Advertencia: Esta página es una traducción de esta página originalmente en inglés. Tenga en cuenta ya que las traducciones son generadas por máquinas, no que todos traducción será perfecto. Este sitio Web y sus páginas están destinadas a leerse en inglés. Cualquier traducción de este sitio Web y su páginas Web puede ser imprecisa e inexacta en su totalidad o en parte. Esta traducción se proporciona como una conveniencia.

La composición antivirus RG10 actúa vía dinámica intracelular de SARS-CoV-2-ER

Incluso durante las variantes emergentes del coronavirus 2 (SARS-CoV-2) de la neumonía asiática desafían el potencial de lograr inmunidad de la manada por la vacunación, una considerable cantidad de investigación se ha publicado en el promesa de las nuevas moléculas que tienen el potencial de ser efectivas contra este virus.

Una nueva prueba preliminar en el servidor del bioRxiv* describe una pequeña molécula referida como RG10 que pueda tener actividad antivirus potente contra SARS-CoV-2 en células humanas. Con este fin, RG10 aparece actuar rompiendo las acciones recíprocas del retículo (ER) endoplásmico con el virus que son esenciales para la infección productiva.

Estudio: Perturbación farmacológica de la dinámica intracelular como estrategia antivirus Sars-Cov-2. Haber de imagen: Sisacorn/Shutterstock.com

Fondo

Desde que SARS-CoV-2 primero fue determinado como coronavirus beta nuevo, muchos científicos se han centrado en encontrar intervenciones farmacológicas efectivas para contradecir su extensión rápida y extensa. Varias variantes SARS-CoV-2 de la preocupación (VoCS) han emergido que una transmisibilidad y/o una resistencia más altas de la demostración a la neutralización por los anticuerpos sacados por las deformaciones anteriores de SARS-CoV-2 o la vacunación. La aparición de SARS-CoV-2 VoCs ha planteado así un reto en esfuerzos globales de disminuir la morbosidad y la mortalidad causadas por la infección SARS-CoV-2.

Los Antivirals tales como remdesivir, que es un análogo del nucleósido que inhibe SARS-CoV-2 in vitro ascendiendo la formación de una cadena falsa del nucleósido, no pudieron probar altamente efectivo contra este virus. La eficacia limitada de estas composiciones se ha asociado a ambos sus efectos secundarios importantes y a la necesidad de administrarlos intravenoso.

Otros agentes de actuación directa (DAA) que inhiben la enzima viral de la polimerasa han demostrado ser no fiables para el mando a largo plazo. Esto porque los virus del ácido ribonucleico (ARN) como SARS-CoV-2 cambian típicamente su manera de atar vía mutaciones regulares, así está permitiendo que el virus escape tal inhibición. Esto ha aumentado la necesidad de ordenador principal-apuntar agentes (HTA) también.

Objetivo de HTAs las células huesped que fomentan la réplica y la propagación virales. Por lo tanto, ésta es la aproximación preferida cuando está combinada con la vacunación y el DAA.  

Las ventajas del tener una amplia variedad de antivirals son que las drogas repurposed pueden no actuar siempre según lo proyectado, o pueden necesitar ser optimizado para una actividad antivirus más eficiente. Alternativamente, los efectos secundarios de ciertos antivirals pueden ser inaceptables en el nivel de la población. En tercer lugar, pueden escape fácilmente por mutaciones.

Finalmente, usando un cóctel de drogas es siempre útil en la maximización de eficiencia de la droga.

SARS-CoV-2 utiliza sobre todo el receptor de la enzima 2 de la célula huesped angiotensina-que convierte (ACE2) para ganar el asiento en la carrocería. Sin embargo, este virus también requiere a veces la proteasa TMPRSS2 de la serina de la transmembrana para el asiento de la célula, a menos que las células muestren la acidificación endosomal. Cualquier manera, SARS-CoV-2 incorpora la célula vía un mecanismo clathrin-mediado ese da lugar final a la fusión del virus con la membrana celular.

Posteriormente, el genoma viral del ARN, protegido por la nucleoproteína, incorpora el ER para la traslación de proteínas virales y de la réplica viral.

Conclusión del estudio

El estudio actual centrado en una molécula llamó RG10, que es una composición derivada sulfamoyl-fenilo con la actividad antivirus equivalente a la del remdesivir. Esta pequeña molécula nueva no era tóxica a la célula, sino tenía una concentración efectiva mitad-máxima (EC50) de cerca de 1,5 micromolar (μM).

RG10 mostró actividad antivirus excelente contra SARS-CoV-2 in vitro, casi suprimiendo la infección de las células que fueron expuestas previamente a este virus. Además, RG10 fue encontrado para mostrar actividad inhibitoria solamente cuando estaba agregado después del asiento viral, de tal modo indicando que su mecanismo de la acción está suprimiendo la réplica viral, bastante que asiento viral.

