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Antígeno do soro SARS-CoV-2: Um predictor melhor da severidade COVID-19

Os testes de diagnóstico jogaram um papel crucial durante a onda global de COVID-19. O diagnóstico da bandeira de ouro para a infecção do coronavirus 2 da Síndrome Respiratória Aguda Grave (SARS-CoV-2) continua a permanecer ensaios moleculars como a reacção em cadeia reversa da transcriptase-polimerase (RT-PCR) executada em cotonetes (NP) nasopharyngeal. Ensaios mais novos, por exemplo - os immunoassays quimiluminescentes (CLIA) e as únicas disposições moleculars (Simoa), igualmente demonstraram uma boa correlação com o RT-PCR em cotonetes do NP, pelo menos para pontos iniciais do ciclo.

Estudo: Antígenos do soro SARS-CoV-2 para a determinação da severidade COVID-19. Crédito de imagem: anyaivanova/Shutterstock
Estudo: Antígenos do soro SARS-CoV-2 para a determinação da severidade COVID-19. Crédito de imagem: anyaivanova/Shutterstock

Apesar da sensibilidade alta de RT-PCR, a correlação entre resultados de RT-PCR dos cotonetes do NP e a severidade da doença foram desafiadas. Além disso, a variabilidade nos valores de ponto inicial (Ct) do ciclo dependentes do procedimento da amostra, assim como da probabilidade de negativos falsos, é alguns dos inconvenientes associados com os resultados de RT-PCR dos cotonetes do NP recolhidos antes do início do sintoma. Em conseqüência, há um espaço para a melhoria nos diagnósticos da infecção SARS-CoV-2. O teste de diagnóstico ideal deve ser capaz de detectar a presença viral com sensibilidade similar ou mais alta do que RT-PCR executada em cotonetes do NP, com uma avaliação superior do valor prognóstico, além do que a exigência de espécimes biológicos facilmente acessíveis.

Rotineiramente, as amostras de sangue são empregadas para determinar a concentração do anticorpo. Ainda, esta técnica é usada raramente nos casos com infecção aguda ou devido à possibilidade de anticorpos de circulação pre-existentes. Uma outra alternativa está examinando o antígeno em líquidos não-respiratórios como circulação-que é suportado pela evidência que SARS-CoV-2 migra dos pulmões na circulação sanguínea.

Nesta perspectiva, um estudo novo publicado no server da pré-impressão do medRxiv* analisou a eficácia clínica de dois testes do antígeno do soro para identificar a infecção do SARS CoV-2 e para avaliar a cinética do nucleocapsid do soro (N) antígeno em pacientes severos e não-severos para a previsão da severidade da doença.

Aqui, o antígeno do soro N foi avaliado usando um CLIA e o Simoa, e os pontos iniciais da severidade foram estabelecidos. Este estudo envolveu 90 pacientes e 243 amostras de sangue recolheram em diferentes épocas depois do início do sintoma. A severidade da doença foi avaliada usando a escala (WHO) clínica da progressão da Organização Mundial de Saúde. O diagrama de fluxo do estudo (em conformidade com a declaração de Helsínquia) foi ilustrado abaixo:

Diagrama de fluxo do estudo
Diagrama de fluxo do estudo

O jogo comercial da vantagem da N-Proteína SARS-CoV-2, um ensaio enzima-ligado sanduíche microbead-baseado paramagnético da imunoabsorção (ELISA), foi usado para examinar as amostras. CLIA detectou os soros pacientes do antígeno de SARS-CoV-2 N dentro -. O PCR do RT para a detecção SARS-CoV-2 em amostras do cotonete do NP foi executado que visa os genes do N2 e do E. Os dados foram analisados usando estatísticas descritivas. Todas as amostras longitudinais da população da pesquisa foram utilizadas para calcular as curvas cinéticas do tempo se usando alisando ranhuras com quatro nós.

Encontrou-se que nos indivíduos com sintomas severos, a reacção máxima do antígeno estêve detectada em day-7 usando ambos os ensaios. Seguindo isso, uma diminuição foi gravada na reacção do antígeno até day-20. A antígeno-resposta em indivíduos não-severos correspondeu a uma fase do platô que se reduzisse gradualmente com tempo. Usando o ensaio de Simoa, a diferença na cinética entre indivíduos severos e não-severos era mais discernível.

Cinética do antigenemia desde o início dos sintomas em pacientes não-severos e severos. As linhas pontilhadas do cinza correspondem à interrupção da positividade de cada ensaio do antígeno, como encontrado por análises das curvas do ROC. A linha pontilhada do preto corresponde à interrupção da positividade do ensaio do iFlash, como declarou o fabricante. As linhas pontilhadas do vermelho correspondem à interrupção da severidade de cada ensaio do antígeno, como encontrado por análises da curva do ROC para o dia 2 - indicador do dia 14. Somente os pacientes com sintomas e o negativo para SARS-CoV-2 o ponto IgG dirigido contra a proteína do ponto foram incluídos nesta representação da cinética.
Cinética do antigenemia desde o início dos sintomas em pacientes não-severos e severos. As linhas pontilhadas do cinza correspondem à interrupção da positividade de cada ensaio do antígeno, como encontrado por análises das curvas do ROC. A linha pontilhada do preto corresponde à interrupção da positividade do ensaio do iFlash, como declarou o fabricante. As linhas pontilhadas do vermelho correspondem à interrupção da severidade de cada ensaio do antígeno, como encontrado por análises da curva do ROC para o dia 2 - indicador do dia 14. Somente os pacientes com sintomas e o negativo para SARS-CoV-2 o ponto IgG dirigido contra a proteína do ponto foram incluídos nesta representação da cinética.

