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Detectando as seqüências SARS-CoV-2 em monocytes do sangue

Uma reunião com os doutores de Wuhan apresentou uma observação de obrigação ao professor Laura Manuelidis, DM, da Faculdade de Medicina de Yale cedo em 2020. Uma característica impressionante em uma corrediça apresentada pelos doutores forneceu o ímpeto a pesquisa interessante: a patologia da pneumonia intersticial foi dominada por muitas grandes pilhas que eram as mais consistentes com uma linhagem mielóide.

Um gel do agarose 2,5% que mostra produtos de RT/qPCR

Um gel do agarose 2,5% que mostra produtos de RT/qPCR. Crédito de imagem: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2020.12.16.423113v1.full.pdf

Sua equipe decidida encontrar se a infecção do coronavirus 2 da Síndrome Respiratória Aguda Grave (SARS-COV-2) das pilhas Mononuclear do sangue periférico (PBMC) ocorre e talvez poderia ser uma fonte do multi-órgão espalhado no corpo humano. Os vírus são sabidos para liberar partículas virais livres na circulação sanguínea ou no curso dentro dos glóbulos brancos no anfitrião. Muitos vírus contaminam PBMC que pode ser um reservatório para a persistência.

Pôde ser possível que as pilhas mielóides contaminadas SARS-CoV-2 da migração pegam a residência dentro e perpetuam a infecção e a patologia crônica no cérebro e em outros órgãos. A pandemia COVID-19 causada pelo SARS-CoV-2 tem as patologias cada vez mais apresentadas do cérebro e do coração (de que era predizível).

A infecção do cargo COVID-19, as complicações neurológicas, e a neuropatologia são relatadas, por exemplo, thromboemboli, infarto, as mudanças radiológicas consistentes com a encefalite auto-imune, e mesmo a presença de SARS-CoV-2 nos neurônios. Pouco é sabido sobre os efeitos SARS-CoV-2 imunológicos virais ou atrasados imediatos potenciais no cérebro.

O prof. Laura Manuelidis e sua equipe da evidência da mostra da Faculdade de Medicina de Yale do nucleocapsid SARS-CoV-2 nas pilhas mononuclear do sangue periférico (PBMC) em um bioRxiv* recente pré-imprime a publicação. Encontraram sobre 300nt do RNA do nucleocapsid SARS-CoV-2 em PBMC - indicar estas pilhas pode ser uma canalização para a propagação do vírus, ou elementos virais, a outros órgãos.

Os pesquisadores analisaram primeiramente uma seqüência curto padrão (NC) do nucleocapsid 72bp do SARS-CoV-2. As proteínas do NC protegem o genoma viral. Conseqüentemente, analisaram mais (301nt) uns estiramentos adjacentes mais longos do NC por RNA/qPCR.

A coorte do estudo incluiu 7 masculinos e 7 pacientes fêmeas que variam de 24-82 anos e do controle 4 uninfected aleatório oferecem-se. PBMCs destes 14 pacientes foi tomado 2-6 dias depois que admissão de hospital com um teste positivo do cotonete COVID-19.

Neste estudo, os pacientes foram provados somente em um único ponto na doença. Devido a isto, somente 20% dos pacientes eram positivos.

Em 2 pacientes PBMC (mas não nos controles uninfected), encontraram umas seqüências mais longas do NC. Estes eram positivos a partir de 2-6 dias após a admissão de hospital. Validaram a presença de um NC mais longo arranjando em seqüência.

Coronaviruses é complexo e pode induzir as respostas auto-imunes que danificam o cérebro e outros órgãos. Sabe-se que os coronaviruses respiratórios, antes da tensão SARS-CoV-2 que causa frios humanos, são neuroinvasive. Seu RNA viral é encontrado no parênquima do cérebro assim como no microglia mielóide na cultura.

As mortes súbitas que ocorrem rara das infecções “virais” uncharacterized do inverno na autópsia rotineira mostram que lymphocytic agudo e mielóide clássicos infiltram em um coração de outra maneira normal. Alguma destes pôde ser devido a uma tensão do coronavirus. O colapso recente de atletas novos saudáveis pode ser causado pela disseminação de SARS-CoV-2 PBMC que conduz ao microthrombi vascular no coração e no cérebro.

Independentemente da propagação olfactivo neural, os pesquisadores suspeitaram o papel de um subconjunto de monocytes do sangue na canalização de SARS-CoV-2 no cérebro com revelação subseqüente de sintomas neuropsiquiátricos.

O pesquisador emitido um parecer sobre a metodologia usada - um NC mais quantitativo RT/qPCR Cts deve começar com > 5e7 PBMC pelo indivíduo. Explicam que este número de PBMC permite a classificação dos subconjuntos de PBMC que concentram SARS-CoV-2sequences.

Os pesquisadores justificam assim avaliações temporais em fases diferentes da exposição SARS-CoV-2; estes podem ser usados diagnòstica.

A equipe suspeita que um tipo mielóide de circulação da pilha leva provavelmente as seqüências virais, especialmente porque estas pilhas pegam a residência nos tecidos e actuam como uma fonte lactente para a infecção e/ou a estimulação imune crônica. É importante identificar os subtipos positivos da pilha e ver igualmente se estas pilhas levam o vírus infeccioso.

Este estudo é importante em fixar para baixo um anticorpo e outras estratégias novas para impedir igualmente o progressista espalham a outros órgãos. A pesquisa no nível seguinte neste estudo para identificar o subtipo positivo da pilha igualmente facilitará as aproximações terapêuticas que visam especificamente estas pilhas para impedir a disseminação adiantada de SARS-CoV-2, na parte ou inteiro, a outros órgãos, os pesquisadores escrevem.

A presença do RNA do nucleocapsid SARS-CoV-2, especialmente em migrar pilhas mielóides, pôde explicar algumas das observações patológicas encontradas em outros órgãos tais como o cérebro, o coração, e os pulmões - como foi observado por esta equipe no caso apresentado de Wuhan.

Observação *Important

o bioRxiv publica os relatórios científicos preliminares que par-não são revistos e, não devem conseqüentemente ser considerados como conclusivos, guia a prática clínica/comportamento saúde-relacionado, ou tratado como a informação estabelecida.

Journal reference:
  • Detection of long SARS-CoV-2 nucleocapsid sequences in peripheral blood monocytes collected soon after hospital admission Nathan Pagano, Maudry Laurent-Rolle, Jack Chun-Chieh Hsu, the Yale IMPACT research team, Chantal BF Vogels, Nathan D Grubaugh, Laura Manuelidis. bioRxiv 2020.12.16.423113; doi: https://doi.org/10.1101/2020.12.16.423113
Dr. Ramya Dwivedi

Written by

Dr. Ramya Dwivedi

Ramya has a Ph.D. in Biotechnology from the National Chemical Laboratories (CSIR-NCL), in Pune. Her work consisted of functionalizing nanoparticles with different molecules of biological interest, studying the reaction system and establishing useful applications.

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