Aviso: Esta página é uma tradução automática da página original em inglês. Por favor note uma vez que as traduções são geradas por máquinas, não tradução tudo será perfeita. Este site e suas páginas da Web destinam-se a ler em inglês. Qualquer tradução deste site e suas páginas da Web pode ser imprecisas e imprecisos no todo ou em parte. Esta tradução é fornecida como uma conveniência.

A infecção dos achados SARS-CoV-2 do estudo é proporcional aos níveis da superfície ACE2 da pilha

Mesmo enquanto a pandemia da doença 2019 do coronavirus (COVID-19) se estava desdobrando, havia já uma evidência que sugere que a doença fosse zoonotic na origem. Uma teoria que ganhou a atenção particular dos media era a probabilidade da transmissão dos bastões selvagens, vendida potencial no mercado molhado em Wuhan, China.

Estudo: As variações em níveis da pilha-superfície ACE2 alteram o emperramento directo da proteína do ponto SARS-CoV-2 e da infectividade viral: Implicações para interacções de medição da proteína do ponto com orthologs ACE2 animais. Crédito de imagem: Kateryna Kon/ShutterstockEstudo: As variações em níveis da pilha-superfície ACE2 alteram o emperramento directo da proteína do ponto SARS-CoV-2 e da infectividade viral: Implicações para interacções de medição da proteína do ponto com orthologs ACE2 animais. Crédito de imagem: Kateryna Kon/Shutterstock

Desde então, a transmissão a diversas outras espécies foi considerada, incluindo o vison e o hamster dourado sírio, e muitas teorizam a capacidade da doença para espalhar a outros primatas não-humanos. Os pesquisadores da universidade estadual de Oregon desenvolveram um sistema para avaliar a capacidade do coronavirus 2 da Síndrome Respiratória Aguda Grave (SARS-CoV-2) para ligar aos orthologs deconversão da enzima 2 (ACE2).

Uma versão da pré-impressão do estudo do grupo está disponível no server do bioRxiv* quando o artigo se submeter à revisão paritária.

O estudo

A proteína do ponto de SARS-CoV-2 é essencial à parogenicidade da doença. É formada de duas subunidades, S1 e S2. O S1 contem um domínio receptor-obrigatório (RBD) que ligue a diversos receptors, primeiramente ACE2, para permitir a entrada viral da pilha. O domínio do N-terminal em S2 é responsável para a fusão da membrana.

Os pesquisadores transfected as pilhas de uma linha celular humana do cancro retal que eram capazes de apoiar a beta-coronavirus réplica. Estas pilhas de HRT-18G transfected com os vectores que contêm o mRNA bicistronic que codificou para os orthologs ACE2 e o rato diferentes Thy1.1, que actuaram como uma proteína do repórter da superfície da pilha. Sabe-se que os orthologs da substituição ACE2 podem permitir que a espécie escape a infecção SARS-COV-2 ou prove suscetível a ele. Diversos estudos modelaram estes efeitos, e alguns in vitro estudos provaram mesmo a susceptibilidade ou a falta disso. Contudo, o método do pesquisador deve permitir uns resultados mais rápidos e mais de confiança e pode facilmente ser adaptado para examinar mais orthologs.

Enquanto o mRNA nos vectores do plasmídeo do ADN foi traduzido pelo mesmo mRNA que o ACE2, a expressão relativa de Thy1.1 poderia pressupr a expressão ACE2 sem criar anticorpos novos para detectar cada ortholog ACE2 ou usar os anticorpos hACE2 que não podem ligar aos orthologs com a mesma afinidade. Usar hACE2 básico no plasmídeo mostrou 95% das pilhas que expressam Thy1.1. Uma proteína etiquetada disponível no comércio de RBD foi incubada ao lado das pilhas, e o cytometry de fluxo mostrou a interacção em uma maneira dependente da concentração. Pseudovirus SARS-CoV-2 que expressa a proteína do ponto e o GFP provados contaminar estas pilhas com somente cinco minutos da exposição.

A função básica do método tinha sido estabelecida uma vez, os cientistas testaram sua hipótese que a expressão Thy1.1 aumentaria com expressão ACE2 e emperramento aumentado e infectividade de RBD. Para explorar a interacção de hACE2 transiente com a proteína do ponto, o PESO HRT-18G e HRT-18G transfected foram manchados com Thy1.1 e etiquetaram fluorescente RBD - mostrar uma correlação positiva forte entre a expressão Thy1.1 e o emperramento de RBD. Igualmente descobriram que quando GFP etiquetou os pseudoviruses SARS-COV-2 que levam a proteína do ponto, a porcentagem de pilhas GFP-positivas contaminadas era a mais alta nas pilhas que expressam níveis elevados de ACE2, mais adicional confirmando sua hipótese que as pilhas que expressam uns níveis mais altos de ACE2 seriam mais suscetíveis à infecção.

