les aides de méthode d'Unique-particule déterminent la remarque isoélectrique des virus

Il n'est pas facile caractériser des virus. Mais nous avons besoin parce que pouvant prévoir rapidement la charge extérieure des virus ouvrez les possibilités neuves pour la purification vaccinique et effectuer des demandes de règlement de thérapie génique pour des maladies oculaires et la dystrophie musculaire.

Caryn Heldt, directeur de l'institut de recherches de santé à l'université technique du Michigan, étudie la chimie extérieure de virus avec le financement par le programme tôt de développement de la vie professionnelle de la faculté du National Science Foundation (CARRIÈRE).

Son papier en retard, publié dans Langmuir, orientations sur employer la charge extérieure pour déterminer une remarque isoélectrique des virus, une voie courante de caractériser des virus.

L'innovation est celle au lieu de la caractérisation en vrac, il la fait suivre une méthode d'unique-particule.

Ainsi nous avons ces méthodes en vrac où nous mettons un virus en solution et nous caractérisons la solution. Mais si votre virus n'est pas complet épuré -- il est également difficile faire ce qui -- alors votre caractérisation de vos moyens en vrac de solution vous caractérisez tout dans cette solution. »

Caryn Heldt, directeur, institut de recherches de santé, université technique du Michigan

Heldt est également la présidence du caoutchouc de James et de Lorna en bio-ingénierie et un professeur agrégé du génie chimique.

Pour améliorer l'exactitude de cette caractérisation, Heldt propose une méthode d'unique-particule qui emploie la microscopie atomique de force (AFM). L'adhérence entre la sonde d'AFM et les surfaces collantes de virus peut être mesurée -- elle a la microscopie chimique appelée de force (CFM).

Les « virus sont ces molécules compliquées qui ont beaucoup de différentes chimies sur elles, » Heldt ont dit, ajoutant que comme grande, complexe molécule des extensions d'un virus sa remarque isoélectrique quand toutes ses charges négatives et positives équilibrent à l'extérieur.

« À un pH particulier, le virus a une charge neutre. Ainsi si nous voulons que le virus a une charge positive, nous avons mis le pH en dessous de la remarque isoélectrique et vice versa. »

Cela signifie que l'équipe de Heldt pourrait rendre la sonde d'AFM positive ou négative, puis balaye une solution en travers de différents pHs pour déterminer une remarque isoélectrique des virus.

Pour vérifier que la méthode a fonctionné, l'équipe avait l'habitude deux virus : parovirus porcin non-enveloppé (PPV), qui a une remarque isoélectrique bien documentée, et virus viral bovin enveloppé de diarrhée (BVDV), qui n'a pas une remarque isoélectrique connue. Les méthodes appariées.

« Tellement maintenant nous pouvons essayer et prévoir des conditions de chromatographie avec juste un peu de virus, » Heldt a dit, expliquant que la chromatographie emploie la charge extérieure pour déterminer si un virus est présent dans un examen médical ou pour la purification vaccinique.

« En outre, nous avons une caractéristique préliminaire qui montre que ceci pourrait être utile pour les virus de fabrication qui pourraient être modifiés et employés pour viser les gènes spécifiques pour aider avec les maladies comme la dystrophie musculaire et quelques rétinopathies. »

Dans des points de droit pour la chromatographie et la thérapie génique, moins est plus. Dans un fuselage ou un vaccin, il ne prend pas beaucoup de virus pour limiter les dégats ; les méthodes d'unique-particule ont pu apporter plus de réponses en plus petit échantillon.

Pour la thérapie génique, utilisant un groupe de capsids inactifs de virus qu'un système immunitaire de l'organisme combattrait n'est pas la demande de règlement idéale ; CFM pourrait plus facilement discerner inactif des capsids actifs, qui pourraient alors être épurés pour plus de traitement efficace.

En tant que technicien biomédical, Heldt est désireux pour jeter un pont sur la compréhension principale de la chimie de virus et de ses applications. En raffinant la caractérisation de virus, les méthodes d'unique-particule ont pu profiler plusieurs procédés médicaux comprenant la fabrication vaccinique de production et de thérapie génique.

Source:
Journal reference:

Mi, X. et al. (2019) Virus Isoelectric Point Determination Using Single-Particle Chemical Force Microscopy. Langmuir. doi.org/10.1021/acs.langmuir.9b03070.