Avertissement : Cette page est une traduction automatique de cette page à l'origine en anglais. Veuillez noter puisque les traductions sont générées par des machines, pas tous les traduction sera parfaite. Ce site Web et ses pages Web sont destinés à être lus en anglais. Toute traduction de ce site et de ses pages Web peut être imprécis et inexacte, en tout ou en partie. Cette traduction est fournie dans une pratique.

Les « virus neufs de journaliste le facilitent pour observer SARS-CoV-2 en temps réel

Une version de SARS-CoV-2, le virus qui entraîne la maladie COVID-19, a été avec succès modifiée pour rougeoyer brillamment en cellules et tissus animaux, fournissant une voie en temps réel de suivre la propagation et l'intensité du viral infection pendant qu'elle se produit dans des modèles animaux, des chercheurs à l'état d'institut de recherche biomédicale du Texas (le Texas Biomed) dans le tourillon les démarches de l'académie nationale des sciences (PNAS).

Maintenant nous pouvons suivre où le virus entre dans des modèles animaux pour COVID-19. Pouvant voir comment le virus progresse, et que les organes et la cellule tape il particulièrement vise, sera une grande aide pour comprendre le virus et optimiser des antiviraux et des vaccins. »

Auteur de papier de Luis Martinez-Sobrido, de Ph.D., de professeur, de Texas Biomed, de virologue et de sénior

En plus de suivre le virus, Martinez-Sobrido et ses collaborateurs ont déjà commencé utilisant les virus de journaliste à examiner à quel point le travail de neutralisation d'anticorps contre différentes variantes de préoccupation, comme récent rapporté dans le tourillon de la virologie.

Indiquer les lumières

Pour effectuer le virus de journaliste, Martinez-Sobrido et son équipe ont combiné plusieurs outils avancés de biologie moléculaire pour ajouter la séquence génétique pour les protéines fluorescentes ou bioluminescentes de « journaliste » à code génétique de virus. Pendant que l'indicatif du virus est reproduit et transcrit, est tellement aussi l'indicatif pour les protéines rougeoyantes.

Dans une étude plus tôt, l'équipe a remplacé un des gènes du virus par le gène pour les protéines rougeoyantes, mais ceci a eu comme conséquence un signe très obscur - le gène n'a pas été exprimé asse'à trouver facilement chez les animaux. Pour indiquer la brilliance, les chercheurs ont dû figurer à l'extérieur comment obtenir le virus de produire de plus grandes quantités des protéines de journaliste.

Leur solution : ils ont inséré le gène de journaliste à côté d'un gène différent dans SARS-CoV-2, particulièrement, le codage de gène pour la protéine de nucleocapsid. « C'est la protéine la plus exprimée dans SARS-CoV-2, » a dit le biologiste moléculaire Chengjin YE, Ph.D., un membre de laboratoire de Martinez-Sobrido's. Cette fois, le signe était si lumineux, « il m'a presque aveuglé quand j'ai examiné par le microscope fluorescent, » qu'il a dit.

Des écrans plus rapides

Les protéines de journaliste fonctionnent en cellules et vivent des modèles animaux, en combination avec les systèmes de représentation qui trouvent les longueurs d'onde de la lumière émises par les protéines. Pouvoir observer la charge virale et l'emplacement offre visuellement beaucoup d'avantages par rapport à d'autres méthodes. Il est temps et des matériaux beaucoup plus simples et plus rapides, sauvegardants.

« Au lieu d'avoir besoin d'une grande équipe pour examiner 2.000 composés pour voir s'ils fonctionnent contre le virus, une personne pourrait faire cela avec un virus de journaliste en quelques heures, » le YE a dit.

Il active également suivre le virus chez le même animal au cours de l'infection et de la demande de règlement, réduisant le nombre d'animaux requis pour gagner les analyses assimilées.

Rail des variantes

L'équipe a adapté les virus de journaliste pour exprimer différentes protéines colorées fixées aux variantes SARS-CoV-2 de la préoccupation, qu'elles ont décrites dans un article indépendant dans le tourillon de la virologie. En critique, cette approche leur a permise de vérifier à quel point les travaux de neutralisation d'un anticorps contre deux variantes dans un test bien, en même temps.

« C'est un avantage important pour l'épargne du temps et des moyens, particulièrement avec tant de matières premières comme des plastiques et des réactifs dans une telle forte demande et alimentation limitée dues à la pandémie, » dit le candidat de Kevin Chiem, de Ph.D. et le membre du laboratoire de Martinez-Sobrido's. « Pendant que les variantes neuves apparaissent, nous pouvons facilement adapter le système et examiner rapidement pour à quel point les anticorps fonctionnent contre eux. »

Puissant et précis

D'une manière primordiale, le groupe a expliqué le journaliste que les virus se comportent les mêmes qu'une version de type sauvage du virus. C'est grâce au fait qu'ils n'ont retiré aucun gène viral, et parce qu'ils ont conçu la protéine de journaliste à immédiatement séparé de la protéine du nucleocapsid du virus ainsi elle fonctionne normalement. Leur brilliance de protéine de journaliste d'expositions de recherches marque bien avec la charge virale, bien que l'accumulation de protéine puisse se produire au-dessus de plusieurs jours menant à un signe légèrement plus intense dans certains cas.

L'avancement se fonde sur plusieurs techniques puissantes, y compris des techniques inverses de génétique pour produire de SARS-CoV-2 recombinés, qui joignent ensemble des pièces de code génétique pour produire le plein virus.

Martinez-Sobrido et son équipe ont partagé leur SARS-CoV-2 recombiné et les matériaux non contagieux de précurseur, plasmides appelés, avec plus de 100 laboratoires autour du monde. Ils peuvent maintenant partager les virus de journaliste avec les laboratoires qualifiés avec l'accès de la sécurité (BSL) level-3 de biocontainment, qui est nécessaire pour fonctionner avec SARS-CoV-2, pour aider à combattre la pandémie COVID-19 actuelle encore.

« Nous nous sentons est lui est notre responsabilité de partager ces outils neufs et des technologies avec d'autres chercheurs autour du monde à aider à porter la pandémie à une extrémité aussi rapidement que possible, » Martinez-Sobrido a dit.

Source:
Journal reference:

Ye, C., et al. (2021) Analysis of SARS-CoV-2 infection dynamic in vivo using reporter-expressing viruses. PNAS. doi.org/10.1073/pnas.2111593118.