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¿Podían los lampazos secos ofrecer un material más barato, más seguro y más rápido para la prueba SARS-CoV-2?

El peaje social y económico pesado del pandémico de la enfermedad 2019 del coronavirus (COVID-19) ha llevado a upscaling de las estrategias de la prueba para el patógeno causativo, el coronavirus 2 (SARS-CoV-2) de la neumonía asiática.

Un nuevo estudio, liberado como prueba preliminar en el servidor del bioRxiv*, se ocupa de la viabilidad de usar muestras secas del lampazo para aislar el virus, con respecto a los lampazos mojados, para reducir costos mientras que perfecciona seguro.

La necesidad del estudio

Actualmente, la mayoría de las pruebas diagnósticas dependen de la reacción en cadena cuantitativa de polimerasa del transcriptase reverso (RT-qPCR) para descubrir el ácido ribonucleico viral (ARN), conducto en muestras nasofaríngeas u orofaríngeas de pacientes. Sin embargo, este método es costoso, puede ser lento producir resultados y tiene un régimen importante del falso negativo.

Estas desventajas han llevado a la exploración de las técnicas alternativas para la detección del virus. Esto incluye las modificaciones de la técnica de la polimerización en cadena, eliminando el ambiente del transporte, por ejemplo, o dejando fuera el paso de la extracción del ARN.

La investigación anterior ha señalado que el umbral del ciclo (Ct) para las pruebas de la polimerización en cadena realizadas en los lampazos secos, es decir, ésos incubados en condiciones secas, y mojó los lampazos, incubados en ambientes mojados. Esto tiene también, con las modificaciones antedichas, aumentadas la posibilidad de reducir la época de la prueba y el costo de la prueba.

Los lampazos de la aerovía superior también se utilizan para descubrir partículas virales infecciosas. Esto es importante porque la presencia de fragmentos genomic virales o aún del genoma entero no es un indicador de la contagiosidad. Incluso las semanas después de que se autorice el virus, el ácido nucléico viral puede todavía estar presente en los tejidos del ordenador principal. Esta es la razón por la cual el aislamiento del virus vivo y de la cultura acertada es las únicas pruebas seguras, hasta ahora, que el individuo es infeccioso a la hora de la prueba.

La cultura viral requiere las condiciones del laboratorio III de la seguridad biológica, especímenes de alta calidad y es que toma tiempo. El costo de reactivos y del medio de cultivo debe también ser considerado. Sin embargo, ésta es la aproximación más cercana a una prueba del patrón oro de la contagiosidad SARS-CoV-2 disponible hasta ahora.

Objetivo del estudio

El estudio actual apunta explorar la viabilidad de SARS-CoV-2 para la cultura del virus en muestras secas del lampazo. Las existencias virales del título sabido fueron inoculadas en inóculos específicos en los lampazos, apenas como las muestras cerco de pacientes.

Los lampazos fueron agrupados en tres grupos que se tramitarán por separado. El primer era el grupo salvado como lampazos secos; el segundo comprendió los lampazos salvados en ambiente del transporte del virus; y el grupo pasado contuvo los lampazos salvados en la solución tampón. Éstos entonces fueron incubados en la temperatura ambiente, 25°C, así como 4°C.

La incubación fue realizada por 1, 4, 8, 12, 24, 48 y 72 horas, siguiendo que todas fueron guardadas en -80°C hasta el paso siguiente. Los lampazos claveteados entonces fueron utilizados para infectar las células de Vero en cultura.

El ambiente entonces fue reemplazado por un ambiente fresco. Las células no infectadas de Vero actuaban como mandos de la célula, mientras que las células infectadas con las existencias sabidas del virus fueron utilizadas como mandos de la infección, respectivamente.

La extracción del ARN entonces fue realizada, y el ARN fue descubierto usando el RT-qPCR. Los genes descubrieron incluyeron el ORF 1ab y nucleoproteína N.

¿Cuáles eran los resultados?

Los lampazos en los tres grupos experimentales rendidos el virus se enjuagan que eran viables a los fragmentos similares en la temperatura ambiente y 4Co. Los valores del Ct en todos los grupos eran comparables, es decir para el ORF 1ab y el gen de N.

Los valores del Ct colocaron entre 16 y 19 después mientras 12 horas, en ambas temperaturas, a saber, en 25Co y en 4Co.

Los valores del Ct subieron despacio después de 24 horas de almacenamiento, hasta 72 horas, entre a 24 y a 36. Esto sugiere una disminución de la viabilidad viral en un cierto plazo, tales que esté recomendado para recuperar partículas virales de las muestras experimentales tan pronto como sea posible.

Sin embargo, los resultados también muestran que los valores del Ct son más inferiores por cerca de 2 con el virus del grupo del proteger-almacenamiento de lampazos, comparado a los otros dos.

¿Cuáles son las implicaciones?

En el actual estudio, demostramos que los aislantes virales viables se pueden obtener y propagar del método de colección seco de la muestra del lampazo.” El uso de lampazos secos hace el muestreo de pacientes más fácil y evita el uso de los ambientes líquidos del transporte.

Estas características, además de la ausencia de cualquier necesidad del uso de los ambientes del transporte del virus, y para la extracción del ARN, rinden el proceso de la prueba más rápidamente, más barato y más seguro. Por otra parte, permitiría que las partículas viables del virus fueran cultivadas para los diversos objetivos de investigación, como demuestra que tales partículas pueden ser obtenidas después de incubar el lampazo seco en la temperatura ambiente o en 4Co.

Advertencia *Important

el bioRxiv publica los partes científicos preliminares que par-no se revisan y, por lo tanto, no se deben mirar como concluyentes, conduce práctica clínica/comportamiento relativo a la salud, o tratado como información establecida.

Journal reference:
Dr. Liji Thomas

Written by

Dr. Liji Thomas

Dr. Liji Thomas is an OB-GYN, who graduated from the Government Medical College, University of Calicut, Kerala, in 2001. Liji practiced as a full-time consultant in obstetrics/gynecology in a private hospital for a few years following her graduation. She has counseled hundreds of patients facing issues from pregnancy-related problems and infertility, and has been in charge of over 2,000 deliveries, striving always to achieve a normal delivery rather than operative.

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