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Los nuevos “virus del reportero” hacen más fácil observar SARS-CoV-2 en tiempo real

Una versión de SARS-CoV-2, el virus que causa la enfermedad COVID-19, se ha modificado con éxito para brillar intensamente brillantemente en las células y los tejidos animales, ofreciendo una manera en tiempo real de rastrear la extensión y la intensidad de la infección viral como suceso en los modelos animales, los investigadores en el parte biomédico del instituto de investigación de Tejas (Tejas Biomed) en el gorrón los procedimientos de la National Academy of Sciences (PNAS).

Ahora podemos rastrear donde el virus entra en los modelos animales para COVID-19. Pudiendo considerar cómo progresa el virus, y que los órganos y la célula pulsa apunta, será específicamente una ayuda grande para entender el virus y optimizar las drogas y las vacunas antivirus.”

Luis Martínez-Sobrido, Ph.D., profesor, Tejas Biomed, virólogo y autor de papel mayor

Además de rastrear el virus, Martínez-Sobrido y sus colaboradores han comenzado ya usando los virus del reportero a revisar como de bien el trabajo de neutralización de los anticuerpos contra diversas variantes de la preocupación, según lo denunciado recientemente en el gorrón de la virología.

El girar encima de las luces

Para hacer el virus del reportero, Martínez-Sobrido y sus personas combinaron varias herramientas avanzadas de la biología molecular para agregar la serie genética para las proteínas fluorescentes o bioluminiscentes del “reportero” a la clave genética del virus. Mientras que se repliega y se transcribe la clave del virus, está tan también la clave para las proteínas que brillan intensamente.

En un estudio anterior, las personas reemplazaron uno de los genes del virus por el gen para las proteínas que brillaban intensamente, pero esto dio lugar a una señal muy oscuro - el gen no fue expresado suficientes que se descubrirán fácilmente en animales. Para girar encima de la luminosidad, los investigadores tuvieron que imaginar cómo conseguir el virus producir las mayores cantidades de las proteínas del reportero.

Su solución: insertaron el gen del reportero al lado de un diverso gen en SARS-CoV-2, específicamente, la codificación del gen para la proteína del nucleocapsid. “Es la proteína expresada de SARS-CoV-2,” dijo al biólogo molecular Chengjin YE, Ph.D., pieza del laboratorio de Martínez-Sobrido's. Esta vez, la señal era tan brillante, “casi me cegó cuando observaba a través del microscopio fluorescente,” que él dijo.

Pantallas más rápidas

Las proteínas del reportero trabajan en células y modelos del animal vivo, conjuntamente con los sistemas de la proyección de imagen que descubren las longitudes de onda de la luz emitidas por las proteínas. El poder observar la carga y la situación virales ofrece visualmente muchas ventajas sobre otros métodos. Es un tiempo y materiales mucho más simples y más rápidos, que salvan.

“En vez de necesitar a personas grandes revisar 2.000 composiciones para ver si trabajan contra el virus, una persona podría hacer eso con un virus del reportero en algunas horas,” YE dijo.

También habilita la búsqueda del virus en el mismo animal a través del curso de la infección y del tratamiento, reduciendo el número de animales necesarios para ganar discernimientos similares.

Búsqueda de variantes

Las personas adaptaron los virus del reportero para expresar diversas proteínas coloreadas sujetadas a las variantes SARS-CoV-2 de la preocupación, que describieron en un papel separado en el gorrón de la virología. Crítico, esta aproximación les ha permitido probar como de bien trabajos de neutralización de un anticuerpo contra dos variantes en una prueba bien, al mismo tiempo.

“Esto es una ventaja importante para salvar tiempo y los recursos, especialmente con tan muchas materias primas como los plásticos y los reactivos en tal de mucha demanda y existencias limitadas debido al pandémico,” dice el candidato de Kevin Chiem, del Ph.D. y a la pieza del laboratorio de Martínez-Sobrido's. “Mientras que emergen las nuevas variantes, podemos adaptar fácilmente el sistema y revisar rápidamente para como de bien los anticuerpos trabajan contra ellos.”

Potente y exacto

Importantemente, el grupo demostró al reportero que los virus se comportan lo mismo que un salvaje-tipo versión del virus. Éste es gracias al hecho que no quitaron ninguna genes viral, y porque diseñaron la proteína del reportero a inmediatamente a parte de la proteína del nucleocapsid del virus tan funciona normalmente. Su luminosidad de la proteína del reportero de las demostraciones de la investigación correlaciona bien con la carga viral, aunque la acumulación de la proteína pueda ocurrir durante varios días que llevan a una señal ligeramente más fuerte en algunos casos.

El adelanto confía en varias técnicas potentes, incluyendo técnicas reversas de la genética para generar SARS-CoV-2 recombinantes, que conectan juntos pedazos de clave genética para producir el virus completo.

Martínez-Sobrido y sus personas han compartido su SARS-CoV-2 recombinante y los materiales no contagiosos del precursor, llamados los plásmidos, con más de 100 laboratorios en todo el mundo. Pueden ahora compartir los virus del reportero con los laboratorios calificados con el acceso del seguro (BSL) level-3 del biocontainment, que es necesario trabajar con SARS-CoV-2, para ayudar a combate el pandémico en curso inmóvil COVID-19.

“Aserramos al hilo somos él somos nuestra responsabilidad de compartir estas nuevas herramientas y las tecnologías con otros investigadores en todo el mundo a ayudar a traer el pandémico a un extremo lo más rápidamente posible,” Martínez-Sobrido dijo.

Source:
Journal reference:

Ye, C., et al. (2021) Analysis of SARS-CoV-2 infection dynamic in vivo using reporter-expressing viruses. PNAS. doi.org/10.1073/pnas.2111593118.