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Os pesquisadores avaliam o teste em grande escala substituto do serosurveillance SARS-CoV-2

Uma equipe de cientistas internacionais tem avaliado recentemente um teste de neutralização substituto do vírus para o coronavirus respiratório agudo severo 2 (SARS-CoV-2) e observado que é altamente eficaz para detectar os anticorpos anti-SARS-CoV-2 de neutralização em amostras do soro. De acordo com os cientistas, o teste pode eficazmente ser usado para o serosurveillance do população-nível e a avaliação da eficácia vacinal. O estudo está actualmente disponível no server da pré-impressão do medRxiv*.

Fundo

O 28 de fevereiro de 2021, houve 113 milhões confirmou os casos da doença 2019 do coronavirus (COVID-19), incluindo 2,5 milhão mortes, relatadas à Organização Mundial de Saúde (WHO). Contudo, diversas avaliações serological indicaram que pode haver muito mais casos COVID-19 que permaneceram undiagnosed devido à natureza assintomática da doença assim como da sensibilidade inadequada de métodos de teste. Assim, que testa o anticorpo anti-SARS-CoV-2 níveis no sangue é considerado ser mais exacto em determinar a predominância exacta de COVID-19 no nacional e nos nível regional. Além disso, o teste do anticorpo joga um papel essencial em determinar a eficácia a longo prazo das vacinas COVID-19.

Os métodos usados tipicamente para o serosurveillance, tal como ELISA, immunoassay lateral do fluxo, e immunoassay do multiplex, detectam na maior parte níveis totais de anticorpos obrigatórios no sangue e fornecem assim a informação sobre a infecção passada. Contudo, estes métodos não podiam informar sobre a presença de níveis de neutralização do anticorpo no sangue. Por outro lado, os testes de neutralização convencionais do vírus (VNTs) usados detectando anticorpos de neutralização exigem laboratórios do nível 3 da seguridade biológica e são geralmente muito laboriosos e demorados. Para superar estas dificuldades, um substituto VNT recentemente tem sido desenvolvido e introduzido no mercado por GenScript Biotech, que pode qualitativa e quantitativa detectar os anticorpos anti-SARS-CoV-2 de neutralização dentro de 2 horas em um laboratório do nível 2 da seguridade biológica.      

No estudo actual, os cientistas avaliaram a eficácia deste substituto VNT em determinar os anti anticorpos SARS-CoV-2 de neutralização nas amostras do soro recolhidas dos pacientes COVID-19. O teste é baseado no princípio de ELISA onde a capacidade de neutralização dos anticorpos é medida inibindo a interacção entre o domínio receptor-obrigatório do ponto (RBD) e o receptor deconversão da enzima 2 do anfitrião (ACE2).

Projecto do estudo

Para a análise, os cientistas recolheram 316 amostras do soro dos pacientes COVID-19 e dos trabalhadores severos hospitalizados dos cuidados médicos com o COVID-19 suave ou assintomático. Estas amostras foram recolhidas dos hospitais diferentes em Bélgica em pontos diferentes do tempo depois que o diagnóstico COVID-19 para assegurar-se de que as amostras do soro com ambos os titers do anticorpo do alto e baixo estivessem incluídas no estudo. Igualmente testaram um grupo separado de 184 amostras do soro recolhidas dos trabalhadores dos cuidados médicos da República Democrática do Congo Democrática. Estas amostras foram sugeridas para ser o positivo SARS-CoV-2 por ensaios ELISA-baseados da detecção do anticorpo.

Para avaliar a eficácia do substituto VNT, usaram um immunoassay do multiplex de Luminex e o VNT convencional como métodos de referência à tela paciente-derivou amostras do soro. A sensibilidade do substituto VNT foi calculada a níveis da inibição de 20% e de 30%, que correspondem à especificidade 98% e 100%, respectivamente.          

Observações importantes

A análise de amostras belgas revelou que a sensibilidade do substituto VNT era 94%, que era ligeira mais baixo do que a sensibilidade de VNT convencional (98%) e do immunoassay multiplex de Luminex (96%). Os cientistas observaram que a sensibilidade de convencional e do substituto VNTs diminuiu em alvos altos da especificidade. Um grupo de 16 amostras que foram recolhidas dos pacientes COVID-19 14 dias depois que o diagnóstico COVID-19 ou 5 meses após a infecção mostraram resultados positivos em VNT convencional mas resultados negativos no substituto VNT. Isto indica que o sincronismo da coleção da amostra pode afectar a sensibilidade de ensaios serological.

Baseado na análise de amostras africanas, os cientistas calcularam uma sensibilidade de 88% para o substituto VNT, que era mais baixo do que a sensibilidade de VNT convencional (99%). Usando uma análise estatística mais adicional, observaram uma correlação significativa entre titers do anticorpo dos ensaios serological diferentes incluídos no estudo.

As correlações entre a porcentagem da inibição mediram pelo teste de neutralização viral substituto e pelo registro (factores da diluição ou relação de relação sinal-ruído) para o teste de neutralização viral convencional ou o ensaio imunológico multiplex de Luminex como calculado pelo teste nonparametric da correlação do Spearman (rs). Os níveis da interrupção do Seropositivity para o sVNT são indicados pelas linhas cinzentas tracejadas na inibição de 20 ou de 30%. As amostras negativas no cVNT ou no MIA não foram incluídas nestas figuras.
As correlações entre a porcentagem da inibição mediram pelo teste de neutralização viral substituto (sVNT) e pelo registro (factores da diluição ou relação de relação sinal-ruído) para o teste de neutralização viral convencional (cVNT) ou o ensaio imunológico multiplex de Luminex (MIA) como calculado pelo teste nonparametric da correlação do Spearman (rs). Os níveis da interrupção do Seropositivity para o sVNT são indicados pelas linhas cinzentas tracejadas na inibição de 20 ou de 30%. As amostras negativas no cVNT ou no MIA não foram incluídas nestas figuras.

Significado do estudo

Total, o estudo destaca o potencial de um teste de neutralização substituto do vírus para a avaliação em grande escala dos anticorpos anti-SARS-CoV-2 em amostras do soro. Devido ao nível relativamente mais baixo da sensibilidade, o teste não pode ser tão eficaz quanto outros ensaios serological ao diagnosticar a infecção SARS-CoV-2 no individual-nível. Contudo, uma estadia de detecção rápida do anticorpo e uma exigência mais baixa da seguridade biológica fazem o teste particularmente eficaz para o serosurveillance a nível da população, que é importante para calcular a predominância exacta de COVID-19.

Os cientistas igualmente mencionam a utilidade do teste para a avaliação vacinal, particularmente nos países sócio-econòmica destituídos que faltam a suficiente infra-estrutura para conduzir testes de neutralização convencionais do vírus. Porque o teste é espécie e isotipo-independente, pode igualmente ser usado para seleccionar populações animais potenciais e para detectar eventos virais da difusão.

Observação *Important

o medRxiv publica os relatórios científicos preliminares que par-não são revistos e, não devem conseqüentemente ser considerados como conclusivos, guia a prática clínica/comportamento saúde-relacionado, ou tratado como a informação estabelecida.

Journal reference:
Dr. Sanchari Sinha Dutta

Written by

Dr. Sanchari Sinha Dutta

Dr. Sanchari Sinha Dutta is a science communicator who believes in spreading the power of science in every corner of the world. She has a Bachelor of Science (B.Sc.) degree and a Master's of Science (M.Sc.) in biology and human physiology. Following her Master's degree, Sanchari went on to study a Ph.D. in human physiology. She has authored more than 10 original research articles, all of which have been published in world renowned international journals.

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