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Usando o método de detecção ultrasensitive da proteína para avaliar a qualidade do embrião

A infertilidade é calculada para afectar global 9% de pares reprodutivo-envelhecidos, e muitos pares giram conseqüentemente para a tecnologia reprodutiva ajudada (ART). Selecionar embriões com potencial de revelação máximo joga um papel essencial em obter a taxa a mais alta de sucesso no tratamento da ARTE, que determina finalmente se um par obtem grávido.

A maneira convencional de seleccionar embriões é baseada principalmente em uma contagem morfológica, uma contagem baseada no formulário do embrião. Este método, contudo, é subjetivo, e há uma variabilidade inerente em como os embryologists marcam a morfologia dos embriões.

Em comparação, os pesquisadores encontraram-na mais objetiva para avaliar a qualidade de um embrião detectando o índice das proteínas segregadas pelo embrião. Em um papel para Biomicrofluidics, do AIP que publica, um método para detectar as proteínas do traço segregadas por embriões usando gotas microfluidic e as posses multicoloridos da fluorescência prometem seleccionar embriões para o art. Os pesquisadores analisados gastaram media de cultura do embrião de 30 pacientes em Shenzhen, China, recolhida entre maio até julho de 2019.

A pesquisa extensiva na ARTE no secretomics, a análise do secretome, ou as proteínas segregadas de uma pilha, tecido ou organismo, permitem a detecção destas proteínas do traço. Contudo, os pesquisadores são enfrentados com um desafio devido às quantidades muito pequenas destas proteínas e aos limites de ferramentas da detecção.

O método propor aponta prever o potencial desenvolvente do embrião baseado no secretomics. Nós precisamos somente uma gota pequena do media de conseguir esta.”

Yong Zeng, cientista principal do centro da fertilidade no hospital da urologia de Shenzhen Zhongshan em Shenzhen, China

A equipe usou as microplaquetas microfluidic, que são os dispositivos minúsculos que permitem uma pequena quantidade de líquido de ser processados ou visualizado. Zeng e sua equipe podiam assegurar a precisão de seus resultados usando um multi detector da fluorescência (MFD).

Os grânulos magnéticos fluorescentes e os beta-glucanase produtos enzima-induzidos da fluorescência têm comprimentos de onda diferentes da excitação e da emissão e podem ser detectados pelo microfarad. A equipe podia conseqüentemente eliminar os sinais do falso positivo gerados por beta-glucanase livre.

Usando este método de detecção ultrasensitive, os pesquisadores encontraram que a gonadotropina corionic humana segregada por blastocysts da parte-qualidade era significativamente mais alta do que aquela dos blastocysts da não-parte-qualidade e dos embriões que não se tornaram blastocysts. A gonadotropina corionic humana é uma proteína segregada pela placenta e igualmente segregada pelo embrião cultivado in vitro.

“No futuro, nós testaremos outros tipos diferentes das proteínas segregadas pelo embrião e para analisar o relacionamento entre aquelas proteínas e qualidade do embrião,” disse Zeng.

Desde que as várias proteínas embrião-segregadas aparecem frequentemente muito em pequenas quantidades, igualmente trabalharão para desenvolver sistemas de detecção cada vez mais sensíveis e multifactor da proteína.

Source:
Journal reference:

Chen, P., et al. (2020) A method for the detection of hCGβ in spent embryo culture medium based on multicolor fluorescence detection from microfluidic droplets. Biomicrofluidics. doi.org/10.1063/1.5141490.