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La méthode unicellulaire d'évaluation d'ADN peut trouver des anomalies génétiques foetales

Des tests prénatals non envahissants (NIPTs) sont employés pour l'examen critique foetal de maladie génétique dans les femmes enceintes. En revanche, les tests invasifs comme l'amniocentèse comportent le risque d'entraîner le tort foetal. Un état dans le tourillon de la diagnose moléculaire, publié par Elsevier, décrit l'élaboration d'une méthode unicellulaire d'évaluation d'ADN avec la sensibilité et la spécificité élevées. Ce test non envahissant active l'extraction directe d'information génétique des cellules foetales sous tension pour le bilan simultané, améliorant de ce fait la probabilité de trouver une anomalie foetale.

NIPTs déterminé ont des limitations importantes comprenant des résultats noninformative. Par conséquent, les méthodes nouvelles pour le diagnostic définitif non envahissant des anomalies génétiques foetales sont nécessaires. Utilisant un ACP digital modifié de gouttelette unique unique cellule (Sc-ddPCR) NIPT, les chercheurs ont conduit une validation de principe l'étude qui a avec succès évalué l'information génétique des cellules foetales extrêmement rares dans le sang périphérique maternel. Ce système Sc-ddPCR modifié permet pour évaluer directement l'information unicellulaire d'ADN des cellules sous tension sans cellule-fixation, cellule-souiller, et opérations entières d'amplification de génome.

Puisque NIPTs analysent actuel de petits fragments d'ADN, il peut être provocant pour s'assurer que l'origine de chaque fragment d'ADN est la mère ou son foetus. Nous avons observé que dans certains cas les résultats de NIPT sont discordants avec l'information génétique foetale qui a été rapportée. Cette étude sert de validation de principe pour le diagnostic prénatal non envahissant utilisant les cellules foetales de diffusion sans n'importe quelle purification stricte de cellules. »

Kenichiro Hata, DM, PhD, principal enquêteur, Président de biologie Maternel-Foetale à l'institut de recherches national pour des santés de l'enfant et développement, Tokyo, Japon

Avec cette technique modifiée, jusqu'à 3.000 cellules selon le puits peuvent être encapsulées dans chaque gouttelette et simultanément s'analyser. Le système Sc-ddPCR originel évalue simultanément l'information génétique unicellulaire avec la sensibilité et la spécificité élevées. Cependant, le système originel est seulement utile pour des suspensions de cellules avec un mouvement propre clair (c.-à-d., les lignées cellulaires lavées ou les cellules clairement triées avec la cellule fluorescence-activée triant). Les chercheurs ont modifié ce système Sc-ddPCR pour améliorer l'environnement d'ACP dans chaque gouttelette avec une sensibilité et une spécificité plus élevées, qui permet pour évaluer maintenant l'information génétique unicellulaire des échantillons nucléés crûment épurés de cellules avec des impuretés.

Pour confirmer la sensibilité de ce système Sc-ddPCR modifié, les chercheurs ont trouvé l'ADN génomique des cellules foetales mâles de diffusion dans une suspension crûment triée de cellules au niveau unicellulaire dérivé des prises de sang périphériques des mères avec les foetus mâles.

Les chercheurs ont recherché la présence du gène de sexe-détermination de la région Y (SRY), qui est responsable de l'amorçage de la détermination de sexe mâle. L'analyse de 13 prises de sang a indiqué que seulement la diffusion des cellules foetales des trois femmes enceintes transportant les foetus mâles a vérifié le positif pour le gène de SRY, à la différence des cellules des 10 femmes enceintes transportant les foetus femelles. Ceci indique que le système Sc-ddPCR modifié a non seulement la sensibilité élevée, mais également spécificité élevée.

« À l'avenir, en optimisant trier et encapsulation de cellules, ainsi que produisant d'un environnement plus efficace d'ACP dans chaque gouttelette, ce système Sc-ddPCR modifié peut être une méthode d'analyse de découverte qui peut être appliquée aux royaumes variés de recherches et probablement au test diagnostique clinique, » M. commenté Hata.

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