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Immunohistochemistry multicolor (IHC): El ir más allá de un único color

insights from industryDr. Will HowatHead of Imaging & Immunohistochemistry Abcam

Una entrevista con el Dr. (IHC)¡Howat de Abcam en SfN 2018, discutiendo las posibilidades y los retos del immunohistochemistry más allá de un único color!

¿De su experiencia, cómo frecuente es el uso de IHC hoy? ¿Qué entrega en términos de discernimientos biológicos?

IHC es apenas tan frecuente ahora como ha estado durante muchos años, si no más tan. Ha utilizado en cada campo, y especialmente en neurología - si está bajo la forma de material fijo, las secciones de flotación libre del cerebro, o en las secciones gruesas de FibroDerm de 50 micrones - hay tan muchos diversos usos.

La muestra de tejido manchada usando múltiplo fluorescente etiqueta los anticuerpos - imagen generada por Carl Du Pont

Carl Du Pont | Shutterstock

Por ejemplo, en el campo de la biología del cáncer, podemos utilizar IHC para determinar los tipos de la célula que están obrando recíprocamente con uno a. Además, en el campo de la neurología, podemos utilizar IHC para distinguir las neuronas dañadas que están expresando marcadores determinados de la superficie de la célula de las neuronas sanas en las regiones específicas del cerebro.

Esencialmente, IHC ofrece datos espaciales que usted no puede lograr de análisis tales como análisis de la DNA o análisis de la proteína. Es crítico para poder observar a través de una muestra de tejido entera y determinar la presencia de marcadores de la superficie de la célula.

¿Qué usted ve como las barreras a la adopción más amplia de IHC multicolor?

La barrera mayor a IHC multicolor está sabiendo qué técnica a utilizar y que alinea esta técnica con la tecnología correcta.

La realización de IHC usando cuatro colores es bastante directa. Sin embargo, el ir más allá de esto requiere el equipo del especialista y una comprensión profundizada de cómo usted realizará la coloración. Por ejemplo, usted necesita alinear su técnica con los anticuerpos de alta calidad y resolver un método de coloración.

Hay tan muchas maneras diferentes de hacer esto, tal como de-coloración y coloración de métodos. Pero, los medios de la proyección de imagen de la repetición usted tiene que coser la imagen final junto, que requiere la técnica trabajar inconsútil para evitar los artefactos.

Esta es la razón por la cual somos muy emocionados por algunas de las nuevas tecnologías que permiten que IHC multicolor sea realizado usando una única mancha de óxido, seguido por la proyección de imagen. El problema es usted equipo del especialista de la necesidad. Conseguir el acceso al equipo puede ser una barrera importante a una adopción más amplia.

En Abcam, ofrecemos los protocolos y las guías que permitirán que el utilizador emplee los métodos que son ya cómodas con. Asesoramos sobre qué trabaja bien y qué no lo hace y sugerir otras opciones para explorar, incluyendo si podrían conjugar sus propios anticuerpos, por ejemplo. Está sobre el donante gente de indirectas y de guías adicionales para ayudarles a lo largo del camino.

Sección del tejido que ha experimentado IHC multicolor para generar una imagen del festonear, azul y púrpura - por Carl Du Pont

Carl Du Pont | Shutterstock

¿En el campo de la neurología determinado, cómo usted ve IHC el aumentar de la comprensión de enfermedades y de condiciones complejas?

IHC es una técnica establecida en el campo de la neurología. Puede ser aplicado a las muestras enteras del cerebro, secciones de flotación libre, tejidos parafina-embutidos, incluso muestras cryopreserved. Ha utilizado en todas las áreas.

Es determinado útil para los investigadores que intentan entender la conectividad de neuronas en enfermedad; ¿dónde eso sale mal, y cómo podrían esos anticuerpos demostrar la variabilidad entre los estados normales y de la enfermedad tales como Alzheimer, por ejemplo? Sin tener que la información espacial, él es muy difícil entender la patofisiología de tales enfermedades.

¿Si usted podría ofrecer a los programas de lectura interesados al usar el consejo dominante de IHC uno, cuáles sería?

Final, IHC multicolor necesita la validación. Éste es algo en el cual Abcam está trabajando activamente. Necesitamos estar seguros que los anticuerpos que ofrecemos están atando al objetivo correcto, y no tienen ningunas acciones recíprocas del lejos-objetivo que crearan ruido de fondo. Para hacer esto, ponemos tantos mandos en el proceso pues posible de modo que poder estar seguros que los anticuerpos están en la célula correcta, en la división derecha y limitado a la proteína derecha.

¿Dónde pueden los programas de lectura encontrar más información?

Sobre el Dr. Howat

Imagen del retrato de la voluntad HowatAbcam ensamblado Howat en agosto de 2018 y es responsable de llevar la proyección de imagen y las personas del Immunohistochemistry.

Antes de ensamblar Abcam, trabajado en AstraZeneca como el líder de personas del grupo molecular de la patología, donde sus personas desarrollaron los análisis del biomarker para preclínico, las juicios clínicas de la fase 1 y de la fase 2. Él también trabajó en el instituto agradable de Sanger de la confianza dentro del atlas de la expresión de la proteína, donde él estaba responsable del R&D para el grupo del Immunohistochemistry.

Fijará y ejecutó la instalación de la base de Histopathology/ISH en el instituto BRITÁNICO de Cambridge de la investigación de cáncer por 9 años.

Él tiene un B.Sc. (Hons) en inmunología y farmacología de la universidad de Strathclyde y un Ph.D. en patología de la universidad de Southampton.

Él tiene primeras publicaciones del autor en la lanceta, el gorrón americano de la patología y el gorrón de la patología así como las publicaciones del co-autor en naturaleza, ciencia, las genéticas de la naturaleza, y el gorrón del remedio experimental.

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