Avertissement : Cette page est une traduction automatique de cette page à l'origine en anglais. Veuillez noter puisque les traductions sont générées par des machines, pas tous les traduction sera parfaite. Ce site Web et ses pages Web sont destinés à être lus en anglais. Toute traduction de ce site et de ses pages Web peut être imprécis et inexacte, en tout ou en partie. Cette traduction est fournie dans une pratique.

L'analyse neuve vérifie rapidement la neutralisation SARS-CoV-2 et examine des antivirals

Les chercheurs à la succursale médicale d'Université du Texas, Galveston, ont développé une plate-forme neuve qui peut rapidement vérifier l'activité de neutralisation d'anticorps contre le coronavirus 2 (SARS-CoV-2) de syndrôme respiratoire aigu sévère et exécuter l'examen critique de haut-débit des agents antiviraux potentiels.

SARS-CoV-2, tableau 2019 de virus de nCoV. Crédit d
SARS-CoV-2, tableau 2019 de virus de nCoV. Crédit d'image : FX d'Orphée/Shutterstock

L'analyse neuve, le nanoluciferase appelé SARS-CoV-2 (SARS-CoV-2-Nluc), produit des résultats de neutralisation d'anticorps plus rapidement que la technique actuelle d'étalon-or, diminuant le temps de basculement de trois jours à cinq heures.

Elle a également exécuté l'examen critique antiviral fiable, de haut-débit et a recensé le rupintrivir humain de médicament de rhinovirus, comme inhibiteur potentiellement efficace de SARS-CoV-2.

Les auteurs disent que le rupintrivir peut maintenant être considéré comme pour que davantage de contrôle déterminant son potentiel comme demande de règlement pour la maladie 2019 (COVID-19) de coronavirus.

Une version de prétirage du papier est procurable sur le serveur de bioRxiv*, alors que l'article subit l'inspection professionnelle.

Méthodes d'essai actuelles

Depuis que la pandémie COVID-19 a commencé à Wuhan, Chine, tard l'année dernière, le RT-PCR basé nucléique (réaction en chaîne inverse de transcriptase-polymérase) vérifiant a été employé pour diagnostiquer des gens avec le viral infection aigu et pour tracer et régler la boîte de vitesses de contact.

Cependant, vu le numéro de la sérodiagnose de personnes infectées qui sont asymptomatiques, rapide, et fiable est eu un besoin urgent pour aider à déterminer l'écaille vraie de l'infection au sein des communautés.

En outre, pouvoir évaluer le niveau des anticorps de neutralisation rapidement aiderait des chercheurs à comprendre la goujon-infection d'immunité, à recenser les donneurs potentiels des anticorps protecteurs, et à évaluer les vaccins qui sont actuel dans le pipeline.

Plusieurs analyses sérologiques ont été développées, mais l'étalon-or est jusqu'ici le test de neutralisation de réduction de plaque (PRNT), puisqu'il détermine directement les niveaux des anticorps de neutralisation requis pour empêcher le virus de type sauvage.

Cependant, la technique est inférieur-débit, avec un temps de basculement qui le rend inapproprié pour le diagnostic de grande puissance de COVID-19.

L'analyse neuve est haut-débit

« Une plate-forme de haut-débit faciliterait grand le contrôle COVID-19 sérologique et examen critique antiviral, » dites les chercheurs.

Maintenant, Pei-Yong Shi et les collègues ont développé la plate-forme de SARS-CoV-2-Nluc, une analyse de virus de journaliste qui montre la réplication assimilée au type sauvage SARS-CoV-2 in vitro.

À l'utilisation de l'analyse pour mesurer la neutralisation d'anticorps dans les sérums des patients avec COVID-19, les résultats produits étaient comparables à ceux de PRNT conventionnel.

En outre, le temps de basculement réalisé avec l'analyse du haut-débit SARS-CoV-2-Nluc (3 heures) était sensiblement plus court qu'est actuel réalisé avec l'inférieur-débit PRNT (trois jours).

Bien que l'analyse ait été exécutée dans un format de 96 puits pour cette étude, Shi et collègues indiquent l'importance et la dynamique du moyen de signe de Nluc qu'elle pourrait facilement être adaptée à l'384 - ou format de 1536 puits pour le contrôle de grande puissance.

« Ainsi, l'analyse peut promptement être déployée pour le bilan vaccinique de grande puissance et le contrôle de neutralisation d'anticorps chez l'homme, » écrivent les chercheurs.

Application de SARS-CoV-2-Nluc en analysant hACE2 comme récepteur d
Application de SARS-CoV-2-Nluc en analysant hACE2 comme récepteur d'entrée. (a) Cinétique de réplication de SARS-CoV-2-Nluc (IC Nluc) sur des cellules de Vero E6. Les cellules étaient infectées avec l'IC Nluc à MOI 1,0. Aux remarques données de temps, des cellules ont été moissonnées pour la mesure de signe de luciferase. Les moyens et les écarts-type de trois expériences indépendantes sont présentés. (b) Diagram pour analyser hACE2 pour l'entrée de Nluc d'IC. (c) Le luciferase relatif signale l'infection suivante des cellules qui ont été príncubées avec des anticorps anti-hDPP4 ou anti-hACE2. Les signes de luciferase des groupes anticorps-traités ont été normalisés à ceux des groupes non traités. La moyenne et l'écart-type de trois expériences indépendantes sont présentés. (d) Analyse d'immunofluorescence de l'expression hACE2 en cellules A549-hACE2. À 24 h goujon-injectant, les cellules étaient fixes et souillées avec de l'anticorps anti-hACE2 polyclonal. (e) Luciferase signale de l'IC Nluc les cellules A549 et A549-hACE2 d'infected561. Les cellules étaient infectées avec MOIs indiqué et des signes de luciferase ont été mesurés à 24 goujon-infections de h.

