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O desempenho variado do anticorpo SARS-CoV-2 testa em detectar a imunidade protectora

O desempenho de testes serological disponíveis no comércio em amostras pacientes reais e as correlações da imunidade ao coronavirus 2 da Síndrome Respiratória Aguda Grave (SARS-CoV-2) fornecido por anticorpos de IgG são ainda uma matéria do debate. Um papel novo da pré-impressão do bioRxiv interroga o desempenho de diversos ensaios e proclama o teste de neutralização da redução da chapa (PRNT) como um método de escolha.

Anticorpo IgG1 monoclonal (imunoglobulina). rendição 3D baseada na entrada 1igy do banco de dados de proteína. Crédito de imagem: StudioMolekuul/Shutterstock
Anticorpo IgG1 monoclonal (imunoglobulina). rendição 3D baseada na entrada 1igy do banco de dados de proteína. Crédito de imagem: StudioMolekuul/Shutterstock

A pandemia da doença 2019 de Coronavirus (COVID-19) causada por SARS-CoV-2 alertou revelações rápidas em tecnologias diagnósticas. Actualmente, não há nenhuma vacina ou as drogas disponíveis, tão lá são negociações sobre a utilização do plasma convalescente para finalidades do tratamento.

O teste da amplificação do ácido nucleico (tal como a reacção em cadeia da polimerase ou o PCR) representa o método de escolha nas fases adiantadas de infecção.

Se o plasma convalescente é usado para estas finalidades, os ensaios sensíveis e especialmente altamente específicos do anticorpo são necessários. Porque o espectro dos sinais SARS-CoV-2 clínicos é muito largo, e as infecções assintomáticas são relatadas, para adquirir o conhecimento sobre o seroprevalence de SARS-CoV-2 e para testá-lo para a imunidade individual (potencial), há uma procura crescente na detecção de anticorpos, especialmente de anticorpos de IgG.

Também, há uma necessidade de detectar a infecção passada para encontrar adequadamente correlações da protecção imune. Eis porque pesquisadores do instituto para a virologia médica no hospital da universidade de Goethe e do centro alemão para a pesquisa da infecção em Francoforte, Alemanha, decidida avaliar os testes serological disponíveis detalhados.

“Para adquirir o conhecimento sobre o seroprevalence de SARS-CoV-2 e para testá-lo para a imunidade individual (potencial), há uma procura crescente na detecção de anticorpos - especialmente de anticorpos de IgG”, indicam em seu papel.

Pot-pourri viral para a calibragem do desempenho

Os pesquisadores recolhidos continuam amostras do plasma ou do soro de um total de 69 indivíduos com infecção SARS-CoV-2 PCR-diagnosticada em pontos diferentes do tempo. A maioria das amostras foram tomadas dos pacientes com o moderado à doença severa que necessário uma estada do hospital do em-paciente.

As amostras de indivíduos contaminados com o coronavirus humano endémico, o cytomegalovirus, e o vírus de Epstein-Barr foram usadas para avaliar a reactividade cruzada potencial e o risco de resultados do falso positivo. Adicionalmente, as amostras da continuação de pacientes contaminados com os SARS-CoV originais na manifestação 2003 foram usadas igualmente.

Focalizando em anticorpos de IgG, o desempenho de testes de diagnóstico foi analisado para o ensaio lateral do fluxo (as gavetas rápidas do teste de FasStep), o ELISA ou enzima-ligou ensaios da imunoabsorção (ELISA de Euroimmun SARS-CoV-2 IgG e ELISA IgG de Vircell COVID-19), ensaio da imunofluorescência (IFA) e PRNT.

Os resultados principais do desempenho eram a sensibilidade (a capacidade de um ensaio para identificar correctamente pacientes com os anticorpos COVID-19) e a especificidade (a capacidade de um ensaio para identificar correctamente aqueles sem os anticorpos).

