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Le test neuf est meilleur marché, plus facile, et peut sûrement diagnostiquer l'infection SARS-CoV-2

Le test de flux transversal neuf vigilant est meilleur marché, plus facile à utiliser-et aussi fiable que le test actuel d'ACP d'étalon-or pour diagnostiquer l'infection SARS-CoV-2.

Un SARS-CoV-2 le test de flux que transversal qui combine deux enzymes bactériennes avec des séquences génétiques et quelques sondes est meilleur marché et plus facile pour employer que l'ACP vérifie tout en produisant des résultats comparablement fiables. Vigilant appelé et conçu à KAUST, le test peut trouver très des petites quantités d'ARN viral dans un échantillon.

Plusieurs types de tests de flux transversaux sont actuellement disponibles ou sous la recherche pour trouver SARS-CoV-2. Selon la façon dont ils fonctionnent, ils tous ont des désavantages, y compris trouver le virus seulement plusieurs jours après infection ou produire des résultats de faux positif et de faux négatif. »

Étamez Marsic, dites Ph.D. Student, KAUST

Les tests d'ACP, qui sont effectués dans les laboratoires, des résultats plus fiables de produit mais sont chers et exigent le matériel sophistiqué et le personnel qualifié.

« Vigilant peut être conduit dans les réglages nonlaboratory et est sensiblement meilleur marché et plus facile pour employer que des tests d'ACP, » dit Marsic.

La première étape indispensable de la plate-forme vigilante concerne une amplification inverse appelée de polymérase de transcription-recombinase de technique (RT-RPA) pour tirer beaucoup de copies d'une région spécifique sur le génome SARS-CoV-2, si elle existe dans l'échantillon d'écouvillon du nez et de la gorge d'une personne. Les tests d'ACP également amplifient des séquences du gène virales dans les échantillons mais les concernent mettre les échantillons pendant les cycles multiples de la température de ciel et terre. RT-RPA peut être température ambiante de doneat avec le matériel beaucoup meilleur marché et facile à utiliser.

Tous les gènes amplifiés par SARS-CoV-2 dans le produit de ce procédé sont étiquetés avec de la biotine appelée de molécule, puis ajoutés à une éprouvette contenant le composé particulièrement conçu de dépistage de KAUST.

Ce composé est constitué de deux enzymes. Sur une extrémité, une enzyme bactérienne Cas9 appelé est conjuguée avec un guide d'ARN qui seulement décèle et fixe à la séquence du gène SARS-CoV-2 correspondante. Sur l'autre extrémité, une autre enzyme bactérienne VirD2 appelé est fixée à une séquence de nucléotides fluorescent-étiquetée.

Des gouttes de la réaction entre le composé et le produit de RT-RPA sont alors ajoutées à une bande d'essai transversale de flux imbibée d'un streptavidin appelé de biotine-décèlement de protéine sur une extrémité et d'un anticorps de sonde-décèlement fluorescent de l'autre. Si l'échantillon contient les séquences du gène SARS-CoV-2, elles auront lié au composé VirD2-Cas9. Un résultat positif se produit quand deux lignes visibles apparaissent. La première ligne est où la biotine sur l'amplicon SARS-CoV-2 grippe au streptavidin. La deuxième ligne est où la balise fluorescente sur l'autre extrémité des attaches de composé à l'anticorps du filet. Un résultat négatif montre seulement comme ligne unique provoquée par la balise fluorescente grippant à l'anticorps.

« Nous travaillons maintenant à rendre notre plate-forme vigilante plus conviviale en l'accouplant avec une technique encore plus simple d'amplification, » dit le bioengineer Magdy Mahfouz de KAUST, qui a abouti la recherche. « Nous travaillons également à produire d'autres tests diagnostique efficaces et rapides qui peuvent trouver les acides nucléiques pour activer le contrôle de remarque-de-soins pour des agents pathogènes, y compris des virus et des bornes de la maladie. »

Source:
Journal reference:

Marsic, T., et al. (2021) Vigilant: An engineered VirD2-Cas9 complex for lateral flow assay-based detection of SARS-CoV-2. Nano Letters. doi.org/10.1021/acs.nanolett.1c00612.