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El método iscan de las demostraciones del estudio podía ser efectivo para la prueba rápida COVID-19

Un estuche simple de la prueba COVID-19 combina la amplificación del virus con un sistema de CRISPR-CAS para la detección efectiva SARS-CoV-2. El estuche, llamado iSCAN, utiliza los reactivos que pueden localmente ser fabricados.

Nuestro procedimiento entero del iSCAN se puede terminar en menos que una hora y se puede adoptar fácilmente como sistema de detección del punto-de-cuidado en los aeropuertos y las bandas.”

Ahmed Mahas, estudiante del doctorado, rey Abdullah University de la ciencia y de la tecnología

El patrón oro actual en la prueba SARS-CoV-2 es la prueba de la polimerización en cadena, en la cual las pinturas de fondo de la DNA reconocen las series específicas del ARN en el genoma viral que entonces se copian usando una enzima específica.

Este proceso de la “amplificación” hace más fácil descubrir originalmente las pequeñas cantidades de ARN viral presentes en los lampazos nasofaríngeos tomados de pacientes.

Esta prueba puede descubrir seguro si una persona tiene realmente el virus sin ofrecer demasiado positivo falso o resultados negativos. Pero necesita personales altamente expertos conducto la prueba, que se hace en pasos múltiples en laboratorios centrales con el equipo sofisticado.

el iSCAN, desarrollado por personas llevadas por el bioengineer Magdy Mahfouz de KAUST vence muchas de las desventajas de la prueba de la polimerización en cadena mientras que ofrece resultados relativamente dignos de confianza.

Importante, los reactivos de la prueba eran manufacturados en KAUST. Esto incluye las enzimas necesarias para la amplificación y otra enzima que descubra específicamente series virales dentro del material copiado. La disponibilidad de reactivos y del equipo ha sido un obstáculo enorme desde el comienzo del pandémico COVID-19.

Para utilizar el iSCAN, los contenidos de la muestra de un paciente, cerco con un lampazo nasofaríngeo, se ponen en un pequeño tubo de ensayo que contiene las pinturas de fondo y las enzimas de la DNA que pueden amplificar el material genético SARS-CoV-2. Los contenidos se incuban en una temperatura de 62 grados de cent3igrado para la media hora. Este proceso se refiere como RT-LAMP.

Una vez que se amplifica suficiente ARN viral, una gotita que contiene la enzima Cas12 se agrega a la mezcla y se fue por otros 15 minutos. Esta enzima reconoce solamente el ARN viral que pertenece a SARS-CoV-2, venciendo una entrega con RT-LAMP, donde la amplificación y la contaminación cruzada falsas pueden ser un problema.

Finalmente, uno de dos métodos se puede utilizar para visualizar el resultado. Uno implica la luz ultravioleta brillante en la muestra, con un detector analizando la luz que sale de él denunciar la cantidad de ARN viral.

La otra aproximación implica el insertar de tiras especialmente diseñadas en los tubos, similares a ésos usados en pruebas de embarazo. Ambas aproximaciones trabajan bien, aunque el método de la luz ultravioleta ofreciera resultados más exactos.

Los científicos probaron su estuche en el ARN viral sintetizado y en muestras pacientes reales. “Somos ahora que perfeccionan y simplificando nuestro sistema para los utilizadores para comercializar nuestro estuche de la detección del iSCAN,” dice al científico Zahir Ali de la investigación de KAUST.

Source:
Journal reference:

Ali, Z., et al. (2020) iSCAN: An RT-LAMP-coupled CRISPR-Cas12 module for rapid, sensitive detection of SARS-CoV-2. Virus Research. doi.org/10.1016/j.virusres.2020.198129.