Aviso: Esta página é uma tradução automática da página original em inglês. Por favor note uma vez que as traduções são geradas por máquinas, não tradução tudo será perfeita. Este site e suas páginas da Web destinam-se a ler em inglês. Qualquer tradução deste site e suas páginas da Web pode ser imprecisas e imprecisos no todo ou em parte. Esta tradução é fornecida como uma conveniência.

Um ensaio SARS-CoV-2 usando proteínas de planta

Os pesquisadores em África do Sul desenvolveram um ensaio serological que detectasse prontamente anticorpos contra o coronavirus 2 da Síndrome Respiratória Aguda Grave (SARS-CoV-2) que usa as proteínas virais de recombinação produzidas nas plantas.

O ensaio permitiu a detecção de anticorpos dirigidos nos antígenos da proteína do ponto SARS-CoV-2 que foram expressados dentro e derivados da planta do benthamiana do Nicotiana - conhecida colloquially como o benth ou o benthi e de um familiar próximo do tabaco e da espécie de Nicotiana nativa a Austrália. O benthamiana do N. é igualmente uma planta comum usada “pharming” de anticorpos monoclonais e de outras proteínas de recombinação.

Benthamiana do Nicotiana. Crédito de imagem: Hanjo Hellmann/Shutterstock
Benthamiana do Nicotiana. Crédito de imagem: Hanjo Hellmann/Shutterstock

A proteína do ponto é os usos da estrutura SARS-CoV-2 da membrana ligar a enzima deconversão 2 do receptor humano da pilha de anfitrião (ACE2) e ganhar a entrada viral.

A detecção robusta aqui permitida desenvolvida enzima-ligada indirecta do ensaio da imunoabsorção (ELISA) de anticorpos contra parcelas desta proteína do ponto nas amostras tomadas dos pacientes que tinham sido contaminados previamente com SARS-CoV-2.

Os ensaios Serological que usam tais sistemas planta-baseados da expressão poderiam representar ferramentas convenientes, eficazes na redução de custos para medir o seroprevalence e a imunidade protectora contra SARS-CoV-2 em ajustes less-resourced, diz os hamburgueres de Wendy (universidade de Cape Town, de África do Sul) e os colegas.

Uma versão da pré-impressão do papel está disponível no medRxiv* do server, quando o artigo se submeter à revisão paritária.

Os testes Serological são urgente necessários seguir a propagação da pandemia

A pandemia COVID-19 - causada por SARS-CoV-2 - varreu ràpida o globo desde que começou em Wuhan, China, tarde no ano passado. O vírus, que tem contaminado mais de 18,65 milhões de pessoas e tem causado agora mais de 703.000 mortes, continua a levantar a saúde global significativa e a ameaça sócio-económica.

“Há uma necessidade crítica para a revelação de testes serological de detectar os anticorpos SARS-CoV-2,” escreva hamburgueres e equipe. Da “o seroprevalence população estuda para calcular a extensão da pandemia espalhada nas comunidades, e estuda a definição da imunidade protectora a SARS-CoV-2, todo depende dos testes serological seguros.”

Idealmente, estes testes igualmente precisam de ser eficazes na redução de custos, de modo que sua aplicação em ajustes a renda baixa seja praticável, adicionam a equipe.

Gerando proteínas virais de recombinação

As proteínas de recombinação refinadas exigidas para ensaios serological podem ser geradas usando vários sistemas diferentes da expressão da proteína, incluir bacteriano, mamífero, fermento, insecto, e sistemas planta-baseados.

os sistemas Planta-baseados oferecem diversas vantagens sobre os sistemas mamíferos e insecto-baseados convencionais mais amplamente utilizados. Em particular, são rápidos e eficazes na redução de custos desde que não exigem media ou condições caras do crescimento, que é especialmente desejável em ajustes a renda baixa. Igualmente oferecem vantagens sobre sistemas bacterianos ou fermento-baseados, desde que apoiam as alterações cargo-translational similares àquelas de sistemas da pilha mamífera.

Historicamente, a desvantagem principal associada com os sistemas planta-baseados da expressão da proteína foi baixo rendimento, mas os avanços na tecnologia da planta ajudaram a superar este desafio.

