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La mutation de SARS-CoV-2 D614G n'affecte pas le rendement des analyses sérologiques

Dans une étude neuve publiée dans le tourillon des maladies infectieuses, les chercheurs des USA ont considéré l'émergence d'une variante neuve de protéine de la pointe SARS-CoV-2. Ils analyse comparée de la pointe G614-based à l'analyse originelle de D614-based - se dirigeant vers le développement de l'immunité humorale reconnaissable et croix-sensible.

La nécessité de comprendre la pandémie de la maladie de coronavirus (COVID-19) provoquée par le SARS-CoV-2 a tourné notre oeil vers l'acquisition et le développement de l'immunité de population. Nous savons que le système immunitaire humain répond à l'infection SARS-CoV-2 avec une pléthore d'effecteurs cellulaires et humoraux - comprenant des anticorps produits par des cellules de B.

Et en effet, les anticorps développés contre SARS-CoV-2 peuvent identifier les protéines SARS-CoV-2 multiples, qui comprennent le nucleocapsid, l'enveloppe, et les protéines de pointe. Cependant, ces anticorps peuvent ne pas assurer la protection adéquate si les mutations virales surgissent.

On lui a récent montré que la séquence originelle de génome de protéine de pointe a été erimée par un acide aminé modifié à la position 614, c.-à-d., de D614 à G614. Cette tension G614 émergente est plus infectieuse en nature ; par conséquent, il y a préoccupation véritable si l'exposition à une variante d'un virus aura comme conséquence la mémoire croix-réactive à la deuxième.

Dans cette étude récent publiée, un groupe de chercheurs des USA aboutis par M. Carleen Klumpp-Thomas à partir du centre national pour avancer les sciences de translation des instituts de la santé nationaux à Rockville (le Maryland) a produit d'un plein élément d'ectodomain de la pointe G614 et a intégré cette protéine comme antigène dans l'analyse enzyme-jointe de l'immunosorbent (ELISA).

Approche méthodologique

Afin d'évaluer la capacité des anticorps montés pendant l'infection SARS-CoV-2 pour réagir contre les deux variantes de la protéine de pointe (c.-à-d., D614 et G614), les chercheurs ont mesuré la réactivité sérologique à l'aide de l'ELISA pour le dépistage de l'IgG, de l'IgM, et de l'IgA grippant pour clouer complètement des trimères d'ectodomain.

Dans ce but, des trimères solubles de pointe ont été produits avec une séquence protéique qui était fondamentalement identique à la variante originelle de pointe, excepté l'ajout de la mutation mentionnée ci-dessus de D614G.

D'ailleurs, des éléments d'ADN ont été synthétisés avec des gènes optimisés pour l'expression en cellules humaines et subcloned supplémentaire dans un vecteur mammifère d'expression de puissance élevée. Des protéines ont été exprimées en cellules Expi293 (qui sont dominant employées pour leur expression) et épuré.

Un total de 88 échantillons provenant des donneurs convalescents dans une communauté de forte incidence ont été vérifiés, avec 100 contrôles négatifs pré-universels, et alors comparé aux caractéristiques précédemment publiées pour le D614 originel clouez la protéine.

Gripper à l'un ou l'autre de variante de pointe non modifiée par une mutation

Les échantillons de sérum des donneurs qui ont vérifié le positif pour des anticorps d'anti-pointe quand la pointe D614 a été employée également ont vérifié le positif utilisant la pointe G614 pour des anticorps d'IgG, d'IgM, et d'IgA. Une corrélation positive quand toutes les sous-classes d'anticorps ont été évaluées et tous les donneurs avec une réaction positive aux anticorps D614 ont également montré la réactivité intense à la pointe G614.

En poursuivant une analyse linéaire et de corrélation, les chercheurs ont trouvé une forte corrélation et un bon ajustement entre les deux variantes. Il y avait un rapport d'intensité de signe de 1:1 selon la pente de la ligne de régression.

Quand le rendement de test a été concerné, les deux protéines ont été montrées pour épurer assimilé, sans différence dans le comportement de protéine en chromatographie analytique d'exclusion de taille. Ce dernier signifie que les deux protéines ont de façon analogue formé les structures trimeric prévues.

Réaction des anticorps polyclonale

Ces caractéristiques impliquent clairement que l'utilisation du plein élément de protéine de pointe ne devrait pas affecter le rendement seroassay ou « manquez » les échantillons qui sont séropositifs. D'ailleurs, il peut conclure que la réaction des anticorps humaine à SARS-CoV-2 peut être identifiée utilisant la protéine de la pointe D614 ou G614 dans les méthodes ELISA.

« Le fait que D614 et G614 les deux séropositivité obtenue est peut-être prévu, vu que la réaction immunitaire humaine est polyclonale », indiquent des auteurs d'étude.

« Tandis qu'il peut y avoir des anticorps produits qui identifient des épitopes de protéine de pointe spécifiques pour D614 ou G614, ceux-ci seraient parmi les nombreux anticorps identifiant la protéine de la pointe SARS-CoV-2 utilisée dans notre seroassay », elles ajoutent.

En tous cas, les efforts en profondeur complémentaires de recherches sur ce sujet devraient évaluer différents clones cellulaires et réactions immunitaires de B dans la corrélation avec l'ordonnancement de génome viral. Ceci peut avoir comme conséquence des découvertes profondes dans notre compréhension de biologie de la maladie et de développement de demande de règlement.

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Dr. Tomislav Meštrović

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Dr. Tomislav Meštrović

Dr. Tomislav Meštrović is a medical doctor (MD) with a Ph.D. in biomedical and health sciences, specialist in the field of clinical microbiology, and an Assistant Professor at Croatia's youngest university - University North. In addition to his interest in clinical, research and lecturing activities, his immense passion for medical writing and scientific communication goes back to his student days. He enjoys contributing back to the community. In his spare time, Tomislav is a movie buff and an avid traveler.

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