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Rapid, test bon marché pour la surveillance potentielle de l'universel COVID-19

Une équipe de recherche internationale a présenté un test pratique et bon marché de sérologie de trouver des anticorps contre les coronavirus 2 (SARS-CoV-2) de syndrôme respiratoire aigu sévère qui pourraient potentiellement être rendus procurables universellement.  

SARS-CoV-2 est l'agent responsable de la pandémie actuelle de la maladie 2019 de coronavirus (COVID-19) qui continue à menacer la santé publique globale et l'économie.

Alain Townsend (université d'Oxford) et collègues enregistrent que la réaction d'hémagglutination (CHAPEAU) trouve des anticorps contre le domaine récepteur-grippant (RBD) de la protéine de la pointe SARS-CoV-2 avec une sensibilité de 90% et la spécificité de 99%.

Le RBD est un sous-domaine trouvé au bout de la protéine de pointe - la structure principale que le virus emploie pour gripper à et pour présenter les cellules hôte humaines.

Le CHAPEAU peut trouver des titres en hausse des anticorps de RBD-détail moins de les cinq premiers jours de l'infection, corrélations bien avec un test commercial déterminé, et peut être appliqué dans le contrôle (POC) de remarque-de-soins.

Ce test polyvalent et rentable n'exige pas le matériel de spécialiste ou les installations centralisées de laboratoire et pourrait être rendu procurable aux pays de revenu inférieur et moyen.

En outre, le test peut être lyophilisé pour la facilité de l'expédition, indique Townsend et collègues, qui ont maintenant la production renforcée de ce réactif à un gramme assez - pour fournir dix millions de tests, à un coût d'environ 0,27 pences du R-U selon le test bien.

Les « parties aliquotes de ce réactif sont prêtes à être fournies aux groupes qualifiés n'importe où dans le monde qui doivent trouver des anticorps à SARS-CoV-2, mais n'ont pas les installations pour les tests commerciaux de haut-débit, » écrit l'équipe.

Une version de prétirage du papier est procurable dans le medRxiv* de serveur, alors que l'article subit l'inspection professionnelle.

Réaction d
Réaction d'hémagglutination (CHAPEAU) pour le dépistage des anticorps au domaine obligatoire du récepteur SARS-CoV-2. A) Concept de la séquence du CHAPEAU B) de VHH (IH4) - protéine de fusion de RBD. Des résidus soulignés sont codés en copiant des sites AgeI (TG) et SalI (AST). La séquence d'ADNc optimisée par codon est montrée en gel du renseignement supplémentaire C) SDS-PAGE de VHH épuré (IH4) - protéines de RBD. Trois micrographies de protéine ont été faites fonctionner sur BRI-Tris du boulon 4-12% sous réduire des conditions. 1 : IH4-RBD a produit dans la maison en cellules d'Expi293F, 2 : IH4-RBD a produit par l'anticorps absolu, Oxford en cellules HEK293.

Des tests abordables de sérologie sont eus un besoin urgent

Depuis que les premiers cas de SARS-CoV-2 ont été recensés à Wuhan, Chine, tard l'année dernière, le virus a écarté à un régime sans précédent et a exercé un effet dévastateur sur la santé publique globale et l'économie mondiale.

« L'apparence d'un virus hautement contagieux si neuf ne sera probablement pas un seul cas pendant les décennies en avant, » a dit Townsend et collègues. « Un de l'expérience acquise est l'importance de développer les sérodiagnostics abordables pour le dépistage des réactions immunitaires à SARS-CoV-2. »

De tels tests sont essentiels pour déterminer des régimes de séroconversion dans les populations, trouvant la séroconversion après la vaccination, et pour évaluer si les taux d'anticorps peuvent être protecteurs contre COVID-19.

Plusieurs tests commerciaux performants d'anticorps ont été décrits, mais ils ne sont pas largement - procurables aux pays de revenu inférieur et moyen, puisqu'ils exigent les installations centralisées coûteuses de laboratoire.

