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O estudo sugere que ensaio da harmonia COVID-19 seja superior aos testes laboratório-baseados

Um estudo novo sugere que um teste novo do coronavirus desenvolvido por cientistas da universidade de Washington e do instituto de Brotman Baty para a medicina da precisão produza uns resultados mais rápidos e mais sensíveis do que testes convencionais do PCR ao RNA viral do coronavirus 2 da Síndrome Respiratória Aguda Grave da medida (SARS-CoV-2).

O jogo do teste de RT-LAMP conhecido como a “harmonia COVID-19” é um teste do ponto--cuidado projetado ser barato e directo para usar-se com a capacidade para examinar imediatamente até quatro amostras. O dispositivo é pretendido melhorar trabalhadores dos cuidados médicos da ajuda em identificar SARS-CoV-2 nos pacientes.

Os pesquisadores igualmente esperam estender a harmonia COVID-19 para o teste rápido de outras infecções respiratórias, incluindo SARS-CoV-2 sazonal, gripe, e RSV.

A equipe escreve:

Os “testes tais como a harmonia transformar-se-ão uma prática comum para que confirmar a presença de infecções virais que podem ser tratadas com as terapias antivirosas ou que exigem o controle da infecção, assim como ajudá-la reduza o uso impróprio dos antibióticos. Mais, as plataformas do teste desenvolvidas para esta pandemia podiam mais prontamente ser adaptadas para detectar doenças novas para aumentar a prontidão para as pandemias futuras.”

Harmonia COVID-19 do estudo “: um jogo pronto para uso, um detector barato, e um smartphone app para a detecção do RNA do ponto--cuidado SARS-CoV-2” são publicados no server do medRxiv* da pré-impressão.

Como o fizeram

O jogo do teste da harmonia COVID-19 foi avaliado no estudo actual tendo a medida dos trabalhadores dos cuidados médicos o RNA de espécimes maquinados da matriz nasal e da saliva. Além, os trabalhadores dos cuidados médicos igualmente mediram o RNA das amostras clínicas armazenadas.

As amostras clínicas frescas não poderiam ser obtidas a tempo para o estudo, que os autores reconhecem são uma limitação do estudo.

Os trabalhadores dos cuidados médicos aprenderam como usar o teste com algumas instruções escritas e um vídeo que detalha o procedimento.

Trabalhos da harmonia COVID-19, desempenho analítico, e interpretação. (a) Trabalhos do usuário. Um cotonete nasal é recolhido e eluted no amortecedor do rehydration usando um demonstrador-distribuidor unificado (mostrado) ou um método do câmara de ar-e-bulbo (Fig. 8). O eluído do cotonete é transferido então na câmara de ar da reacção para rehydrate reagentes liofilizados, pre carregados de RT-LAMP. Os usuários seguem as instruções no telemóvel app para gravar a identidade da amostra, introduzem a câmara de ar no entalhe do teste, e próximo o dispositivo. Quatro amostras podem ser analisadas paralelamente. (Créditos de foto: (A) 1 (A) 4, pedra de Mark na universidade de Washington e (A) 5, Christopher Snyder na faculdade norte de Seattle). (b) Exemplos da análise do em-dispositivo. Os reagentes liofilizados rehydrated com o eluído dos cotonetes cravados com 0, 200, 2000, ou 20.000 cópias do RNA SARS-CoV-2, corrida no dispositivo, e analisados no tempo real. As amostras com RNA SARS-CoV-2 em 2000, 200, e 20 cópias/reacção (rxn) foram relatadas como o positivo pelo software o minuto 27 no minuto, 30, e o minuto 41, respectivamente; após o minuto 60 a reacção de NTC foi classificada como o negativo. (c) Tempo-à-resultado. Os pontos individuais do tempo de detecção (n = 3) são traçados. A variação no tempo de detecção aumenta enquanto as amostras aproximam o limite de detecção. (d) Algoritmo diagnóstico. O software da harmonia COVID-19 chama amostras como positivas, negativas, ou indeterminado baseado na detecção das três regiões no gene do nucleocapsid (harmonia NC1 que sobrepor com a região do CDC N1, harmonia NC2 (sobrepor com a região do CDC N3 excluída do jogo actual), e harmonia NC3 que sobrepor com a região do N2 do CDC) e na seqüência projetada do IAC.
Trabalhos da harmonia COVID-19, desempenho analítico, e interpretação. (a) Trabalhos do usuário. Um cotonete nasal é recolhido e eluted no amortecedor do rehydration usando um demonstrador-distribuidor unificado (mostrado) ou um método do câmara de ar-e-bulbo (Fig. 8). O eluído do cotonete é transferido então na câmara de ar da reacção para rehydrate reagentes liofilizados, pre carregados de RT-LAMP. Os usuários seguem as instruções no telemóvel app para gravar a identidade da amostra, introduzem a câmara de ar no entalhe do teste, e próximo o dispositivo. Quatro amostras podem ser analisadas paralelamente. (Créditos de foto: (A) 1 (A) 4, pedra de Mark na universidade de Washington e (A) 5, Christopher Snyder na faculdade norte de Seattle). (b) Exemplos da análise do em-dispositivo. Os reagentes liofilizados rehydrated com o eluído dos cotonetes cravados com 0, 200, 2000, ou 20.000 cópias do RNA SARS-CoV-2, corrida no dispositivo, e analisados no tempo real. As amostras com RNA SARS-CoV-2 em 2000, 200, e 20 cópias/reacção (rxn) foram relatadas como o positivo pelo software o minuto 27 no minuto, 30, e o minuto 41, respectivamente; após o minuto 60 a reacção de NTC foi classificada como o negativo. (c) Tempo-à-resultado. Os pontos individuais do tempo de detecção (n = 3) são traçados. A variação no tempo de detecção aumenta enquanto as amostras aproximam o limite de detecção. (d) Algoritmo diagnóstico. O software da harmonia COVID-19 chama amostras como positivas, negativas, ou indeterminado baseado na detecção das três regiões no gene do nucleocapsid (harmonia NC1 que sobrepor com a região do CDC N1, harmonia NC2 (sobrepor com a região do CDC N3 excluída do jogo actual), e harmonia NC3 que sobrepor com a região do N2 do CDC) e na seqüência projetada do IAC.

