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Los investigadores de UConn validan viabilidad clínica de la plataforma CRISPR-basada para la prueba COVID-19

En marzo, investigadores en el departamento de la ingeniería biomédica-- un departamento compartido en las escuelas del remedio dental, del remedio, y de la ingeniería--comenzó a desarrollar una nueva, barata, CRISPR-basada plataforma diagnóstica para descubrir enfermedades infecciosas, incluyendo virus del VIH, el coronavirus nuevo (SARS-CoV-2). Hoy, el método es un paso más cercano a ser una tecnología punta de los diagnósticos para la detección rápida de enfermedades infecciosas.

Lleve por el profesor adjunto Changchun Liu, el método de “CRISPR-Cas12a Todo-En-Uno-Doble” (AIOD-CRISPR) habilita la detección simple, rápida, ultrasensible, visual de SARS-CoV-2, prevista para el uso en casa o en pequeñas clínicas.

En un papel publicado en comunicaciones de la naturaleza, los investigadores validaron la viabilidad clínica de la plataforma usando muestras clínicas del lampazo COVID-19. Además, los investigadores utilizaron un calentador barato de la mano como incubadora para descubrir resultados clínicos de la muestra en el plazo de 20 minutos.

El uso de los calentadores disponibles de la mano para calentar el análisis de AIOD-CRISPR elimina la necesidad del equipo eléctrico costoso, habilitando el punto instrumento-libre de los diagnósticos moleculares del cuidado de COVID-19”

Changchun Liu, profesor adjunto

La publicación co-fue sida autor por el tilín y Kun Yin de Xiong de los investigadores postdoctorales; Estudiante Ziyue Li del doctorado; profesor y decano adjunto para el Dr. Rajesh Lalla de la investigación; El Dr. Enrique Ballesteros, profesor adjunto y silla, patología y remedio del laboratorio; y el Dr. Maroun Sfeir, profesor adjunto en patología y remedio del laboratorio.

La prueba de la amplificación del ácido nucléico (PCR/RT-PCR) es actualmente el método más sensible y más específico para la detección temprana de patógeno, pero no es conveniente para los diagnósticos rápidos del punto-de-cuidado debido a la necesidad del equipo de laboratorio especializado y de técnicos entrenados. Los patógeno altamente contagiosos, sin embargo, necesitan la supervisión en tiempo real evitar el extenderse de personal.

En el estudio, Liu y sus personas evaluaron su método de AIOD-CRISPR usando el extracto del ARN de 28 muestras clínicas del lampazo COVID-19, que incluyeron ocho muestras del positivo COVID-19. Para asegurar la confiabilidad de la detección, cada muestra fue probada dos veces en dos juicios independientes. Los ocho de las muestras positivas COVID-19 fueron determinados como positivo en 40 minutos, que también fue confirmado por la detección visual. Los resultados eran también constantes con los del método CDC-aprobado de RT-PCR.

Los investigadores también utilizaron un calentador barato de la mano como incubadora para descubrir las muestras pacientes para eliminar la necesidad de una incubadora eléctrica. Los tubos de AIOD-CRISPR fueron colocados directamente en un calentador aire-activado de la mano, y los resultados eran visibles por el aro descubierto bajo luz del LED. Dos muestras positivas COVID-19 incubadas en el bolso del calentador de la mano fueron descubiertas y determinaron visualmente como positivo en 20 minutos.

“Tal plataforma simple, portátil y sensible de la detección tiene el potencial de ofrecer rapid y los diagnósticos tempranos de COVID-19 y de otras enfermedades infecciosas en casa, en la oficina del doctor, e incluso en impulsión-por los sitios de prueba,” dice a Liu.

Source:
Journal reference:

Ding, X., et al. (2020) Ultrasensitive and visual detection of SARS-CoV-2 using all-in-one dual CRISPR-Cas12a assay. Nature Communications. doi.org/10.1038/s41467-020-18575-6.