Teste condições da sensibilidade/especificidade na vida real

Na fase adiantada de infecção (isto é, entre 5 e 9 dias após a infecção PCR-confirmada), a em-casa desenvolveu o IFA e PRNT mostrou uma sensibilidade de 76,5%, o ELISA de Vircell uma sensibilidade de 70,6%, a sensibilidade rápida do teste da tecnologia da afirmação de 62,5%, e o ELISA de Euroimmun uma sensibilidade de 58,8%.

Estas porcentagens aumentadas a mais de 90% para o período subseqüente da infecção (isto é, dos dias 10-18), alcançando 100% em que ELISA de Vircell, a em-casa IFA, e asseguram testes da tecnologia foram usadas. A especificidade resulta para ELISA de Vircell, em-casa IFA, e ELISA de Euroimmun eram 83,3%, 86,4%, e 96,2%, respectivamente.

Praticamente todas as amostras testaram o positivo nos ensaios disponíveis no comércio mostrados propriedades de neutralização no PRNT (com os titers mais altos do que o 1:20), estipulando uma imunidade protectora potencial.

Isto é importante, como alguns pesquisadores advertem sobre o teste em grande escala do anticorpo para o desenvolvimento de políticas até que nós compreendamos a proporção exacta dos pacientes COVID-19 com anticorpos de neutralização.

Consistência e considerações práticas

Em termos da sensibilidade, os dados obtidos pelo grupo de investigação de Alemanha são consistentes com os resultados previamente publicados. Um problema é que o titer necessário para a imunidade protectora potencial não está definido ainda oficialmente. Igualmente, está provado que a imunidade T-pilha-negociada joga um papel em COVID-19 (ao lado da imunidade humoral).

A vantagem de ensaios laterais do fluxo é que podem ser utilizados por pessoais menos experientes em um ajuste do ponto--cuidado, fornecendo conduzem relativamente a um quadro de curto período de tempo. Todavia, as correlações da infecção viral podem ser detectadas em algumas amostras somente usando o IFA e o PRNT como uma bandeira de ouro.

Observações de conclusão

Embora a reactividade cruzada seja observada com as amostras SARS-CoV da manifestação do SARS em 2003 com IFA e ELISA de Vircell, esta é de pouca importância desde que este vírus é erradicado. Não obstante, os esforços adicionais devem ser feitos para aumentar a especificidade dos ensaios disponíveis mais adicionais, porque todo o resultado de falso positivo fornece uma sensação de segurança falsa.

“Todos em nossos ensaios examinados estudo são elegíveis para a detecção de anticorpos de SARS-CoV-2 IgG, indicando uma imunidade protectora potencial”, sublinham autores do estudo em seu papel.

“Idealmente, obter a sensibilidade máxima, testando deve ser executada na fase mais atrasada de infecção (≥ 10 dias) após a PCR-confirmação ou início da doença de COVID-19”, adicionam.

Este estudo mostrou que o IFA, ELISA de Vircell, e PRNT tiveram a sensibilidade a mais alta entre nosso armamentarium diagnóstico. Ainda, o PRNT é actualmente ainda o método de escolha para debates em relação à imunidade SARS-CoV-2 potencial; conseqüentemente, deve ser executado quando disponível.

Observação *Important

o bioRxiv publica os relatórios científicos preliminares que par-não são revistos e, não devem conseqüentemente ser considerados como conclusivos, guia a prática clínica/comportamento saúde-relacionado, ou tratado como a informação estabelecida.

Journal reference:
Dr. Tomislav Meštrović

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Dr. Tomislav Meštrović

Dr. Tomislav Meštrović is a medical doctor (MD) with a Ph.D. in biomedical and health sciences, specialist in the field of clinical microbiology, and an Assistant Professor at Croatia's youngest university - University North. In addition to his interest in clinical, research and lecturing activities, his immense passion for medical writing and scientific communication goes back to his student days. He enjoys contributing back to the community. In his spare time, Tomislav is a movie buff and an avid traveler.

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