O uso destas interrupções da severidade em modelos cinéticos determinou o tempo óptimo desde o sintoma-início em pacientes severos (isto é, 4 a 10 dias). Para ambos os ensaios do antígeno, a sensibilidade clínica era 100% e a especificidade clínica era 92,3%.

Mais, quando o NP RT-PCR foi usado, o valor médio do Ct de pacientes assintomáticos era substancialmente maior do que aquele de pacientes severos. Ao mesmo tempo, nenhuma diferença significativa foi encontrada entre pacientes suaves, moderados e severos. os ensaios do Soro-antígeno revelaram que os pacientes severos tiveram uns níveis mais altos do antígeno. A distinção entre pacientes severos e não-severos era a mais aparente entre os dias 4 e 10.

Nos ensaios de Simoa e de iFlash, as interrupções para identificar pacientes em um risco mais alto para a doença severa foram previstas para ser 5.043 pg/mL e deslocamento predeterminado de 313,8 interrupções (COI). As razão de verosimilhança para estas interrupções eram 30,0 e 10,9, respectivamente, indicando sua capacidade para diferenciar severo dos pacientes não-severos de day-2 a day-14.

Resultados de Antigenemia e de RT-PCR de acordo com a escala clínica da progressão do WHO nas amostras obtidas no dia do diagnóstico, isto é dentro de 12 horas desde o RT-PCR. As linhas pontilhadas do azul correspondem a um ponto inicial do ciclo de 33. A linha pontilhada do vermelho corresponde à interrupção da severidade, como determinado pela curva do ROC analise. As linhas pontilhadas do cinza correspondem à interrupção da positividade de cada ensaio do antígeno, como encontrado por análises das curvas do ROC. A linha pontilhada do preto corresponde à interrupção da positividade do ensaio do iFlash, como declarou o fabricante. Os números médios são representados sobre cada caixa da suiça.
Resultados de Antigenemia e de RT-PCR de acordo com a escala clínica da progressão do WHO nas amostras obtidas no dia do diagnóstico, isto é dentro de 12 horas desde o RT-PCR. As linhas pontilhadas do azul correspondem a um ponto inicial do ciclo de 33. A linha pontilhada do vermelho corresponde à interrupção da severidade, como determinado pela curva do ROC analise. As linhas pontilhadas do cinza correspondem à interrupção da positividade de cada ensaio do antígeno, como encontrado por análises das curvas do ROC. A linha pontilhada do preto corresponde à interrupção da positividade do ensaio do iFlash, como declarou o fabricante. Os números médios são representados sobre cada caixa da suiça.

Notàvel, os pacientes com SARS-CoV-2 cravam níveis de IgG acima da interrupção positiva tiveram estatìstica valores mais altos significativos do Ct e níveis diminuídos do soro-antígeno. Considerando que a maioria dos pacientes (96,6%) com SARS-CoV-2 ponto negativo IgG era positiva para o antígeno no soro com ambos os ensaios.

A análise conduz às seguintes conclusões.

  • A detecção sensível do antígeno de N no soro oferece um marcador novo importante para o diagnóstico COVID-19 que é acessível em todos os laboratórios clínicos e apenas exige uma tracção do sangue.
  • Permite melhorias novas em perspectiva de criar as análises de sangue rápidas do antígeno ou os ensaios integrados de ELISA que detectam antígenos e anticorpos.
  • Significativamente, o antigenemia de avaliação no primeiro início do sintoma do cargo de duas semanas pode ajudar em identificar povos em risco de desenvolver COVID-19 severo.
  • Estes ensaios são mais convenientes como procedimentos de teste para pacientes e podem eventualmente melhorar a triagem clínica a fim aperfeiçoar a utilização dos cuidados intensivos.

Observação *Important

o medRxiv publica os relatórios científicos preliminares que par-não são revistos e, não devem conseqüentemente ser considerados como conclusivos, guia a prática clínica/comportamento saúde-relacionado, ou tratado como a informação estabelecida.

Journal reference:
Nidhi Saha

Written by

Nidhi Saha

I am a medical content writer and editor. My interests lie in public health awareness and medical communication. I have worked as a clinical dentist and as a consultant research writer in an Indian medical publishing house. It is my constant endeavor is to update knowledge on newer treatment modalities relating to various medical fields. I have also aided in proofreading and publication of manuscripts in accredited medical journals. I like to sketch, read and listen to music in my leisure time.

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