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Prueba rápida, barata para la supervisión potencial del universal COVID-19

Las personas internacionales de investigadores han presentado una prueba conveniente, barata de la serología descubrir los anticuerpos contra el coronavirus 2 (SARS-CoV-2) de la neumonía asiática que se podría potencialmente hacer disponible universal.  

SARS-CoV-2 es el agente responsable del pandémico actual de la enfermedad 2019 del coronavirus (COVID-19) que continúa amenazar a salud pública global y a la economía.

Alain Townsend (universidad de Oxford) y colegas denuncia que la prueba de hemoaglutinación (SOMBRERO) descubre los anticuerpos contra el dominio receptor-obligatorio (RBD) de la proteína del pico SARS-CoV-2 con una sensibilidad del 90% y la especificidad del 99%.

El RBD es un subdomain encontrado en el extremo de la proteína del pico - la estructura principal que el virus utiliza para atar a y para incorporar las células huesped humanas.

El SOMBRERO puede descubrir títulos de levantamiento de anticuerpos RBD-específicos en el plazo de los primeros cinco días de infección, correlativos bien con una prueba comercial establecida, y se puede aplicar en la prueba (POC) del punto-de-cuidado.

Esta prueba versátil, de poco costo no requiere el equipo del especialista o instalaciones centralizadas del laboratorio y se podría poner a disposición los países inferiores y con ingresos medios.

Además, la prueba se puede liofilizar para la facilidad del envío, dice Townsend y a los colegas, que ahora tienen producción ampliada de este reactivo a un gramo - bastante para ofrecer diez millones de pruebas, en un costo de alrededor 0,27 peniques BRITÁNICOS por prueba bien.

Las “partes alícuotas de este reactivo están listas para ser proveído a los grupos calificados dondequiera en el mundo que necesitan descubrir los anticuerpos a SARS-CoV-2, pero no tienen las instalaciones para las pruebas comerciales de la alto-producción,” escriben a las personas.

Una versión de la prueba preliminar del papel está disponible en el medRxiv* del servidor, mientras que el artículo experimenta la revisión paritaria.

Prueba de hemoaglutinación (SOMBRERO) para la detección de anticuerpos al dominio obligatorio del receptor SARS-CoV-2. A) Concepto de la serie del SOMBRERO B) de VHH (IH4) - proteína de la fusión de RBD. Los residuos subrayados son codificados reproduciendo los sitios AgeI (TG) y SalI. La serie optimizada codón del cDNA se muestra en el gel de VHH purificado (IH4) - proteínas de la información suplementaria C) SDS-PAGE de RBD. Tres microgramos de proteína fueron funcionados con en el Bis-Tris del tornillo 4-12% bajo reducir condiciones. 1: IH4-RBD produjo en casa en las células de Expi293F, 2: IH4-RBD produjo por el anticuerpo absoluto, Oxford en las células HEK293.
Prueba de hemoaglutinación (SOMBRERO) para la detección de anticuerpos al dominio obligatorio del receptor SARS-CoV-2. A) Concepto de la serie del SOMBRERO B) de VHH (IH4) - proteína de la fusión de RBD. Los residuos subrayados son codificados reproduciendo los sitios AgeI (TG) y SalI (AST). La serie optimizada codón del cDNA se muestra en el gel de VHH purificado (IH4) - proteínas de la información suplementaria C) SDS-PAGE de RBD. Tres microgramos de proteína fueron funcionados con en el Bis-Tris del tornillo 4-12% bajo reducir condiciones. 1: IH4-RBD produjo en casa en las células de Expi293F, 2: IH4-RBD produjo por el anticuerpo absoluto, Oxford en las células HEK293.

Las pruebas asequibles de la serología se necesitan urgente

Desde que los primeros casos de SARS-CoV-2 fueron determinados en Wuhan, China, tarde el año pasado, el virus se ha extendido a un régimen sin precedente y tenía un efecto devastador sobre salud pública global y la economía mundial.

“El aspecto de un tan nuevo virus altamente contagioso no será probablemente un acontecimiento único en las décadas delante,” dijo Townsend y a colegas. “Una de las lecciones doctas es la importancia de desarrollar las pruebas serológicas asequibles para la detección de inmunorespuestas a SARS-CoV-2.”