Développer l'analyse pour l'examen critique antiviral

Ensuite, l'équipe a développé une version de l'analyse d'infection de SARS-CoV-2-Nluc pour l'examen critique de haut-débit des antivirals et a validé la méthode utilisant les inhibiteurs connus de SARS-CoV-2, y compris le remdesivir et la chloroquine.

Ils ont alors employé l'analyse pour vérifier les médicaments antiviraux et anti-infectants approuvés et d'investigation variés, y compris ceux connus pour fonctionner contre le VIH, le virus Hépatite C, et le rhinovirus humain.

De 40 composés vérifiés (remdesivir y compris et chloroquine utilisés pour la validation), l'analyse a recensé le nelfinavir de médicaments de VIH et le cobicistat et les rhinovirus humains dopent le rupintrivir comme plus efficace et inhibiteurs sélectifs de SARS-CoV-2-Nluc.

« Basé sur leurs pouvoirs antiviraux a déterminé in vitro, il est peu probable que le nelfinavir ou le cobicistat exercerait des conséquences cliniques importantes dans les patients COVID-19 aux doses cliniquement reconnues de courant, » a dit Shi et équipe.

Rupintrivir peut effectivement empêcher SARS-CoV-2

Cependant, le rupintrivir est un inhibiteur covalent sélecteur des 3 viraux l'enzyme que comme une chymotrypsine de la protéase de cystéine (3CLpro) qui règle la réplication de coronavirus, indiquent les chercheurs.

Rupintrivir peut, pour cette raison, empêcher SARS-CoV-2 en bloquant l'activité principale de protéase de la cystéine 3CLpro, ils proposent.

« Davantage des études seraient requises comprendre mieux le mode des rupintrivir de l'action, efficacité dans des modèles animaux, 268 et les avantages cliniques potentiels dans les patients COVID-19, » écrivent Shi et collègues.

Un rapid, haut-débit, outil fiable

Les chercheurs disent que l'analyse de SARS-CoV-2-Nluc représente un rapid, un haut-débit, un outil fiable pour le contrôle de neutralisation et un examen critique d'antiviral.

« Puisque la neutralisation du titre est un paramètre principal pour prévoir l'immunité, l'analyse rapide de neutralisation de SARS-CoV-2-Nluc activera beaucoup d'aspects de la recherche COVID-19, y compris le contrôle épidémiologique, mise au point de vaccin, et découverte antivirale, » ils écrivent.

Parmi les agents antiviraux examinés, le « rupintrivir a été recensé comme inhibiteur in vitro sélecteur de SARS-CoV-2 qui pourrait être considéré comme pour que d'autres études déterminant entièrement son potentiel pour la demande de règlement de COVID-19, » conclut l'équipe.

Avis *Important

le bioRxiv publie les états scientifiques préliminaires qui pair-ne sont pas observés et ne devraient pas, en conséquence, être considérés comme concluants, guident la pratique clinique/comportement relatif à la santé, ou traité en tant qu'information déterminée.

Journal reference:

Shi PY, et al. A nanoluciferase SARS-CoV-2 for rapid neutralization testing and screening of anti-infective drugs for COVID-19. bioRxiv 2020. doi: https://doi.org/10.1101/2020.06.22.165712

Sally Robertson

Written by

Sally Robertson

Sally first developed an interest in medical communications when she took on the role of Journal Development Editor for BioMed Central (BMC), after having graduated with a degree in biomedical science from Greenwich University.

Citations

Please use one of the following formats to cite this article in your essay, paper or report:

  • APA

    Robertson, Sally. (2020, June 24). L'analyse neuve vérifie rapidement la neutralisation SARS-CoV-2 et examine des antivirals. News-Medical. Retrieved on May 17, 2021 from https://www.news-medical.net/news/20200624/New-assay-rapidly-tests-SARS-CoV-2-neutralization-and-screens-antivirals.aspx.

  • MLA

    Robertson, Sally. "L'analyse neuve vérifie rapidement la neutralisation SARS-CoV-2 et examine des antivirals". News-Medical. 17 May 2021. <https://www.news-medical.net/news/20200624/New-assay-rapidly-tests-SARS-CoV-2-neutralization-and-screens-antivirals.aspx>.

  • Chicago

    Robertson, Sally. "L'analyse neuve vérifie rapidement la neutralisation SARS-CoV-2 et examine des antivirals". News-Medical. https://www.news-medical.net/news/20200624/New-assay-rapidly-tests-SARS-CoV-2-neutralization-and-screens-antivirals.aspx. (accessed May 17, 2021).

  • Harvard

    Robertson, Sally. 2020. L'analyse neuve vérifie rapidement la neutralisation SARS-CoV-2 et examine des antivirals. News-Medical, viewed 17 May 2021, https://www.news-medical.net/news/20200624/New-assay-rapidly-tests-SARS-CoV-2-neutralization-and-screens-antivirals.aspx.