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Immunohistochimie en couleurs (IHC) : Aller au delà d'une couleur unique

insights from industryDr. Will HowatHead of Imaging & Immunohistochemistry Abcam

Une entrevue avec le M. Howat d'Abcam chez SfN 2018, en discutant les possibilités et les défis de l'immunohistochimie (IHC) au delà d'une couleur unique !

De votre expérience, combien répandue est-elle l'utilisation de l'IHC aujourd'hui ? Que livre-t-elle en termes de analyses biologiques ?

L'IHC est juste comme répandu maintenant qu'il a été depuis de nombreuses années, sinon plus ainsi. Il a employé dans chaque domaine, et particulièrement en neurologie - si elle est sous forme de matériel fixe, les parties en mouvement libre de cerveau, ou dans les parties épaisses de FibroDerm de 50 microns - il y a tant de différentes applications.

Le prélèvement de tissu souillé utilisant le multiple a fluorescent marqué des anticorps - image produite par Karl Dupont

Karl Dupont | Shutterstock

Par exemple, dans le domaine de la biologie de cancer, nous pouvons employer l'IHC pour recenser les types de cellules qui agissent l'un sur l'autre les uns avec les autres. En outre, dans le domaine de neurologie, nous pouvons employer l'IHC pour différencier les neurones endommagés qui expriment les bornes particulières de surface de cellules des neurones sains en régions spécifiques du cerveau.

Essentiellement, l'IHC fournit des caractéristiques spatiales que vous ne pouvez pas réaliser des analyses telles que l'analyse de l'ADN ou l'analyse de protéine. Il est critique pour pouvoir examiner en travers d'un prélèvement de tissu entier et recenser la présence des bornes de surface de cellules.

Que voyez-vous comme barrages à l'adoption plus large de l'IHC en couleurs ?

Le barrage principal à l'IHC en couleurs sait quelle technique à utiliser-et alignant cette technique avec la bonne technologie.

La mise en oeuvre de l'IHC utilisant quatre couleurs est assez droite. Cependant, aller au delà de ceci exige le matériel de spécialiste et une compréhension en profondeur de la façon dont vous effectuerez la souillure. Par exemple, vous devez aligner votre technique avec des anticorps de haute qualité et établir une méthode de souillure.

Il y a tant de différentes voies de faire ceci, tel que De-souiller et souiller des méthodes. Mais, des moyens de représentation de répétition vous devez piquer l'image finale ensemble, qui exige de la technique de fonctionner sans joint pour éviter des corps étrangers.

C'est pourquoi nous sommes tout à fait enthousiastes par certaines des technologies neuves qui permettent à l'IHC en couleurs d'être effectué utilisant une souillure unique, suivi de la représentation. Le problème est vous matériel de spécialiste en besoin. L'obtention de l'accès au matériel peut être un barrage important à une adoption plus large.

Chez Abcam, nous fournissons les protocoles et les guides qui permettront à l'usager d'établir sur les méthodes qu'ils sont déjà confortables avec. Nous fournissons le conseil sur ce qui fonctionne bien et ce qui ne fait pas et proposer d'autres options pour explorer, incluant s'ils pourraient conjuguer leurs propres anticorps, par exemple. Il est au sujet de donner aux gens des signes complémentaires et des guides pour les aider le long de la route.

Partie de tissu qui a subi l

Karl Dupont | Shutterstock

Dans le domaine de la neurologie en particulier, comment voyez-vous l'IHC améliorer la compréhension des maladies et des conditions complexes ?

L'IHC est une technique bien établie dans le domaine de neurologie. Il peut être appliqué aux échantillons entiers de cerveau, parties en mouvement libre, tissus paraffine-encastrés, même échantillons cryopreserved. Il a employé dans tous les endroits.

Il est particulièrement utile pour des chercheurs essayant de comprendre la connectivité des neurones dans la maladie ; où cela pourraient-ils va mal, et comment ces anticorps expliquer la variabilité entre la normale et les conditions de la maladie telles qu'Alzheimer, par exemple ? Sans avoir que l'information spatiale, il est très difficile de comprendre la pathophysiologie de telles maladies.

Si vous pourriez offrir des lecteurs intéressés à employer le conseil principal d'IHC un, que serait-il ?

Éventuel, l'IHC en couleurs a besoin de validation. C'est quelque chose au lequel Abcam travaillent activement. Nous devons être sûrs que les anticorps que nous fournissons grippent au bon objectif, et n'ont aucune interaction de hors circuit-objectif qui produirait le bruit de fond. Pour faire ceci, nous mettons autant de contrôles dans le procédé car possible de sorte que nous puissions être sûrs que les anticorps sont dans la bonne cellule, dans le compartiment droit et lié à la protéine droite.

Où peuvent les lecteurs trouver plus d'informations ?

Au sujet du M. Howat

Image de verticale de volonté HowatAbcam jointif par Howat en août 2018 et est responsable d'aboutir la représentation et l'équipe d'immunohistochimie.

Avant de joindre Abcam, fonctionné chez AstraZeneca en tant que meneur d'équipe du groupe moléculaire de pathologie, où son équipe a développé des analyses de biomarqueur pour préclinique, des tests cliniques de la phase 1 et de la phase 2. Il a également travaillé à l'institut bienvenu de Sanger de confiance dans l'atlas de l'expression de la protéine, où il était responsable de la R&D pour le groupe d'immunohistochimie.

Installera et a fait fonctionner l'installation de faisceau de Histopathology/ISH à l'institut BRITANNIQUE de Cambridge de cancérologie pendant 9 années.

Il a un B.Sc. (Chéris) en immunologie et pharmacologie de l'université de Strathclyde et un Ph.D. en pathologie de l'université de Southampton.

Il a les premières publications d'auteur dans le bistouri, le tourillon américain de la pathologie et le tourillon de la pathologie ainsi que les publications de co-auteur dans la nature, la Science, la génétique de nature, et le tourillon de la médecine expérimentale.

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