Tests d'agglutination de cellules rouges, qu'en concernant le lien d'une molécule de journaliste à la surface des cellules rouges, ayez une longue et distinguée histoire dans taper de sang et une grande variété d'applications de sérologie. Elles sont peu coûteuses, et leur application n'exige pas la technologie de spécialiste.

En outre, « pendant l'ère récente, le lien d'un antigène à la surface de cellules rouges est devenu plus facile avec la possibilité de protéger par fusible une séquence d'antigène de protéine avec cela d'un anticorps unique de domaine ou détail nanobody pour une molécule sur la surface de cellules rouges, » dit l'équipe.

Que les chercheurs ont-ils fait ?

Les chercheurs ont appliqué ce concept pour fournir un test pratique de CHAPEAU pour le dépistage des anticorps de RBD-détail de la pointe SARS-CoV-2.

Afin de lier la pointe RBD aux hématies, les chercheurs avaient l'habitude l'IH4 nanobody, qui est spécifique pour un épitope économisé sur le glycophorin A. de protéine de transmembrane.

L'équipe enregistre que dans une évaluation formelle de sensibilité et de spécificité, le CHAPEAU a expliqué une sensibilité de 90% et la spécificité de 99% pour le dépistage des anticorps après un diagnostic ACP-confirmé de l'infection SARS-CoV-2.

Le CHAPEAU a bien marqué avec le test disponible dans le commerce de chimiluminescence de Siemens Atellica qui trouve des anticorps de RBD-détail de pointe.

Intéressant, dit l'équipe, les performances supérieures légèrement expliquées par titrations de CHAPEAU au-dessus du test de Siemens quand elle a été appliquée aux échantillons enregistrés de plasma prélevés à partir des donneurs moins de les cinq premiers jours de leur admission au hôpital.

Dans ce scénario, le CHAPEAU a trouvé des anticorps dans 86% d'échantillons provenant des donneurs ACP-diagnostiqués, alors que le test de Siemens trouvait 74%.  Le CHAPEAU a également expliqué la spécificité 100% une fois appliqué aux échantillons de plasma de contrôle prélevés à partir des patients en bonne santé ou de ceux avec la sepsie.

« Dans les situations de la suspicion clinique élevée, le CHAPEAU a pu potentiellement avoir une place comme test utile pour supporter le diagnostic de COVID-19 en trouvant un titre en hausse des anticorps au RBD pendant l'admission au hôpital, » écrivent les chercheurs.

Le CHAPEAU pourrait également être utile pour trouver la séroconversion après la vaccination et pour l'identification des donneurs convalescents potentiels avec le plasma élevé de titre qui pourrait potentiellement être employé comme demande de règlement.  

Assez de réactif pour 10 millions de tests est procurable au monde

L'équipe dit également que le réactif lyophilisé d'IH4-RBF qui a été envoyé à New Delhi s'est comporté bien dans le contrôle de POC des échantillons de doigt-piqûre. Cependant, davantage de preuve est nécessaire pour confirmer que la sensibilité et la spécificité sont comparables à ceux vues avec des tests des échantillons enregistrés de plasma.

« Ceci devra être fait en conditions naturelles, qui planification, » écrivent Townsend et collègues.

En conclusion, l'équipe dit : « Nous avons produit un gramme du réactif se développant d'IH4-507 RBD assez (pour dix millions de puits de test) et offrons aux parties aliquotes lyophilisées par bateau de ce matériau (suffisamment pour 10.000 tests) n'importe où dans le monde, gratuit, pour l'usage comme réactif de recherches pour des études sérologiques de COVID-19. »

Avis *Important

le medRxiv publie les états scientifiques préliminaires qui pair-ne sont pas observés et ne devraient pas, en conséquence, être considérés comme concluants, guident la pratique clinique/comportement relatif à la santé, ou traité en tant qu'information déterminée.

Journal reference:
Sally Robertson

Written by

Sally Robertson

Sally first developed an interest in medical communications when she took on the role of Journal Development Editor for BioMed Central (BMC), after having graduated with a degree in biomedical science from Greenwich University.

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