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Um teste altamente sensível e específico do anticorpo para COVID-19

Um estudo novo do prova--conceito pelos pesquisadores BRITÂNICOS, actualmente disponíveis no server da pré-impressão do medRxiv*, descreve a revelação de um ensaio enzima-ligado da imunoabsorção que possa ser usado quando os níveis inferiores do coronavirus da Síndrome Respiratória Aguda Grave 2 específico-anticorpos (SARS-CoV-2) estam presente em amostras do soro e da saliva.

A pandemia da doença 2019 de Coronavirus (COVID-19), causada por SARS-CoV-2, conduziu a milhões de casos e sobre 466 mil mortes no mundo inteiro. Embora a infecção activa seja detectada rotineiramente testando para o material genético viral, esta aproximação não pode ser usada uma vez que os sintomas resolveram.

Eis porque o teste do anticorpo entra o jogo como um método conveniente para determinar a exposição histórica ao vírus, obtem introspecções importantes no estado imunológico do indivíduo, assim como às correlações da medida da protecção contra a re-infecção potencial.

Mas embora a detecção do anticorpo em pacientes hospitalizados com a doença severa provou ser uma tarefa um pouco directa, detectar respostas nos indivíduos com infecções assintomáticas e em formulários suaves da doença provou menos seguro - possivelmente devido à sensibilidade suboptimal e à divisão em compartimentos da resposta do anticorpo.

Daqui, uns ensaios serological mais sensíveis, mais evolutivos, e específicos são essenciais abordar esta pandemia e diagnosticar complicações associadas SARS-CoV-2 mesmo depois a fase activa da doença.

Este estudo por pesquisadores da universidade de Birmingham, da universidade de Southampton, da universidade de Oxford, da confiança da fundação de Birmingham NHS dos hospitais da universidade, grupo Ltd do local obrigatório, e de centro para Gales, relatórios da imunodeficiência na utilização de um ensaio do anticorpo para detectar anticorpos nos indivíduos com níveis inferiores da resposta do específico-anticorpo SARS-CoV-2.

Como detectar níveis inferiores dos anticorpos?

Este grupo de investigação desenvolveu sistemàtica um ensaio enzima-ligado do ensaio da imunoabsorção (ELISA) aperfeiçoando antígenos diferentes e etapas da amplificação. O uso deste ensaio era favorável para as amostras do soro e da saliva derivadas dos indivíduos sintomáticos e assintomáticos de SARS-CoV-2-infected.

Todas as amostras para este estudo foram recolhidas dos trabalhadores dos cuidados médicos na confiança da fundação de Birmingham NHS dos hospitais da universidade como parte do estudo dos Cocos, que é um esforço ambicioso da pesquisa que aponta estudar em detalhe a imunologia de COVID-19.

A fim detectar níveis inferiores dos anticorpos, os pesquisadores examinaram respostas a dois bem-caracterizaram proteínas virais: a proteína superfície-expor do ponto (S-proteína), que é visado neutralizando anticorpos, e a proteína do nucleocapsid (N-proteína) como a proteína viral a mais abundante.

Seu método centrado sobre a aplicação de aproximações diferentes para distinguir o sinal do best: a relação do noise, e em cima de identificar a aproximação óptima, o plano era determinar o relacionamento entre anticorpos no soro e saliva.

S-proteína SARS-CoV-2 trimeric como um alvo ideal

Neste método alterado de ELISA, uma S-proteína trimeric total na comparação directa com a N-proteína fornecida melhorou a discriminação entre SARS-CoV-2 positivo e amostras negativas, isto é, pode ser usada como uma maneira melhor de separar entre indivíduos contaminados e não-contaminados.

ensaio Enzima-ligado da imunoabsorção ou placa de ELISA, método de teste da imunologia no laboratório. Crédito de imagem: Jarun Ontakrai/Shutterstock
ensaio Enzima-ligado da imunoabsorção ou placa de ELISA, método de teste da imunologia no laboratório. Crédito de imagem: Jarun Ontakrai/Shutterstock

Além disso, os pesquisadores encontraram que as amostras dos indivíduos hospitalizados tiveram respostas de um anticorpo mais forte (IgG) da imunoglobulina G, (IgA) da imunoglobulina A, e (IgM) da imunoglobulina M contra todos os antígenos relevantes, que reforçaram os dados disponíveis da literatura médica.

Contudo, a novidade principal era a noção que a distribuição da subclasse do anticorpo não difere segundo a severidade da doença; conseqüentemente, a detecção combinada de IgG, de IgA, e de IgM pode aumentar a detecção de respostas do anticorpo no espectro inteiro de apresentações da doença.

Adicionalmente, os anticorpos somente de IgG, de IgA, e de IgM contra a S-proteína são detectáveis na saliva dos indivíduos sintomáticos auto-relatados, mas não naquelas contra a N-proteína. Também, os anticorpos à S-proteína na saliva podem ser identificados independentemente das respostas do soro.

Para o método mais sensível de ELISA

Este trabalho ajudará indubitàvelmente em acelerar a revelação de técnicas sensíveis de ELISA para nosso armamentarium diagnóstico; mais especificamente, os métodos padrão de ELISA que são baseados na S-proteína de alta qualidade podem prontamente ser alterados para detectar respostas do anticorpo do soro e da saliva em COVID-19 severo, suave e assintomático.

“Compreendendo o relacionamento entre as apresentações clínicas variadas de COVID-19 e a resposta serological que elevara durante e depois da infecção será do significado principal em compreender o immunopathogenesis da doença e em selecionar tratamentos apropriados”, reforce autores do estudo em seu papel do medRxiv.

Igualmente, isto pode servir como uma ferramenta adicional para avaliar a imunidade SARS-CoV-2 humoral curto e a longo prazo (especialmente para COVID-19 comunidade-adquirido) e compreender a natureza de respostas protectoras naturais e futuro vacina-induzidas.

Observação *Important

o medRxiv publica os relatórios científicos preliminares que par-não são revistos e, não devem conseqüentemente ser considerados como conclusivos, guia a prática clínica/comportamento saúde-relacionado, ou tratado como a informação estabelecida.

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Dr. Tomislav Meštrović

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Dr. Tomislav Meštrović

Dr. Tomislav Meštrović is a medical doctor (MD) with a Ph.D. in biomedical and health sciences, specialist in the field of clinical microbiology, and an Assistant Professor at Croatia's youngest university - University North. In addition to his interest in clinical, research and lecturing activities, his immense passion for medical writing and scientific communication goes back to his student days. He enjoys contributing back to the community. In his spare time, Tomislav is a movie buff and an avid traveler.

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