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Un análisis SARS-CoV-2 usando las fitoproteínas

Los investigadores en Suráfrica han desarrollado un análisis serológico que descubre fácilmente los anticuerpos contra el coronavirus 2 (SARS-CoV-2) de la neumonía asiática usando las proteínas virales recombinantes producidas en instalaciones.

El análisis habilitó la detección de los anticuerpos dirigidos en los antígenos de la proteína del pico SARS-CoV-2 que fueron expresados hacia adentro y derivados de la instalación del benthamiana de la nicociana - familiar conocida como benth o benthi y de un familiar cercano del tabaco y de la especie de nicociana indígena a Australia. El benthamiana del N. es también una instalación común usada para “pharming” de anticuerpos monoclonales y de otras proteínas recombinantes.

Benthamiana de la nicociana. Haber de imagen: Hanjo Hellmann/Shutterstock
Benthamiana de la nicociana. Haber de imagen: Hanjo Hellmann/Shutterstock

La proteína del pico es las aplicaciones de la estructura SARS-CoV-2 de la membrana de atar la enzima angiotensina-que convierte 2 (ACE2) del receptor humano de la célula huesped y de ganar el asiento viral.

La detección robusta aquí habilitada desarrollada enzima-conectada indirecta del análisis del inmunosorbente (ELISA) de anticuerpos contra porciones de esta proteína del pico en las muestras recogidas de los pacientes que habían sido infectados previamente con SARS-CoV-2.

Los análisis serológicos usando tales sistemas instalación-basados de la expresión podrían representar las herramientas convenientes, de poco costo para medir seroprevalence y la inmunidad protectora contra SARS-CoV-2 en fijaciones less-resourced, dice las hamburguesas de Wendy (universidad de Cape Town, de Suráfrica) y a los colegas.

Una versión de la prueba preliminar del papel está disponible en el medRxiv* del servidor, mientras que el artículo experimenta la revisión paritaria.

Las pruebas serológicas se necesitan urgente para rastrear la extensión del pandémico

El pandémico COVID-19 - causado por SARS-CoV-2 - ha barrido rápidamente el globo desde que comenzó en Wuhan, China, tarde el año pasado. El virus, que ahora ha infectado más de 18,65 millones de personas de y ha causado más de 703.000 muertes, continúa plantear salud global importante y amenaza socioeconómica.

“Hay una necesidad crítica del revelado de pruebas serológicas de descubrir los anticuerpos SARS-CoV-2,” escriba las hamburguesas y a las personas. El “seroprevalence de la población estudia para estimar el fragmento del pandémico extendido en comunidades, y estudia la definición de inmunidad protectora a SARS-CoV-2, todo depende de pruebas serológicas seguras.”

Idealmente, estas pruebas también necesitan ser de poco costo, de modo que su uso en fijaciones de bajos ingresos sea posible, agregan a las personas.

Generar las proteínas virales recombinantes

Las proteínas recombinantes purificadas requeridas para los análisis serológicos se pueden generar usando diversos diversos sistemas de la expresión de la proteína, incluyendo bacteriano, mamífero, la levadura, el insecto, y sistemas instalación-basados.

los sistemas Instalación-basados ofrecen varias ventajas sobre los sistemas mamíferos e insecto-basados convencionales más ampliamente utilizados. Particularmente, son rápidos y de poco costo puesto que no requieren ambientes o condiciones costosos del incremento, que es especialmente deseable en fijaciones de bajos ingresos. También ofrecen ventajas sobre sistemas bacterianos o levadura-basados, puesto que soportan las modificaciones poste-de translación similares a las de los sistemas de la célula mamífera.

Históricamente, la desventaja principal asociada a los sistemas instalación-basados de la expresión de la proteína ha sido rendimiento inferior, pero los avances en tecnología de la instalación han ayudado a vencer este reto.

Los autores dicen que benthamiana de la nicociana está preferida como sistema de la expresión de la proteína debido a su generación rápida de biomasa, de gen poste-transcriptivo defectuoso que impone silencio al sistema, y de una amplia gama de estrategias de la ingeniería esa toda la ayuda para superar el problema del rendimiento inferior.

El nuevo análisis de ELISA utiliza las proteínas virales expresadas en benthamiana de la nicociana

La subunidad S1 de la proteína viral del pico es altamente inmunogenética, y su porción de RBD es el objetivo principal de anticuerpos de neutralización después de la infección, significando que éstos los antígenos de la proteína del pico se han convertido en un foco importante de muchos estudios serológicos.

Ahora, las hamburguesas y los colegas han desarrollado un análisis indirecto de ELISA usando el pico S1, y los antígenos de RBD de SARS-CoV-2 expresado en benthamiana de la nicociana.

Las personas cerco muestras del suero a partir de 77 pacientes convalecientes surafricanos que habían sido infectados previamente con SARS-CoV-2, según lo confirmado por la prueba de la reacción en cadena (PCR) de polimerasa. Las muestras fueron tomadas un punto medio de seis semanas que seguían diagnosis, y la mayoría de los pacientes habían experimentado al suave-a-moderado COVID-19.

los anticuerpos Virus-específicos fueron descubiertos fácilmente

Usando el ELISA desarrollado recientemente con los antígenos virales instalación-derivados, los investigadores mostraron que las inmunoglobulinas de SARS-CoV-2-specific (Igs) eran fácilmente perceptibles en las muestras.  

Entre los 77 participantes, la reactividad de S1-specific IgG fue descubierta en 51 casos (del 66%), y la reactividad RBD-específica de IgG fue descubierta en 48 casos (del 62%).

Notablemente, los resultados eran altamente concordantes con haber validado, análisis comercial de ELISA de la alto-sensibilidad, dicen a las personas.

“Detección robusta de los anticuerpos específicos SARS-CoV-2”

“Nuestro estudio demuestra que las proteínas recombinantes SARS-CoV-2 producidas en instalaciones habilitan la detección robusta de los anticuerpos de SARS-CoV-2-specific,” escribe las hamburguesas y a los colegas.

Los autores dicen que uno de los objetivos principales era desarrollar un análisis de poco costo que se podría utilizar para el seroepidemiology en grande y la investigación en la inmunidad humoral SARS-CoV-2.

“Logramos esto haciendo uso de las instalaciones para la producción de antígenos virales, que tiene la ventaja de la escala-hacia arriba rápida, y los reactivos de la compra de componentes que estaban disponibles localmente y así disponible en un más barato,” ella escribe.

Los “estudios serológicos en una fijación tienen gusto los nuestros, en Suráfrica, donde están altamente frecuentes los comorbidities tales como VIH y TB, underexplored y pueden beneficiarse de este análisis,” concluyen a las personas.

Advertencia *Important

el medRxiv publica los partes científicos preliminares que par-no se revisan y, por lo tanto, no se deben mirar como concluyentes, conduce práctica clínica/comportamiento relativo a la salud, o tratado como información establecida.

Journal reference:
Sally Robertson

Written by

Sally Robertson

Sally first developed an interest in medical communications when she took on the role of Journal Development Editor for BioMed Central (BMC), after having graduated with a degree in biomedical science from Greenwich University.

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