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El esquema de la purificación permite la colección de células madres evasivas de la sangre de zebrafish

Las células madres hematopoyéticas (HSCs) son las células multipotent que pueden convertirse en cada tipo de glóbulo en la carrocería. Pueden también ser utilizadas en la investigación médica para entender y para tratar enfermedades sangre-basadas. Zebrafish (rerio del Danio) se utiliza para estudiar HSCs, determinado en el campo de la biología de desarrollo, pero la investigación en el animal adulto es a menudo limitado porque las células madres son difíciles de purificar en esta especie. Los investigadores en la universidad de Kanazawa y sus colaboradores ahora describen un esquema de la purificación que permita que a éstos los zebrafish evasivos HSCs cerco.

Zebrafish es un gran sistema para estudiar cómo las células hematopoyéticas funcionan en el revelado normal y su papel en enfermedad. Mucha de su biología refleja lo que vemos en seres humanos, y con zebrafish hay la ventaja adicional del tener muy algunas herramientas experimentales en nuestras yemas del dedo, incluyendo proyección de imagen viva de la célula y análisis comparativo entre vertebrados. Lamentablemente, ha probado desafiar para aislar efectivo HSCs de esta especie, y esto ha sido un impedimento importante al campo.”

Isao Kobayashi, investigador del guía

HSCs es altamente abundante en los riñones de los zebrafish adultos (desemejantes en los seres humanos, donde HSCs se encuentra en médula). El reto los está separando de otras células encontradas en riñones. La separación de la célula implica generalmente una técnica de la purificación llamada el cytometry de flujo, donde las células se envían en único archivo con un tubo y un golpe con un de rayo láser. La máquina (un cytometer del flujo) entonces clasificación las células basadas en cómo reflejan o dispersan la luz.

En el estudio, publicado en partes científicos, los investigadores crearon una deformación del zebrafish que hace dos proteínas luminescentes, una verde (la proteína fluorescente verde, GFP) y un rojo (mCherry), que se pueden detectar y clasificación por un cytometer del flujo. Cada proteína fluorescente en esta deformación de los zebrafish fue regulada por los genes relacionados con los glóbulos, pero las células que tenían ambas proteínas fluorescentes fueron limitadas en HSCs. Por la codificación policromática las células con dos marcadores distintos del glóbulo, las personas podían purificar las células que muestran los signos “stemness” del sello - como la uno mismo-propagación de la capacidad y distinguen en otros tipos de glóbulos.

¿Así pues, qué pudo el aislamiento acertado de HSCs en zebrafish significar para el campo de la investigación de la célula madre?

“Cuando HSCs finalmente fue purificado en ratones, la comunidad de investigación aprendió una cantidad enorme sobre cómo y donde las células madres uno mismo-renuevan y distinguen para formar a los glóbulos,” dice al co-autor Mao Kondo. “Estamos muy esperanzados que esto pudo estimular una proliferación similar de la investigación en zebrafish. Además de algunas ventajas experimentales en zebrafish, encontramos que la parte de HSCs de los zebrafish muchos enchavieta genes en común con HSCs en mamíferos. Esto sugiere que los descubrimientos mecánicos en zebrafish podrían tener implicaciones directas para las enfermedades de sangre de comprensión en seres humanos y para desarrollar nuevos tratamientos médicos.”

Source:
Journal reference:

Kobayashi, I., et al. (2019) Enrichment of hematopoietic stem/progenitor cells in the zebrafish kidney. Scientific Reports. doi.org/10.1038/s41598-019-50672-5.