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Os pesquisadores encontram uma maneira de melhorar a eficiência do supressão da ferramenta deedição nova

O supressão de CRISPR (CRISPR-del) é uma ferramenta deedição nova que possa suprimir ou cortar de determinadas partes de ADN em pilhas vivas com precisão cirúrgica. Isto permite que os pesquisadores estudem as funções da não-proteína diversa e deficientemente compreendida que codifica elementos do ADN - chamou às vezes “a matéria escura” de nosso genoma.

CRISPR-del é muito prático e tem muito uma vasta gama de aplicações, da investigação básica às terapias eventuais. Contudo, um obstáculo principal foi sua relativamente baixa eficiência, que limitou sua aplicação, aumentada a carga de trabalho para pesquisadores no laboratório e reduzida a sensibilidade de aplicações da selecção.

Os pesquisadores na universidade de Berna e de University College Dublin conduzida pelo professor adjunto Rory Johnson procuraram maneiras de melhorar o supressão de CRISPR. Desenvolveram um sistema novo do repórter para identificar os factores que melhoram a eficiência do supressão. A equipe usou este repórter para revelar que uma inibição farmacológica simples e barata de uma etapa no caminho do reparo do ADN (ADN-PKcs) pode significativamente impulsionar a eficiência do supressão de CRISPR.

Esta aproximação foi encontrada para trabalhar em uma variedade de instalações experimentais, especialmente nas aproximações associadas alto-produção da selecção de CRISPR para identificar os genes e os elementos que influenciam a sobrevivência e o crescimento da pilha, com importância ao cancro.

Descrevendo o significado de encontrar, o professor adjunto Rory Johnson disse; “Este é o primeiro método mostrado para melhorar a eficiência do supressão de CRISPR. É igualmente inesperado como obstruir o ADN-PKcs foi usada previamente para suprimir o supressão de CRISPR, um pouco do que promove. A introspecção chave é que retardar o processo do reparo do ADN sem o parar lhe dá completamente realmente bastante tempo para produzir o evento desejado do supressão.”

CRISPR-Cas9 foi descrito primeiramente como uma ferramenta deedição em 2012 pela igreja de George, pela Jennifer Doudna, pelo Emmanuelle Charpentier, e pelo Feng Zhang. Desde então, os pesquisadores usam este escalpelo molecular para procurarar por e remover os elementos do genoma que são envolvidos na doença. Os exemplos incluem os elementos que controlam o cancro ou outras doenças genéticas.

O potencial de CRISPR-Cas9 revelar alvos terapêuticos do cancro novo ou fornecer as aproximações da terapia genética que envolvem o supressão de elementos decausa dentro - os genomas pacientes são enorme emocionantes. Fazendo este processo mais eficiente, nós estamos avançando mais perto de realizar este potencial.”

Rory Johnson, professor adjunto, universidade de Berna e University College Dublin

Source:
Journal reference:

Bosch-Guiteras, N., et al. (2021) Enhancing CRISPR deletion via pharmacological delay of DNA-PKcs. Genome Research. doi.org/10.1101/gr.265736.120.