Los científicos observaron que la molécula fluorescente-etiqueta RG10 fue agrupada en el ER, junto con los complejos de la réplica del virus, aunque ambas estaban en regiones separadas. Esto significa que RG10 es probable un HTA.

(A-B) las células de Vero E6 fueron tratadas con los derivados indicados o Remdesivir de RG en las concentraciones indicadas e infectadas posteriormente con SARS-CoV-2 en MOI 0,01 para 48 h en presencia de las composiciones. (a) Los niveles relativos del ARN SARS-CoV-2 de las demostraciones del gráfico (vRNA) midieron por el RT-qPCR y normalizado por la expresión del ARN Rpl27. Las barras son medios +/- SD del representante de los duplicados de dos experimentos independientes. La t-prueba del estudiante ** valor de p < 0,01; valor del *** p < 0,005; valor del **** p < 0,001. (B) La citotoxicidad medida por análisis de la baja de LDH no mostró ninguna diferencia importante entre las composiciones. (c) Las células de Vero E6 fueron tratadas con RG10 en las diversas concentraciones e infectadas posteriormente y tramitadas como en el A. IC50 era el µM 1,55 +/- 0,11 según lo medido a partir de tres experimentos independientes. (d) Las células E6 (células del riñón de la grapa), Caco2 (células intestinales humanas) o Huh7.5.1 de Vero (células de hígado humanas), fueron tratadas con 10 el µM RG10 e infectadas posteriormente con CoV2 en MOI 0,01 para 48 h en presencia de las composiciones. Los niveles relativos del ARN CoV2 de las demostraciones del gráfico (vRNA) midieron por el RT-qPCR y normalizado por la expresión del ARN Rpl27. Las barras son medios +/- SD del representante de los duplicados de dos experimentos independientes. La t-prueba del estudiante ** valor de p < 0,01; valor del *** p < 0,005; valor del **** p < 0,001. (e) Las células Huh7.5.1 fueron tratadas con 10 el µM RG10 o 10 el µM Remdesivir e infectadas posteriormente con CoV2 en el MOI indicado para 48 H. Los niveles relativos del vRNA de las demostraciones del gráfico midieron por el RT-qPCR y normalizado por la expresión del ARN Rpl27. Las barras son medios +/- SD del representante de los duplicados de dos experimentos independientes. La t-prueba del estudiante * valor de p < 0,05 y valor del **** p < 0,001. (f) Las células Huh7.5.1 fueron tratadas con 10 el µM RG10 o 10 el µM Remdesivir e infectado posteriormente con SARS-CoV-2 en MOI 0,5 para 48 células del H. entonces era infección lysed del poste de 48 h. Los lysates fueron tramitados para borrar occidental usando un anticuerpo anti del pico SARS-CoV-2 y un anticuerpo anti-GAPDH como mando de cargamento. Ambos immunostainings fueron revelados usando los anticuerpos secundarios acoplados a HRP. Las células del (G) fueron infectadas como en F después reparado y manchado usando un anticuerpo anti de SARS-CoV-2 Nucleocapsid y un anticuerpo J2 el reconocimiento del doble trenzó el representante del ARN (dsRNA) de los complejos virales de la réplica. Los micrográfos muestran los canales individuales que se han detectado usando un microscopio confocal y se han tramitado usando ImageJ. (h) Las muestras fueron tratadas como en F y células estaba la infección separada y fija del poste de 48 h. Las muestras fueron manchadas y analizadas por cytometry de flujo. La t-prueba del estudiante * valor de p < 0,05.

La actividad antivirus de RG10 no fue explicada totalmente por la inducción de la tensión en el ER. En lugar, esta composición retrasó el movimiento del virus al ER para la réplica y la traslación. Es decir, las dinámicas intracelulares de la célula infectada son perturbadas por RG10, previniendo su transporte liso al ER.

RG10 no afectó a la infección del virus de Zika, que está a diferencia del tunicamycin de la molécula, que induce la tensión del ER y afectó a SARS-CoV-2 y a RG10 igualmente. RG10 mostró actividad contra el coronavirus humano 229E, aunque con una potencia más inferior.

RG10 también mostró eficacia antivirus ex vivo en células epiteliales de la aerovía humana, según lo demostrado por su capacidad de reducir la infección viral y la traslación viral de la proteína. En este modelo, la tensión del ER fue inducida por RG10, y la red citoesquelética de la actinia aparecía mostrar el cambio en el lado apical de la célula.