Tales pruebas son cruciales para determinar regímenes de la seroconversión en poblaciones, descubriendo la seroconversión después de la vacunación, y para fijar si los niveles del anticuerpo pueden ser protectores contra COVID-19.

Se han descrito varias pruebas comerciales de alto rendimiento del anticuerpo, pero no están extensamente - disponibles para los países inferiores y con ingresos medios, puesto que requieren instalaciones centralizadas costosas del laboratorio.

Pruebas de aglutinación del glóbulo rojo, que implicando la articulación de una molécula del reportero a la superficie de glóbulos rojos, tenga una historia larga y distinguida en pulsar de sangre y una amplia variedad de usos de la serología. Son baratos, y su uso no requiere tecnología del especialista.

Además, “en la era reciente, la articulación de un antígeno a la superficie del glóbulo rojo ha llegado a ser más fácil con la posibilidad de fundir una serie del antígeno de la proteína con el de un único anticuerpo del dominio o específico nanobody para una molécula en la superficie del glóbulo rojo,” dice a las personas.

¿Qué los investigadores hicieron?

Los investigadores han aplicado este concepto para ofrecer una prueba conveniente del SOMBRERO para la detección de los anticuerpos RBD-específicos del pico SARS-CoV-2.

Para conectar el pico RBD a los glóbulos rojos, los investigadores utilizaron el IH4 nanobody, que es específico para un epitopo conservado en el glycophorin A. de la proteína de la transmembrana.

Las personas denuncian que en una evaluación formal de la sensibilidad y de la especificidad, el SOMBRERO demostró una sensibilidad del 90% y la especificidad del 99% para la detección de anticuerpos después de una diagnosis Polimerización en cadena-confirmada de la infección SARS-CoV-2.

El SOMBRERO correlacionó bien con la prueba disponible en el comercio de la quimioluminescencia de Siemens Atellica que descubre los anticuerpos RBD-específicos del pico.

Interesante, dice las personas, el rendimiento superior ligeramente demostrado las titulaciones del SOMBRERO sobre la prueba de Siemens cuando fueron aplicadas a las muestras salvadas del plasma recogidas de donantes en el plazo de los primeros cinco días de su admisión de hospital.

En este decorado, el SOMBRERO descubrió los anticuerpos en el 86% de muestras de donantes Polimerización en cadena-diagnosticados, mientras que la prueba de Siemens descubrió el 74%.  El SOMBRERO también demostró la especificidad 100% cuando estaba aplicado a las muestras del plasma del mando recogidas de pacientes sanos o de ésos con sepsia.

“En situaciones de la alta sospecha clínica, el SOMBRERO podía potencialmente tener un lugar como prueba útil para soportar la diagnosis de COVID-19 descubriendo un título de levantamiento de anticuerpos al RBD durante la admisión de hospital,” escribe a los investigadores.

El SOMBRERO pudo también ser útil para descubrir la seroconversión después de la vacunación y para la identificación de donantes convalecientes potenciales con la alta plasma del título que se podría potencialmente utilizar como tratamiento.  

Suficiente reactivo para 10 millones de pruebas está disponible para el mundo

Las personas también dicen que el reactivo liofilizado de IH4-RBF que fue enviado a Nueva Deli se realizó bien en la prueba del PC de las muestras del dedo-pinchazo. Sin embargo, otras pruebas son necesarias confirmar que la sensibilidad y la especificidad son comparables a ésas consideradas con las pruebas de las muestras salvadas del plasma.

“El necesitará ser hecho en condiciones de campo, se proyecta que,” escribe Townsend y a colegas.

Finalmente, las personas dicen: “Hemos producido un gramo del reactivo de IH4-507 que se convertía RBD (bastante para diez millones de pozos de la prueba) y ofrecemos a las partes alícuotas liofilizadas nave de este material (suficiente para 10.000 pruebas) dondequiera en el mundo, gratuitamente, para el uso como reactivo de la investigación para los estudios serológicos de COVID-19.”

Advertencia *Important

el medRxiv publica los partes científicos preliminares que par-no se revisan y, por lo tanto, no se deben mirar como concluyentes, conduce práctica clínica/comportamiento relativo a la salud, o tratado como información establecida.

Journal reference:
Sally Robertson

Written by

Sally Robertson

Sally first developed an interest in medical communications when she took on the role of Journal Development Editor for BioMed Central (BMC), after having graduated with a degree in biomedical science from Greenwich University.

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