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Rôle des vésicules extracellulaires encastrées avec ACE2 conçu dans la neutralisation du pseudovirus SARS-CoV-2

La manifestation mondiale de la pandémie de la maladie 2019 de coronavirus (COVID-19), qui a été provoquée par le coronavirus 2 (SARS-CoV-2) de syndrôme respiratoire aigu sévère, a entraîné des dangers sévères à la santé et à l'économie internationales.

Étude : Neutralisation du pseudovirus SARS-CoV-2 utilisant les vésicules extracellulaires d'ACE2-engineered. Crédit d'image : Krasana Antarith/Shutterstock.com

Mouvement propre

Bien que plusieurs vaccins aient été développés contre COVID-19, la disponibilité et l'accessibilité de ces vaccins sont limitées. En outre, il y a eu une augmentation de l'incidence de l'évasion immunisée, même après la vaccination complète par plusieurs de ces vaccins.

Actuel, il n'y a aucun antiviral spécifique contre SARS-CoV-2. Par conséquent, la recherche sur le développement de la thérapeutique anti-SARS-CoV-2 demeure essentielle.

L'entrée de SARS-CoV-2 dans la cellule hôte est régie par les protéines structurelles virales de la pointe (s), qui forment une structure tête tête sur la surface du virion. L'interaction entre la protéine virale de S et le récepteur de l'enzyme de conversion de l'angiotensine 2 de protéine d'hôte (ACE2) est essentielle pour l'infection.

ACE2 s'est avéré pour upregulated dans les patients souffrant de COVID-19 sévère. Cette observation propose que l'obstruction de la protéine de S et de l'ACE2 puisse être considérée comme objectif pour le modèle des médicaments.

Les vésicules extracellulaires (EVs), qui désigné également sous le nom de « chevaux de Troie » naturels pour la distribution et des traitements de médicament, sont des vésicules cellule-dérivées qui ont un diamètre moyen de 100 nanomètres (nm). Puisqu'EVs ont montré la promesse grande dans la portion comme transporteurs des biomacromolecules, plusieurs sociétés pharmaceutiques ont investi dans la recherche et développement d'EVs thérapeutique.

Une étude neuve a visé à développer EVs avec ACE2 encastré génétiquement conçu (nommé EVs-ACE2) ce servir d'antagonistes contre la protéine virale de S. Pris ensemble, ces EVs se sont avérés pour aider à empêcher l'entrée du virus dans les cellules hôte, ainsi que neutralisent le S-pseudovirus.

Au sujet de l'étude

Dans l'étude actuelle, les chercheurs discutent la préparation et la caractérisation d'EVs-ACE2, avec la production et la caractérisation de SARS-CoV-2 S-pseudovirus. L'enquête sur l'inhibition de la pièce d'assemblage virale et du viral infection par EVs-ACE2 a eu lieu in vitro.

In vivo le test d'inhibition a eu lieu dans 6 - à de vieilles souris femelles de huit semaines. L'accès gratuit à la nourriture et à l'eau a été permis d'accéder aux souris au cours de l'expérience.

Les souris ont été divisées en trois groupes, qui ont compris le contrôle neutre, le contrôle négatif qui ont reçu l'EVs-Control, et le groupe expérimental qui a reçu EVs-ACE2. Le tissu de muqueuses nasales a été rassemblé des souris, qui ont été alors soumises à l'analyse occidentale de tache pour déterminer la présence de l'expression de la protéine ACE2.

In vivo, des études préliminaires de sécurité ont été effectuées, où EVs-ACE2 ou EVs-Control ont été administrés dans la fosse nasale de la souris, et du sang de la veine orbitale a été rassemblé trois jours plus tard.  Le sérum obtenu à partir du sang s'est alors analysé avec l'aide d'un analyseur robotisé d'hématologie pour des tests de chimie du sang. L'inspection histopathologique de différents organes de souris a été également effectuée utilisant la souillure de hématoxyline-éosine.

Le schéma 1. (a) mécanisme schématique d'EVs-ACE2 empêchant l'infection SARS-CoV-2. Les EVs-ACE2 ont été dérivés des cellules conçues de HEK293T avec l'expression ACE2 stable. EVs-ACE2 peut compétitif gripper avec les virus par l'intermédiaire de l'interaction d'ACE2/S-protein, de ce fait bloquant le virus pour présenter les cellules hôte. (b) Distributions de grandeurs d'EVs-ACE2 mesuré par NTA. (c) Distributions de grandeurs d'EVs-control. (d) Les diamètres médians de l'EVs. (e) Images de TEM d'EVs-ACE2. Barre d'écaille = 50 nanomètre. (f) Expression ACE2 dans EVs-ACE2 et EVs-Control. (G) la stabilité colloïdale de l'EVs. Des caractéristiques sont présentées en tant que moyen écart-type de ± (n = 3) ; NS, aucune signification.

Découvertes d'étude

Les résultats des études in vitro ont constaté qu'EVs-ACE2 étaient tout à fait efficaces en évitant l'entrée et l'infection de S-pseudovirus dans des cellules hôte.

La recherche précédente a constaté que des charges virales plus élevées sont présentes dans les écouvillons nasaux des patients symptomatiques et asymptomatiques par rapport aux écouvillons de gorge. Les cellules nasales d'épithélium contiennent les cellules ciliées et les cellules de gobelet qui montrent une expression ACE2 plus élevée, de ce fait indiquant que c'est un portail primaire d'entrée de SARS-CoV-2 dans les cellules hôte.

L'épithélium nasal de souris a également montré une expression ACE2 plus élevée. Les résultats de cette étude ont indiqué que la pré-gestion intranasale d'EVs-ACE2 était tout à fait efficace en captant le S-pseudovirus et en évitant son entrée dans les cellules. La neutralisation du virus était sensiblement plus grande chez les souris recevant l'EVs-ACE2 par rapport à ceux qui ont reçu l'EVs-Control.

L'étude actuelle a également indiqué que les régimes positifs de S-pseudovirus au l'EVs-Control et aux groupes témoins neutres étaient 100 fois plus haut par rapport au groupe EVs-ACE2. Supplémentaire, aucun changement important n'a été observé dans le test de chimie du sang et l'analyse histopathologique proposant qu'ils pourraient être en toute sécurité employés.

« Car la muqueuse nasale est une défense de première ligne contre l'infection respiratoire au corps humain, la gestion intranasale de la thérapeutique pourrait être prometteuse en limitant l'écart de COVID-19. »

Traiteurs d'étude

L'équipement de protection matériel peut ne pas pouvoir assurer la protection complète dans les environnements d'intérieur riches en virus. Par conséquent, le développement du médicament intranasal est d'importance accrue, car il pourrait fournir protection.x complémentaire

Journal reference:
Suchandrima Bhowmik

Written by

Suchandrima Bhowmik

Suchandrima has a Bachelor of Science (B.Sc.) degree in Microbiology and a Master of Science (M.Sc.) degree in Microbiology from the University of Calcutta, India. The study of health and diseases was always very important to her. In addition to Microbiology, she also gained extensive knowledge in Biochemistry, Immunology, Medical Microbiology, Metabolism, and Biotechnology as part of her master's degree.

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