Os resultados sugerem a precisão alta e a sensibilidade no ensaio do teste

O teste da harmonia COVID-19 produziu um teste rápido barato e directo com as características similares aos testes laboratório-baseados convencionais. Os trabalhadores dos cuidados médicos tiveram uma precisão de 95% ao usar o ensaio.

Os resultados igualmente mostraram que o jogo de teste da harmonia COVID-19 teve a sensibilidade alta.

Os reagentes prontos para uso no jogo de teste ajudaram com especificidade e precisão. O ensaio detectou aproximadamente 15 cópias/reacção do RNA SARS-CoV-2 sintético e das amostras reais do RNA recolhidos em mais de 20 cópias/reacção sem falsos positivos. O teste podia igualmente dar resultados para amostras virais altas da carga em 17 minutos.

O teste igualmente detectou com sucesso amostras com mais de 20 partículas virais na matriz nasal humana. Além, o teste teve a sensibilidade moderado para a saliva em concentrações similares.

Especificamente, aproximadamente 97% de amostras maquinadas na matriz nasal foi detectado, e 83% das amostras foram detectadas na saliva.

“Nosso nível actual de sensibilidade do ensaio seria suficiente para detectar SARS-CoV-2 na maioria de cópias nasais dos espécimes (3 ~10 a9 ~10/cotonete) ou os indivíduos contaminados copies/mL4 da saliva (8 ~10 a ~10) durante a primeira semana após o início,” explicaram a equipa de investigação.

Os pesquisadores atribuíram a sensibilidade alta e a especificidade do teste a usar um projecto novo da polimerase e da ponta de prova para especificar entre SARS-CoV-2 da amplificação do IAC.

Melhorias ao ensaio

Os pesquisadores indicam que o ensaio do teste poderia ser alterado para aumentar a detecção de SARS-CoV-2. Explicam aquele que conduz o teste em um refrigerador e uma temperatura mais óptima para a enzima reversa do transcriptase seguida por uma temperatura mais alta para a amplificação do ADN poderia potencial aumentar a velocidade ou a sensibilidade da detecção SARS-CoV-2.

Usar um controle interno da amplificação do RNA que reflectissem mais exactamente o vírus SARS-CoV-2 e que pudesse ser empacotado em um envelope viral poderia igualmente melhorar resultados. O estudo actual teve o uso do ensaio da harmonia COVID-19 um controle interno da amplificação do ADN, que não agarrasse processos de conversão do lysis e do cDNA.

“Os avanços na consciência e na aceitação do teste para infecções na escala, e as plataformas da tecnologia desenvolvidas terão um benefício em curso para o controle COVID-19, reduzindo o dano de outras doenças endémicos, e as pandemias futuras de combate,” concluíram a equipa de investigação.

Observação *Important

o medRxiv publica os relatórios científicos preliminares que par-não são revistos e, não devem conseqüentemente ser considerados como conclusivos, guia a prática clínica/comportamento saúde-relacionado, ou tratado como a informação estabelecida.

Journal reference:
Jocelyn Solis-Moreira

Written by

Jocelyn Solis-Moreira

Jocelyn Solis-Moreira graduated with a Bachelor's in Integrative Neuroscience, where she then pursued graduate research looking at the long-term effects of adolescent binge drinking on the brain's neurochemistry in adulthood.

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