La estabilidad de la molécula RG10 es inferior, explicando su potencia antivirus inferior, que llevó al revelado de un derivado llamado RG10b. Esta molécula estable mostró un EC50 de menos de 1 μM, con una semivida más que triple más arriba comparado a la molécula del padre.

La potencia de RG10b era también más alta que la de RG10. Con este fin, ex vivo el reto con SARS-CoV-2 seguido por el tratamiento con RG10b demostró una potencia equivalente a la del remdesivir.

Implicaciones

Las conclusión de este estudio demuestran un inhibidor potencialmente útil del amplio-espectro del movimiento SARS-CoV-2 al ER. Como consecuencia, RG10b aparece inhibir la réplica viral y la traslación viral de la proteína, todo este tiempo manteniendo alta estabilidad in vivo sin hacer ningunos efectos tóxicos presentarse en las células de cultura.

El objetivo exacto de RG10 sigue siendo desconocido; sin embargo, perturba SARS-CoV-2 y dinámica del ER, así rompiendo el tráfico intracelular. El citoesqueleto de la actinia también aparece llegar a ser desordenado hasta cierto punto en células primarias de HAE después de la exposición a RG10. Sin embargo, a diferencia de la otra actinia los interruptores tienen gusto de Latrunculin, jasplakinolide, y el cytocalasin D, RG10b no muestra citotoxicidad importante.

El cambio en la morfología del ER que seguía la exposición RG10 era otro encontrar. Este cambio en morfología puede contribuir a sus efectos antivirus.

El ER necesita ser restructurado constante para satisfacer el alcance de funciones que sostiene, así permitiendo que las membranas del ER sean un objetivo primero para los patógeno. Por lo tanto, un movimiento dinámico en morfología del ER podía ser una estrategia antivirus; sin embargo, la investigación adicional es necesaria confirmar este mecanismo.

Atlastins es una clase de las composiciones que también afectan al ER. De hecho, la réplica del virus de Zika es reducida por anormalidades en la forma del ER mediada por los atlastins. El papel desempeñado por los atlastins en la infección SARS-CoV-2, eventualmente, no se ha estudiado hasta ahora.

Los investigadores del estudio actual también agregaron al arsenal de nuevas herramientas para estudiar cómo SARS-CoV-2 afecta a la célula infectada. Su uso de las partículas brillantes SARS-CoV-2 que sigue habiendo tan infecciosas como el salvaje-tipo virus se podría imitar en muchos diversos análisis para entender las maneras diferentes en las cuales este virus incorpora la célula huesped.

advertencia *Important

el medRxiv publica los partes científicos preliminares que par-no se revisan y, por lo tanto, no se deben mirar como concluyentes, conduce práctica clínica/comportamiento relativo a la salud, o tratado como información establecida.

Journal reference:
Dr. Liji Thomas

Written by

Dr. Liji Thomas

Dr. Liji Thomas is an OB-GYN, who graduated from the Government Medical College, University of Calicut, Kerala, in 2001. Liji practiced as a full-time consultant in obstetrics/gynecology in a private hospital for a few years following her graduation. She has counseled hundreds of patients facing issues from pregnancy-related problems and infertility, and has been in charge of over 2,000 deliveries, striving always to achieve a normal delivery rather than operative.

Citations

Please use one of the following formats to cite this article in your essay, paper or report:

  • APA

    Thomas, Liji. (2021, September 16). La composición antivirus RG10 actúa vía dinámica intracelular de SARS-CoV-2-ER. News-Medical. Retrieved on November 27, 2021 from https://www.news-medical.net/news/20210916/Antiviral-compound-RG10-acts-via-intracellular-SARS-CoV-2-ER-dynamics.aspx.

  • MLA

    Thomas, Liji. "La composición antivirus RG10 actúa vía dinámica intracelular de SARS-CoV-2-ER". News-Medical. 27 November 2021. <https://www.news-medical.net/news/20210916/Antiviral-compound-RG10-acts-via-intracellular-SARS-CoV-2-ER-dynamics.aspx>.

  • Chicago

    Thomas, Liji. "La composición antivirus RG10 actúa vía dinámica intracelular de SARS-CoV-2-ER". News-Medical. https://www.news-medical.net/news/20210916/Antiviral-compound-RG10-acts-via-intracellular-SARS-CoV-2-ER-dynamics.aspx. (accessed November 27, 2021).

  • Harvard

    Thomas, Liji. 2021. La composición antivirus RG10 actúa vía dinámica intracelular de SARS-CoV-2-ER. News-Medical, viewed 27 November 2021, https://www.news-medical.net/news/20210916/Antiviral-compound-RG10-acts-via-intracellular-SARS-CoV-2-ER-dynamics.aspx.