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SARS-CoV-2 s'adapte rapidement au bouturage de culture cellulaire de Vero E6

Pendant que la pandémie de la maladie 2019 de coronavirus (COVID-19) continue à limiter les dégats en travers du globe, les scientifiques emballent pour comprendre davantage le virus et comment il infecte le fuselage. De cette façon, thérapeutique sûre et efficace et d'autres mesures préventives potentielles peuvent être développées pour maîtriser des nombres de dossiers de battement en travers du globe.

Entraîné par le coronavirus 2 (SARS-CoV-2) de syndrôme respiratoire aigu sévère, l'écart de COVID-19 a mené à l'émergence d'une variante hautement infectieuse neuve, le B.1.1.7, qui, par le transmissibility accru, a contribué aux cas de battement mondiaux. Jusqu'à présent, il y a eu presque 100 millions de cas confirmés mondial.

Les chercheurs au centre médical d'Erasmus aux Pays-Bas et à l'Université de l'Illinois au l'Urbana-Champagne aux USA ont constaté que SARS-CoV-2 s'adapte rapidement au bouturage de culture cellulaire de Vero E6 et que ceci peut être évité à l'aide des lignées cellulaires avec une voie protéase-assistée d'entrée de sérine active. L'équipe a également noté cela propageant SARS-Cov-2 sur la lignée cellulaire humaine Calu-3 de voie aérienne, qui exprime des protéases de sérine, peut aider à éviter la mutation multibasic de site de clivage (MBCs).

SARS-CoV-2 et mutation

Comme n'importe quel autre virus, le SARS-CoV-2 tend à subir une mutation, entraînant l'émergence des variantes neuves.

La mise au point du vaccin COVID-19 a débuté beaucoup de mois il y a, et quelques candidats vacciniques qui déjà reconnu pour le déroulement dans beaucoup de pays, y compris le R-U, les USA, et le Canada.

Cependant, la question de si ou non la pose neuve de variantes un danger efficacité à vaccins actuels' est encore peu claire. L'émergence soutenue des tensions neuves, le manque d'antivirals visés, et la capacité adaptative de l'exposition de virus qui davantage de recherche sur l'évolution virale de SARS-CoV-2 et ses implications sur des efforts de vaccination est essentielle.

Études de laboratoire

Les études de laboratoire SARS-CoV-2 préparent le terrain pour que les scientifiques explorent la structure du virus et comment elle peut affecter le fuselage. La première étape dans la plupart des études de laboratoire est bouturage in vitro de virus pour obtenir les barres hautement concentrées de virus.

En dépit des progrès récents dans les systèmes in vitro physiologique appropriés de culture cellulaire, les techniques pour propager les isolats cliniques n'ont pas changé en des virus de progéniture de produit après inoculation de ces cellules avec un spécimen contenant le virus. La lignée cellulaire la plus populaire en virologie est la lignée cellulaire de Vero, qui a été obtenue à partir du rein d'un callitriche africain.

La lignée cellulaire et ses dérivés contiennent des omissions des gènes, qui fonctionne dans la réaction antivirale d'interféron. Certaines des mutations sont en grande partie trouvées dans les lignées cellulaires transformées et ouvrent la trappe pour la réplication virale, produisant un virus élevé de titre.

Scientifiques précédemment rapportés que les SARS-CoV-2 MBCs dans la culture cellulaire ont montrés que les systèmes in vitro de bouturage peuvent parfois pour montrer des aspects importants de la durée de vie utile de virus.

Depuis des mutations influencez les résultats et pertinence des expériences de laboratoire avec SARS-CoV-2, il est impérieux de savoir pourquoi ceux-ci s'avèrent justement afin de les éviter.

Les études précédentes ont prouvé que sérine de poussée de SARS-CoV-2 MBCs entrée protéase-assistée. Les cellules de Vero E6, qui sont utilisées généralement dans le laboratoire pour élever des barres de virus, manquent de cette voie d'entrée, effectuant le virus pour employer un autre point d'entrée - les cathepsins endosomal.

L'équipe a cru que des mutations dans le MBCs pourraient être évitées en cellules avec une voie protéase-assistée d'entrée de sérine active.

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Profond-en ordonnançant l'analyse de Vero E6 passez 1 analyse de profond-ordonnancement de site multibasic de clivage de virus et de plein génome des virus de la canalisation 1-4. (a) analyse de Profond-ordonnancement VeroE6 de la barre de virus de la canalisation 1. Dans chaque graphique le logo de séquence des acides aminés du site multibasic de clivage est montré. (b) L'analyse de profond-ordonnancement de plein génome VeroE6 de la canalisation 1, 2, 3 et passent 4 virus.

L'étude

Dans l'étude, qui est apparue sur le serveur de bioRxiv* de prétirage, le déclarer de chercheurs que les méthodes de bouturage de virus emploient les lignées cellulaires transformées pour élever des virus des spécimens cliniques, effectuant quelques virus s'adaptent rapidement aux états de culture cellulaire, un procédé aidé par des taux de mutation viraux élevés.

Quand les chercheurs ont propagé SARS-CoV-2 en cellules de Vero E6, le virus a subi une mutation ou a effacé le site multibasic de clivage (MBCs) dans la protéine de pointe qui permet à la protéase de sérine de présenter les cellules humaines de voie aérienne. L'équipe a également noté cela propageant SARS-CoV-2 sur la lignée cellulaire humaine Calu-3, qui de voie aérienne exprime des protéases de sérine, mutation évitée de MBCs.

De plus, l'équipe a également prouvé que l'expression ectopique de la protéase TMPRSS2 de sérine en cellules de Vero E6 a évité des mutations de MBCs.

Quand l'équipe a employé un système organoid basé sur de culture de voie aérienne humaine pour le bouturage viral, les mêmes résultats ont sorti. Par conséquent, l'équipe recommande que d'autres études, pour développer plus de connaissances approfondies de cet endroit de biologie virale, devraient être faites pour aider à préparer des méthodes pour éviter l'adaptation de culture cellulaire.

Alternativement, un modèle organoid basé sur de culture cellulaire de la 2D voie aérienne peut être employé pour le bouturage SARS-CoV-2 si à l'avenir les variantes neuves apparaissent qui ne sont pas génétiquement niche sur les cellules Calu-3… Notre étude les montre également que le profond-ordonnancement plutôt que l'ordonnancement d'accord des barres virales est critique pour obtenir des résultats appropriés et reproductibles dans les études SARS-CoV-2, » a ajouté.

Avis *Important

le bioRxiv publie les états scientifiques préliminaires qui pair-ne sont pas observés et ne devraient pas, en conséquence, être considérés comme concluants, guident la pratique clinique/comportement relatif à la santé, ou traité en tant qu'information déterminée.

Journal reference:
Angela Betsaida B. Laguipo

Written by

Angela Betsaida B. Laguipo

Angela is a nurse by profession and a writer by heart. She graduated with honors (Cum Laude) for her Bachelor of Nursing degree at the University of Baguio, Philippines. She is currently completing her Master's Degree where she specialized in Maternal and Child Nursing and worked as a clinical instructor and educator in the School of Nursing at the University of Baguio.

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