Para testar os orthologs ACE2 diferentes, as linha celular adicionais de HRT18G foram geradas usando o sistema acima mencionado. Estas linha celular expressaram orthologs domésticos felinos ou do rato ACE2 a níveis equivalentes. Estas pilhas foram manchadas com os anticorpos para hACE2 - não mostrar nenhum resultado positivo. As interacções de SARS-CoV-2 RBD foram testadas incubando as pilhas com o RBD fluorescente etiquetado e medindo a ligação com cytometry de fluxo.

O rato ACE2 não mostrou nenhuma interacção entre o ACE2 e a proteína do ponto - qual é curioso, porque a transmissão a diversas espécies do roedor foi observada in vivo. Contudo, diversos outros estudos igualmente mostraram que o musculus ACE2 de Mus não pode interagir com o SARS-CoV-2. ACE2 humano mostrou a afinidade a mais forte, seguida por ACE2 felino. A expressão Thy1.1 mostrou que todos os orthologs ACE2 estiveram expressados equivalente. A confirmação que usa os pseudoviruses SARS-CoV-2 previamente mencionados mostrou o mesmo teste padrão, com as pilhas hACE2 que mostram a maioria de infecção, seguida por ACE2 felino e então murine.

Conclusão

Quando os pesquisadores fornecerem alguma introspecção na capacidade de SARS-CoV-2 à propagação aos ratos e aos gatos, o grande benefício de sua pesquisa é o método novo para examinar a capacidade de SARS-CoV-2 para ligar aos orthologs ACE2. Diversos estudos relataram resultados de oposição no mesmo ortholog, que poderia ser devido ao anticorpo monoclonal usado para detectar a expressão.

Com este sistema, os orthologs diferentes podem ser comparados sem preocupar-se sobre afinidade obrigatória ou tomar o momento de encontrar um anticorpo monoclonal que ligue eficazmente ao ortholog desejado. As introspecções potenciais deste sistema podiam fornecer a informação valiosa na capacidade de SARS-CoV-2 à propagação à outra espécie e à probabilidade de um outro evento zoonotic. Isto podia provar inestimável aos responsáveis políticos e aos cientistas da saúde pública que tentam modelar o futuro da pandemia.

observação *Important

o bioRxiv publica os relatórios científicos preliminares que par-não são revistos e, não devem conseqüentemente ser considerados como conclusivos, guia a prática clínica/comportamento saúde-relacionado, ou tratado como a informação estabelecida.

Journal reference:
  • Kazemi S. et al., (2021) Variations in cell-surface ACE2 levels alter direct binding of SARS-CoV-2 Spike protein and viral infectivity: Implications for measuring Spike protein interactions with animal ACE2 orthologs. bioRxiv. doi: https://doi.org/10.1101/2021.10.21.465386
Sam Hancock

Written by

Sam Hancock

Sam completed his MSci in Genetics at the University of Nottingham in 2019, fuelled initially by an interest in genetic ageing. As part of his degree, he also investigated the role of rnh genes in originless replication in archaea.

Citations

Please use one of the following formats to cite this article in your essay, paper or report:

  • APA

    Hancock, Sam. (2021, October 26). A infecção dos achados SARS-CoV-2 do estudo é proporcional aos níveis da superfície ACE2 da pilha. News-Medical. Retrieved on January 23, 2022 from https://www.news-medical.net/news/20211026/Study-finds-SARS-CoV-2-infection-is-proportional-to-cell-surface-ACE2-levels.aspx.

  • MLA

    Hancock, Sam. "A infecção dos achados SARS-CoV-2 do estudo é proporcional aos níveis da superfície ACE2 da pilha". News-Medical. 23 January 2022. <https://www.news-medical.net/news/20211026/Study-finds-SARS-CoV-2-infection-is-proportional-to-cell-surface-ACE2-levels.aspx>.

  • Chicago

    Hancock, Sam. "A infecção dos achados SARS-CoV-2 do estudo é proporcional aos níveis da superfície ACE2 da pilha". News-Medical. https://www.news-medical.net/news/20211026/Study-finds-SARS-CoV-2-infection-is-proportional-to-cell-surface-ACE2-levels.aspx. (accessed January 23, 2022).

  • Harvard

    Hancock, Sam. 2021. A infecção dos achados SARS-CoV-2 do estudo é proporcional aos níveis da superfície ACE2 da pilha. News-Medical, viewed 23 January 2022, https://www.news-medical.net/news/20211026/Study-finds-SARS-CoV-2-infection-is-proportional-to-cell-surface-ACE2-levels.aspx.