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Os pesquisadores de UConn validam a possibilidade clínica da plataforma CRISPR-baseada para o teste COVID-19

Em março, pesquisadores no departamento da engenharia biomedicável-- um departamento compartilhado nas escolas da medicina dental, da medicina, e da engenharia--começou a desenvolver uma plataforma diagnóstica nova, barata, CRISPR-baseada para detectar as doenças infecciosas, incluindo o vírus do VIH, o coronavirus novo (SARS-CoV-2). Hoje, o método é uma etapa mais perto de ser uma tecnologia pioneiro dos diagnósticos para a detecção rápida de doenças infecciosas.

Conduza pelo professor adjunto Changchun Liu, “o método de CRISPR-Cas12a Todo-Em-Um-Duplo” (AIOD-CRISPR) permite a detecção simples, rápida, ultrasensitive, visual de SARS-CoV-2, pretendida para o uso em casa ou em clínicas pequenas.

Em um papel publicado em comunicações da natureza, os pesquisadores validaram a possibilidade clínica da plataforma usando amostras clínicas do cotonete COVID-19. Adicionalmente, os pesquisadores usaram um aquecedor barato da mão como uma incubadora para detectar resultados clínicos da amostra dentro de 20 minutos.

O uso dos aquecedores descartáveis da mão para aquecer o ensaio de AIOD-CRISPR elimina a necessidade para o equipamento elétrico caro, permitindo o ponto instrumento-livre de diagnósticos moleculars do cuidado de COVID-19”

Changchun Liu, professor adjunto

A publicação co-foi sida o autor por pesquisadores pos-doctoral Xiong Ding e Kun Yin; Aluno de doutoramento Ziyue Li; professor e vice-decano para o Dr. Rajesh Lalla da pesquisa; Dr. Enrique Ballesteros, professor adjunto e cadeira, patologia e medicina do laboratório; e Dr. Maroun Sfeir, professor adjunto na patologia e na medicina do laboratório.

O teste da amplificação do ácido nucleico (PCR/RT-PCR) é actualmente o método o mais sensível e o mais específico para a detecção atempada de micróbios patogénicos, mas não é apropriado para diagnósticos rápidos do ponto--cuidado devido à necessidade para o equipamento de laboratório especializado e técnicos treinados. Os micróbios patogénicos altamente contagiosos, contudo, precisam a monitoração de tempo real de impedir espalhar de pessoal.

No estudo, Liu e sua equipe avaliaram seu método de AIOD-CRISPR usando o extracto do RNA de 28 amostras clínicas do cotonete COVID-19, que incluíram oito amostras do positivo COVID-19. Para assegurar a confiança da detecção, cada amostra foi testada duas vezes em duas experimentações independentes. Todos os oito das amostras COVID-19 positivas foram identificadas como o positivo em 40 minutos, que foi confirmado igualmente pela detecção visual. Os resultados eram igualmente consistentes com os aqueles do método CDC-aprovado de RT-PCR.

Os pesquisadores igualmente usaram um aquecedor barato da mão como uma incubadora para detectar as amostras pacientes para eliminar a necessidade para uma incubadora elétrica. As câmaras de ar de AIOD-CRISPR foram colocadas directamente em um aquecedor ar-ativado da mão, e os resultados eram visíveis pelo olho nu sob a luz do diodo emissor de luz. Duas amostras COVID-19 positivas incubadas no saco do aquecedor da mão visualmente foram detectadas e identificaram como o positivo em 20 minutos.

“Tal plataforma simples, portátil e sensível da detecção tem o potencial fornecer o rapid e diagnósticos adiantados de COVID-19 e de outras doenças infecciosas em casa, no escritório do doutor, e mesmo movimentação-através de locais de teste,” diz Liu.

Source:
Journal reference:

Ding, X., et al. (2020) Ultrasensitive and visual detection of SARS-CoV-2 using all-in-one dual CRISPR-Cas12a assay. Nature Communications. doi.org/10.1038/s41467-020-18575-6.