Os autores dizem que benthamiana do Nicotiana está preferido como um sistema da expressão da proteína devido a sua geração rápida de biomassa, de gene cargo-transcricional defeituoso que silenciam o sistema, e de uma vasta gama de estratégias da engenharia essa toda a ajuda para superar o problema do baixo rendimento.

O ensaio novo de ELISA usa as proteínas virais expressadas no benthamiana do Nicotiana

A subunidade S1 da proteína viral do ponto é altamente imunogenética, e sua parcela de RBD é o alvo principal de anticorpos de neutralização depois da infecção, significando que estes os antígenos da proteína do ponto se transformaram um foco importante de muitos estudos serological.

Agora, os hamburgueres e os colegas desenvolveram um ensaio indirecto de ELISA usando o ponto S1, e antígenos de RBD de SARS-CoV-2 expressado no benthamiana do Nicotiana.

A equipe recolheu amostras do soro de 77 sul - os pacientes convalescentes africanos que tinham sido contaminados previamente com SARS-CoV-2, como confirmado pelo teste da reacção em cadeia (PCR) da polimerase. As amostras foram tomadas um número médio de seis semanas que seguem o diagnóstico, e a maioria de pacientes tinham experimentado o suave-à-moderado COVID-19.

os anticorpos Vírus-específicos foram detectados prontamente

Usando o ELISA recentemente desenvolvido com os antígenos virais planta-derivados, os pesquisadores mostraram que as imunoglobulina de SARS-CoV-2-specific (Igs) eram prontamente detectáveis nas amostras.  

Entre os 77 participantes, a reactividade de S1-specific IgG foi detectada em 51 casos (de 66%), e a reactividade RBD-específica de IgG foi detectada em 48 casos (de 62%).

Notàvel, os resultados eram altamente concordantes com validada, ensaio comercial de ELISA da alto-sensibilidade, dizem a equipe.

“Detecção robusta dos anticorpos SARS-CoV-2 específicos”

“Nosso estudo demonstra que as proteínas SARS-CoV-2 de recombinação produzidas nas plantas permitem a detecção robusta de anticorpos de SARS-CoV-2-specific,” escreve hamburgueres e colegas.

Os autores dizem que um dos alvos principais era desenvolver um ensaio eficaz na redução de custos que poderia ser usado para o seroepidemiology em grande escala e a pesquisa na imunidade SARS-CoV-2 humoral.

“Nós conseguimos este utilizando plantas para a produção de antígenos virais, que tem o benefício da escala-acima rápida, e os reagentes da fonte que estavam disponíveis localmente e assim disponível em um mais barato,” escreve.

“Os estudos Serological em um ajuste gostam de nossos, em África do Sul, onde os comorbidities tais como o VIH e a TB são altamente predominantes, underexplored e podem tirar proveito deste ensaio,” concluem a equipe.

Observação *Important

o medRxiv publica os relatórios científicos preliminares que par-não são revistos e, não devem conseqüentemente ser considerados como conclusivos, guia a prática clínica/comportamento saúde-relacionado, ou tratado como a informação estabelecida.

Journal reference:
Sally Robertson

Written by

Sally Robertson

Sally first developed an interest in medical communications when she took on the role of Journal Development Editor for BioMed Central (BMC), after having graduated with a degree in biomedical science from Greenwich University.

Citations

Please use one of the following formats to cite this article in your essay, paper or report:

  • APA

    Robertson, Sally. (2020, August 05). Um ensaio SARS-CoV-2 usando proteínas de planta. News-Medical. Retrieved on September 18, 2021 from https://www.news-medical.net/news/20200805/A-SARS-CoV-2-assay-using-plant-proteins.aspx.

  • MLA

    Robertson, Sally. "Um ensaio SARS-CoV-2 usando proteínas de planta". News-Medical. 18 September 2021. <https://www.news-medical.net/news/20200805/A-SARS-CoV-2-assay-using-plant-proteins.aspx>.

  • Chicago

    Robertson, Sally. "Um ensaio SARS-CoV-2 usando proteínas de planta". News-Medical. https://www.news-medical.net/news/20200805/A-SARS-CoV-2-assay-using-plant-proteins.aspx. (accessed September 18, 2021).

  • Harvard

    Robertson, Sally. 2020. Um ensaio SARS-CoV-2 usando proteínas de planta. News-Medical, viewed 18 September 2021, https://www.news-medical.net/news/20200805/A-SARS-CoV-2-assay-using-plant-proteins.aspx.