di medici nel Infectology e nei dipartimenti di pediatria dell'ospedale universitario di Sergipe, collegati a Empresa Brasileira de Serviços Hospitalares (EBSERH), un'azienda di gestione di stato dell'ospedale.