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A técnica nova pode etiquetar moléculas diversas em uma única amostra de tecido

Uma técnica nova pode etiquetar moléculas diversas e amplificar o sinal ajudar pesquisadores a manchar aqueles que são especialmente raros. SABRE chamado (amplificação pela reacção de troca), laboratório do sinal de Peng Yin no instituto do Wyss de Harvard introduziu primeiramente este método no ano passado e desde que encontraram maneiras do aplicar às proteínas, ADN e RNA. Yin explicará como a nanotecnologia projetada do ADN, incluindo o SABRE, pode ajudar cientistas a analisar a paisagem molecular terça-feira 18 de fevereiro na reuniãoth 64 anual da sociedade biofísica em San Diego, Califórnia.

Para compreender como nossos corpos funcionam normalmente ou durante a doença a níveis celulares e moleculars, podendo visualizar uma escala das moléculas é essencial. Há actualmente uns métodos para fazer isto, mas cada um tem suas limitações. É especialmente difícil ver as moléculas da baixo-abundância, que dão um sinal fraco ou não-detectável quando uma única ponta de prova fluorescente anexa. Igualmente está desafiando para ver simultaneamente muitas moléculas ou para procurar moléculas raras em grandes e amostras de tecido complexas, como biópsias do tumor. Peng inspirado estas limitações Yin para projectar e desenvolver nanotecnologia novas.

O SABRE é uma nanotecnologia que emprega os moldes personalizados do ADN que podem anexar às moléculas do interesse. Cada molde do ADN igualmente tem alvos para adicionar as pontas de prova fluorescentes, que podem ser projectadas ter um teste padrão de ramificação para acomodar umas pontas de prova mais fluorescentes, facilitando desse modo o detectar moléculas raras. Na primeira demonstração da tecnologia do SABRE, Yin e os colegas visaram seqüências do ADN e do RNA na retina do rato e igualmente visualizaram 17 regiões diferentes do alvo simultaneamente no cromossomo x humano. Esta é uma melhoria significativa sobre o método convencional, conhecido como os PEIXES (hibridação in situ da fluorescência), que tiveram uma dificuldade detectar seqüências raras, especialmente no tecido grosso, e foram limitados a uma ponta de prova fluorescente.

Para usar o SABRE para detectar proteínas, Yin e os colegas anexaram os punhos curtos do ADN aos anticorpos. Os anticorpos ligam especificamente às proteínas, a seguir o processo do SABRE pode adicionar seqüências do ADN em um teste padrão de ramificação para adicionar moléculas fluorescentes. Nomearam o immuno-SABRE da técnica. Ao contrário de immuno-florescence padrão, em que somente cinco proteínas podem tipicamente ser etiquetadas na mesma amostra, acoplando o immuno-SABRE a um método da troca do ADN, etiquetaram dez proteínas na mesma amostra da retina.

Devido a sua velocidade, o baixo custo, e a capacidade detectar muitas moléculas da baixo-abundância na mesma amostra, SABRE oferecem a possibilidade de selecção da alto-produção, que poderia avançar a biologia básica, a descoberta do biomarker, e diagnósticos clínicos, Yin dizem. E um dia, PengYin diz:

O SABRE podia ser útil para combinar pacientes com os tratamentos óptimos baseados no teste padrão espacial de marcadores da proteína. Por exemplo, para o cancro, o microambiente do tumor pode ser caracterizado pelo teste padrão espacial da expressão dos marcadores da proteína, que poderiam informar o tratamento da imunoterapia.”