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El nuevo estudio ayudará a investigar inmunorespuestas naturales a las infecciones virales

Los investigadores de la Facultad de Medicina de la universidad de Boston (BUSM) denuncian la formación de células humanas que contienen una proteína o un GFP fluorescente verde (una de las proteínas más importantes de la proyección de imagen de la biología y de la fluorescencia) genético fundido con dos genes estimulados interferón (ISGs), a saber Viperin e ISG15. Esta nueva creación hace estos reactivos altamente valiosos de las células para denunciar inmunorespuestas naturales a las infecciones virales, incluyendo ésos causados por los coronaviruses.

Estas células dirigidas, que giran verde cuando están tratadas con interferón, son altamente nuevas porque éste es la primera vez un gen del reportero (un gen que habilita la detección o la medición de la expresión génica), por ejemplo GFP, se han insertado en lugares geométricos endógenos de los ISG.

Las infecciones virales hacen las células humanas sonar una alarma bioquímica vía la transmisión de señales del interferón, llevando a una expresión de alto nivel de los ISG. Sin embargo, los ISG son genes muy apretado regulados, porque demasiada expresión y una incapacidad de apisonar más adelante hacia abajo niveles del ISG pueden estar apenas como perjudiciales a la salud celular.

Esta transmisión de señales inmune natural activa lleva a una “tormenta del cytokine” (cuando una infección acciona el sistema inmune para inundar su circulación sanguínea con las proteínas inflamatorias llamadas los cytokines) que distinga un caso suave de la infección del virus de síntomas completo debilitantes, un frecuente demasiado del resultado en el pandémico COVID19.

Mejores herramientas de la investigación para estudiar la regla del ISG todavía se necesitan, no ahora mismo para la investigación del coronavirus pero para muchos otros virus con los cuales nuestra sociedad afirme.”

Nelson Lau, doctorado, autor Co-Correspondiente del estudio y profesor adjunto de la bioquímica, Facultad de Medicina de la universidad de Boston

Para marcar con éxito genes con etiqueta antivirus humanos con GFP, los investigadores primero necesitaron producir una nueva metodología para crear un patrón largo de la reparación de la DNA para un genoma más eficiente y más auténtico CRISPR-Cas9 que corregía en las células animales. Nombraron su metodología del patrón el BL3SSO (suena como “blasso”) porque fijó la DNA para una reparación más exacta y para la introducción de un transgén fluorescente como GFP en el sitio corte por Cas-9 durante corregir del genoma.

Estas conclusión son el resultado de una colaboración entre el laboratorio de Lau y el laboratorio de Mohsan Saeed, doctorado, los miembros del profesorado en el departamento de BUSM de la bioquímica y los investigadores en los laboratorios nacionales infecciosas emergente de las enfermedades de los BU (NEIDL).

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Journal reference:

Bandyopadhyay, S., et al. (2021) DNA templates with blocked long 3' end single-stranded overhangs (BL3SSO) promote bona fide Cas9-stimulated homology-directed repair of long transgenes into endogenous gene loci. G3: Genes, Genomes, Genetics. doi.org/10.1093/g3journal/jkab169.