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L'étude neuve aidera à vérifier des réactions immunitaires innées aux viraux infection

Les chercheurs de l'École de Médecine d'université de Boston (BUSM) enregistrent la formation des cellules humaines contenant une protéine ou un GFP fluorescente verte (une des protéines les plus importantes dans la représentation de biologie et de fluorescence) génétiquement protégé par fusible avec deux gènes stimulés par interféron (ISGs), à savoir Viperin et ISG15. Cette création neuve prépare à ces cellules les réactifs hautement précieux pour enregistrer des réactions immunitaires innées aux viraux infection, y compris ceux provoqués par des coronaviruses.

Ces cellules conçues, qui tournent le vert une fois traitées avec de l'interféron, sont hautement nouvelles parce que c'est la première fois un gène de journaliste (un gène qui active le dépistage ou la mesure de l'expression du gène), comme le GFP, a été insérées dans des lieux endogènes des ISG.

Cellules humaines de cause de viraux infection pour déclencher une alarme biochimique par l'intermédiaire de la signalisation d'interféron, menant à une expression de haut niveau des ISG. Cependant, les ISG sont les gènes très fortement réglés, parce qu'excessive expression et une incapacité de tasser plus tard vers le bas des niveaux d'ISG peuvent être juste comme nuisibles à la santé cellulaire.

Cette signalisation immunisée innée trop active mène à une « tempête de cytokine » (quand une infection déclenche le système immunitaire pour noyer votre circulation sanguine avec des cytokines appelées de protéines inflammatoires) qui discerne un cas doux de l'infection par un virus des sympt40mes entièrement débilitants, des résultats tous trop répandus dans la pandémie COVID19.

De meilleurs outils de recherches pour étudier le règlement d'ISG sont nécessaires toujours, pas en ce moment pour la recherche de coronavirus mais pour beaucoup d'autres virus aux lesquels notre société fera face. »

Le Nelson Lau, PhD, auteur Co-Correspondant d'étude et professeur agrégé des biochimies, École de Médecine d'université de Boston

Afin d'étiqueter avec succès les gènes antiviraux humains avec le GFP, les chercheurs ont dû la première fois produire une méthodologie neuve pour produire une longue matrice de réparation de l'ADN pour une retouche plus efficace et plus authentique du génome CRISPR-Cas9 en cellules animales. Ils ont nommé sa méthodologie de matrice le BL3SSO (ressemble à du « blasso ») parce qu'il a installé l'ADN pour un réglage plus précis et pour l'introduction d'un transgène fluorescent comme le GFP dans le site coupez par Cas-9 pendant la retouche de génome.

Ces découvertes sont le résultat d'une collaboration entre le laboratoire de Lau et le laboratoire de Mohsan Saeed, PhD, des membres de la faculté dans le service de BUSM des biochimies et des chercheurs aux laboratoires apparaissants nationaux de maladies infectieuses de BU (NEIDL).

Source:
Journal reference:

Bandyopadhyay, S., et al. (2021) DNA templates with blocked long 3' end single-stranded overhangs (BL3SSO) promote bona fide Cas9-stimulated homology-directed repair of long transgenes into endogenous gene loci. G3: Genes, Genomes, Genetics. doi.org/10.1093/g3journal/jkab169.